抗体的纯化方法技术

本发明专利技术涉及抗体纯化技术领域，尤其是涉及一种抗体的纯化方法。抗体的纯化方法，包括如下步骤：待处理抗体样品进行亲和层析提纯、灭活和深层过滤；亲和层析提纯包括：使用平衡缓冲液平衡亲和层析柱后上样，分别采用平衡缓冲液、中间冲洗液和第二平衡缓冲液冲洗，然后采用洗脱缓冲液洗脱目标抗体并收集。本发明专利技术通过采用一定的亲和层析清洗、洗脱和收集方式，配合一定的深层过滤工艺条件，可显著去除宿主蛋白、DNA以及多聚体等杂质，通过亲和层析和深层过滤配合，达到与现有技术中亲和层析+深层过滤+阴离子交换+阳离子交换相当的纯化效果，同时简化工艺步骤，降低成本，提高了产品收率。提高了产品收率。提高了产品收率。

【技术实现步骤摘要】
抗体的纯化方法


[0001]本专利技术涉及抗体纯化
，尤其是涉及一种抗体的纯化方法。

技术介绍

[0002]单克隆抗体药物通常是利用经基因工程改造的能产生目的蛋白的哺乳动物细胞表达，如CHO、BHK细胞等。哺乳动物细胞培养过程中添加包含多种成分的培养基以及宿主细胞自身产生的宿主蛋白和核酸等，导致细胞培养产物成分复杂。
[0003]抗体药物的下游制备工艺主要包括抗体捕获和精制纯化，抗体经捕获后，仍旧含有DNA、聚集体和宿主蛋白等多种杂质，一般需再经阴离子交换层析和阳离子交换层析处理。也就是目前的抗体纯化中，至少包括三步层析进行蛋白纯化：(1)使用亲和层析进行单抗捕获，去除大部分的宿主蛋白和DNA等杂质；(2)深层过滤后进行阴离子交换层析进一步去除宿主蛋白、DNA以及病毒等杂质；(3)阳离子交换层析用于去除多聚体、电荷异构体等杂质。
[0004]但现有的纯化过程中，步骤较多，成本较高，工艺时间较长，且由于步骤多导致的产品收率较低。
[0005]有鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路
/>[0006]本专本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.抗体的纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：待处理抗体样品进行亲和层析提纯、灭活和深层过滤；所述亲和层析提纯包括：使用平衡缓冲液平衡亲和层析柱后上样，分别采用所述平衡缓冲液、中间冲洗液和第二平衡缓冲液冲洗，然后采用洗脱缓冲液洗脱目标抗体并收集；其中，所述平衡缓冲液为50～55mM Tris
‑
HAc，150～160mM NaCl，pH 7.4
±
0.2；所述第二平衡缓冲液为50～55mM NaAc
‑
HAc，pH 5.5
±
0.2；所述中间冲洗液为下述缓冲液中的至少一种：缓冲液A：50～55mM NaAc
‑
HAc，1～3M尿素，pH 5.0～5.5；缓冲液B：50～55mM NaAc
‑
HAc，0.5％～0.6％Triton，pH 5.5～8.0；所述洗脱缓冲液为50～55mM NaAc
‑
HAc，pH 3.5～5.5。2.根据权利要求1所述的抗体的纯化方法，其特征在于，所述洗脱的方式为梯度洗脱或等度洗脱。3.根据权利要求1所述的抗体的纯化方法，其特征在于，所述收集包括：当采用等度洗脱时，由紫外值为50～100mAU/2mm@280nm的洗脱液开始收集至紫外值为50～100mAU/2mm@280nm结束收集；当采用梯度洗脱时，由紫外值为50～100mAU/2mm@280nm的洗脱液开始收...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡子健，张赶，杨晓明，叶峰，
申请(专利权)人：苏州创胜医药集团有限公司，
类型：发明
国别省市：