一种检测脂代谢异常性高转移乳腺癌的免疫组化染色试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种检测脂代谢异常性高转移乳腺癌的免疫组化染色试剂盒及其应用，属用于癌症的免疫化学实验物质的制备。该试剂盒主要包括脂代谢相关转录因子SREBP1和其下游分子脂肪酸合酶FASN的两种蛋白免疫组化抗体，用于检测来自受试者的离体肿瘤组织中以上两个分子的蛋白表达水平。本发明专利技术根据两个分子相应蛋白的表达水平，用于测定脂代谢异常性高转移乳腺癌，为临床精准治疗方案的制订及患者的预后预测提供依据，具有广阔的应用前景。具有广阔的应用前景。具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种检测脂代谢异常性高转移乳腺癌的免疫组化染色试剂盒及其应用


[0001]本专利技术涉及用于癌症的免疫化学实验物质的制备，具体是一种检测脂代谢异常性高转移乳腺癌的免疫组化染色试剂盒及其应用。

技术介绍

[0002]乳腺癌占全球女性新发癌症总数的24.5%，替代肺癌成为全球发病率第一的恶性肿瘤。肿瘤的复发和转移是导致患者死亡的直接原因。而脂肪酸异常代谢为肿瘤细胞提供了发生发展的基础，肿瘤的代谢重编程往往与肿瘤细胞的转移、侵袭等恶性行为高度相关。但如何能将脂代谢异常性高转移乳腺癌准确诊断并指导精准治疗目前还是空白，迫切需要研究解决。
[0003]固醇调节元件结合转录因子1（SREBP1）为脂代谢的关键转录因子，受到PI3K
‑
mTORC1
‑
AKT信号通路的调节。SREBP1的活性可驱动肿瘤细胞的脂质积累，从而导致细胞代谢的重编程。SREBP1在不同类型肿瘤中发挥的作用也不同，SREBPs可以调节3
‑
羟基
‑3‑
甲基戊二酰辅酶A（HMG
‑
CoA）还原酶的增加，增加前列腺癌对胆固醇的吸收，而间接促进前列腺癌的进展。SREBP1 在结肠癌中高表达，其表达水平与结肠癌的侵袭、转移和血管生成有关。
[0004]脂肪酸合酶（FASN）是长链脂肪酸从头合成的关键酶，可以将多余的能量以甘油三酯形式储存在脂肪组织中。在肿瘤细胞中，90%的脂肪合成来源于FASN催化脂肪酸从头合成这一过程。FASN通过参与肿瘤细胞膜磷脂的合成、能量供给、合成重要的促癌脂质信号分子，促进肿瘤细胞增殖、侵袭转移等恶性生物学行为。FASN在结直肠癌、乳腺癌、肝癌、骨肉瘤、卵巢癌、肺癌、肾母细胞瘤等恶性肿瘤中的表达水平均显著升高，发挥促癌作用。
[0005]截止目前，SREBP1和FASN在乳腺癌侵袭转移机制中发挥的作用未见报道。因此，检测SREBP1和FASN的蛋白表达对脂代谢异常性高转移乳腺癌的诊断、治疗及预后预测都有重要作用。
[0006]目前为止，尚未由鉴定（筛选）脂代谢异常性高转移乳腺癌的试剂盒。

技术实现思路

[0007]本专利技术就是为了解决脂代谢异常性高转移乳腺癌的诊断问题，而提供的一种检测脂代谢异常性高转移乳腺癌的免疫组化染色试剂盒及其应用。
[0008]鉴于SREBP1编码固醇调节元件结合转录因子1蛋白，是直接激活胆固醇和脂肪酸中关键限速酶的主要转录因子。在高转移乳腺癌组织中高表达。脂肪酸合酶(FASN)是脂肪酸代谢重新编程的关键酶之一，能有效地延长脂肪酸合成16
‑
羰基棕榈酸。FASN能促进肿瘤的增殖、侵袭、迁移和转移，从而加速肿瘤的发展。在高转移乳腺癌组织中高表达。
[0009]本专利技术是按以下技术方案实现的：一种检测脂代谢异常性高转移乳腺癌的免疫组化染色试剂盒，该试剂盒主要包括脂代谢相关转录因子SREBP1和其下游分子脂肪酸合酶FASN的两种蛋白免疫组化抗体。
[0010]所述的一种检测脂代谢异常性高转移乳腺癌的免疫组化染色试剂盒，其所述两种蛋白免疫组化抗体分别是人源SREBP1、FASN单克隆抗体。
[0011]SREBP1、FASN两种蛋白免疫组化抗体在制备检测脂代谢异常性高转移乳腺癌的免疫组化染色试剂盒中的应用，其具有促癌作用的SREBP1和FASN组合蛋白分子促进乳腺癌细胞的代谢重编程，在高转移的乳腺癌组织中其蛋白高表达，用于筛选出脂代谢异常性高转移乳腺癌。
[0012]所述的SREBP1、FASN两种蛋白免疫组化抗体在制备检测脂代谢异常性高转移乳腺癌的免疫组化染色试剂盒中的应用，其组合蛋白分子SREBP1、FASN的蛋白表达水平为脂代谢异常性高转移乳腺癌的诊断、治疗及预后预测提供极其重要的依据。
[0013]这样设计的本专利技术，通过联合检测SREBP1、FASN的蛋白表达水平，对乳腺癌组织中的脂代谢水平进行检测分析，筛选出脂代谢异常性高转移乳腺癌，为肿瘤的精准诊治及预后预测提供重要依据。
附图说明
[0014]图1是高转移乳腺癌的单细胞转录组测序图谱及FASN随拟时间轨迹变化图；图2是高转移乳腺癌空间转录组测序图及FASN在高转移癌亚群中表达图；图3是７个IMPC亚群的共同高表达基因为SREBF1示意图；图4是乳腺癌组织中SREBP1和FASN的免疫组化检测图；图5是高转移乳腺癌中SREBP1和FASN表达与预后之间的相关性示意图；图6是TCGA数据库中SREBF１和FASN表达量之间的相关性示意图。
具体实施方式
[0015]下面通过对高转移乳腺癌患者的肿瘤组织样本进行免疫组化检测的具体实例对本专利技术做进一步说明。
[0016]1）待检测肿瘤组织：将患者手术切除的肿瘤组织，按病理诊断用常规固定、取材、脱水、包埋、HE染色，及连续切片（4~6微米厚/张）10张，用于脂代谢异常性高转移乳腺癌的免疫组化检测。参照图1，显示高转移乳腺癌患者肿瘤组织单细胞转录组测序的结果。图1是高转移乳腺癌的单细胞转录组测序图谱及FASN随拟时间轨迹变化图，图1（左）为高转移乳腺癌的单细胞转录图谱，包括8个细胞亚群，其中总体包括肿瘤细胞群、间质细胞群和免疫细胞群，而肿瘤细胞群中高转移乳腺癌细胞包括两个内部亚群。通过对高转移乳腺癌内部亚群的拟时间轨迹分析发现，FASN是高转移乳腺癌拟时间分化节点处的差异表达基因。据此，筛选出了FASN这一脂代谢关键分子。
[0017]图2是高转移乳腺癌空间转录组测序图及FASN在高转移癌亚群中表达图，显示在高转移乳腺癌的空间转录组测序中，鉴定出的高转移乳腺癌亚群中FASN的表达明显高于其他细胞亚群。与高转移乳腺癌的单细胞转录组测序结果对应，进一步确证了高转移乳腺癌中FASN发挥的重要作用。
[0018]图3是７个IMPC亚群的共同高表达基因为SREBF1示意图，显示高，转移乳腺癌的空间转录组测序分析结果，7个高转移乳腺癌亚群共同高表达SREBP1，SREBP1恰好是FASN的上
游转录因子，可调节肿瘤中的脂代谢水平，从而对肿瘤的增殖、侵袭、转移等发挥作用。
[0019]2）脂代谢异常性高转移乳腺癌免疫组化检测试剂盒鉴于SREBP1编码固醇调节元件结合转录因子1蛋白，是直接激活胆固醇和脂肪酸中关键限速酶的主要转录因子。在高转移乳腺癌组织中高表达。脂肪酸合酶(FASN)是脂肪酸代谢重新编程的关键酶之一，能有效地延长脂肪酸合成16
‑
羰基棕榈酸。FASN能促进肿瘤的增殖、侵袭、迁移和转移，从而加速肿瘤的发展。在高转移乳腺癌组织中高表达。
[0020]该试剂盒包括：用于对肿瘤组织中的SREBP1、FASN蛋白的表达程度进行检测的人源SREBP1、FASN单克隆抗体、免疫组化检测试剂。其中，两种蛋白免疫组化的抗体的订购公司及货号分别为：SREBP1 （Abcam, ab191857）见基因序列表1、FASN（Abcam, ab128870）见基因序列表2。
[0021本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测脂代谢异常性高转移乳腺癌的免疫组化染色试剂盒，其特征在于：在该试剂盒主要包括脂代谢相关转录因子SREBP1和其下游分子脂肪酸合酶FASN的两种蛋白免疫组化抗体。2.根据权利要求1所述的一种检测脂代谢异常性高转移乳腺癌的免疫组化染色试剂盒，其特征在于：所述两种蛋白免疫组化抗体分别是人源SREBP1、FASN单克隆抗体。3.SREBP1、FASN两种蛋白免疫组化抗体在制备检测脂代谢异常性高转移乳腺癌的免疫组化染色试剂盒中的应...

【专利技术属性】
技术研发人员：付丽，吕鉴可，张婧越，
申请(专利权)人：天津市肿瘤医院天津医科大学肿瘤医院，
类型：发明
国别省市：