一种鉴别新冠突变型抗原的抗体、试剂及方法技术

本发明专利技术提供了一种鉴别新冠突变型抗原的抗体、试剂及方法。利用本发明专利技术抗体、试剂或方法能够快速、准确地鉴别新冠突变型抗原，且检测效率高、成本低。成本低。

【技术实现步骤摘要】
一种鉴别新冠突变型抗原的抗体、试剂及方法


[0001]本专利技术属于蛋白检测领域。更具体地，涉及一种鉴别新冠突变型抗原的抗体、试剂及方法。

技术介绍

[0002]新型冠状病毒(SARS
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CoV
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2)属于冠状病毒科，为不分节段的单股正链RNA病毒。它编码4种结构蛋白(S、E、M和N蛋白)，其中，N蛋白是病毒粒子的核心成分，其蛋白全长419个氨基酸，大小为43
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50kDa。N蛋白有三个相对保守的结构域，其中一域可与病毒基因组RNA相互缠绕形成病毒核衣壳，在病毒RNA的合成过程中发挥着重要的作用，与病毒基因组复制和调节细胞信号通路有关。N蛋白是一个磷酸化蛋白，磷酸化能够调节N蛋白的构象，增强与病毒蛋白的构象，增强与病毒RNA的亲和力。在核衣壳包装过程中，N蛋白可与M蛋白相互作用，促进核衣壳包装成病毒粒子。
[0003]N抗原检测呈阳性可作为新冠早期感染的直接证据。然而，新冠病毒N蛋白上出现的各种突变意味着抗原逃逸检测抗体对的几率上升，导致试剂盒面临无法检出突变株病毒的风险。因此，开发一种能够鉴别新冠突变株的试剂盒具有重要意义。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种鉴别新冠突变型抗原的抗体、试剂及方法。
[0005]在一些实施方案中，本专利技术可以包括下述一项或多项：
[0006]一种抗体，其中，所述抗体抗体结合新冠病毒野生株N抗原第28
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36位氨基酸片段。
[0007]本专利技术还提供了一种抗体偶联物，其包括上述抗体及偶联部分；其中，所述偶联部分选自标记物，固相载体，结合配偶体之一。
[0008]本专利技术还提供了编码抗体的核酸分子。
[0009]本专利技术的另一目的是提供了一种方法，其利用抗体1、抗体2和抗体3对待测样本进行免疫检测，所述抗体1能与M种新冠病毒抗原结合；所述抗体2能与除Omicron突变株外的M
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1种新冠病毒抗原结合，所述抗体2选自前述抗体；所述抗体3能与M种新冠病毒抗原结合。
[0010]本专利技术还提供了一种鉴别新冠突变型抗原的检测试剂。
[0011]本专利技术还提供了一种鉴别新冠突变型抗原的免疫层析试纸，其中，所述免疫层析试纸包括底板、样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述硝酸纤维素膜上设置检测线1和检测线2，所述结合垫上设置有前述抗体3，所述检测线1上包被前述抗体1、所述检测线2上包被前述抗体2；所述抗体3用标记物进行标记；可选地，所述硝酸纤维素膜上还设置有质控线。
[0012]本专利技术还提供了上述抗体、抗体偶联物、方法、试剂或试纸在检测新冠病毒Omicron突变株的应用。
[0013]利用本专利技术抗体、试剂或方法能够快速、准确地鉴定或鉴别新冠突变型抗原，且检测效率高、成本低。
具体实施方式
[0014]本专利技术涉及一种抗体，所述抗体结合新冠病毒野生株N抗原第28
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36位氨基酸片段。在一些实施方案中，所述新冠病毒野生株N抗原第28
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36位氨基酸片段如SEQ ID NO:5所示。本专利技术新冠病毒野生株N抗原的描述特指最先发现的野生株新冠病毒N抗原。
[0015]在一些实施方案中，所述抗体不结合新冠病毒野生株N抗原第31
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33位发生缺失的氨基酸片段；在一些实施方案中，所述抗体不结合SEQ ID NO:3或4所示的氨基酸片段；在一些实施方案中，所述抗体不结合新冠病毒Omicron突变株N抗原。其中，新冠病毒Omicron突变株N抗原存在E31del、R32del、S33del。
[0016]在本专利技术中，术语“抗体”在最广义上使用，其可以包括全长单克隆抗体，双特异性或多特异性抗体，以及嵌合抗体，只要它们展示所需的生物学活性。在一些实施方案中，可以采用本领域已知的方法制备本专利技术的抗体，例如利用其全长抗原或者已知表位的抗原片段(如本专利技术所述的28
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36位氨基酸片段)作为免疫原免疫动物，获得结合所述抗原片段的抗体。为了增加免疫原性，可以将载体蛋白(包括但不限于BSA、卵清蛋白、KLH等)与免疫反应性物质(例如表位肽)偶联。载体蛋白可以包括蛋白质或多肽，其可以起免疫原载体的作用。这些类型的多肽包括白蛋白、血清蛋白、球蛋白、晶状体蛋白、脂蛋白和/或其片段。
[0017]本专利技术杂交瘤细胞由免疫原免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到。
[0018]本专利技术还涉及抗体偶联物，包括上述抗体及偶联部分；所述偶联部分选自标记物，固相载体，结合配偶体之一；在一些实施方案中，所述标记物选自金属粒子，荧光标记，发色团标记，电子致密标记，化学发光标记，电化学标记，放射性标记，核酸标记，或酶标记；在一些实施方案中，所述标记物选自罗丹明，荧光素，荧光微球，胶体金，吖啶酯，胶乳微球，三联钌、鲁米诺类、Eu螯合物，荧光素酶，辣根过氧化物酶，碱性磷酸酶，β
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半乳糖苷酶，葡糖淀粉酶，溶菌酶，糖氧化酶，葡萄糖氧化酶，半乳糖氧化酶或葡萄糖
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磷酸脱氢酶标记；在一些实施方案中，所述固相载体选自磁性颗粒、胶乳粒子、微量滴定板、硝酸纤维素膜，玻璃纤维素膜，尼龙膜或微流控芯片；在一些实施方案中，结合配偶体选自生物素/抗生物素蛋白，生物素/链霉抗生物素蛋白；在一些实施方案中，根据应用场景对抗体进行标记物偶联或者固相载体偶联。
[0019]本专利技术还涉及一种核酸分子，所述核酸分子编码上述抗体。
[0020]本专利技术还涉及一种鉴别新冠突变型抗原的方法，利用抗体1、抗体2和抗体3对待测样本进行免疫检测，所述抗体1能与M种新冠病毒抗原结合；所述抗体2能与除Omicron突变株外的M
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1种新冠病毒抗原结合，所述抗体2选自前述抗体；所述抗体3能与M种新冠病毒抗原结合，M为大于等于2的整数。本专利技术所述“M种新冠病毒抗原”包括野生株和突变株新冠病毒的抗原，其中突变株不限于Omicron突变株，还可以是B.1.1.7突变株、B1.351突变株或B.1.1.28突变株。本专利技术所述“除Omicron突变株外的M
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1种新冠病毒抗原”包括野生株，可选地还包括除Omicron突变株外的其他突变株，如B.1.1.7突变株、B1.351突变株或B.1.1.28突变株。相关检测原理见专利申请202110315361.5。
[0021]在一些实施方案中，所述抗体1和抗体3夹心检测新冠病毒抗原；所述抗体2和抗体3夹心检测新冠病毒抗原；这里所述的新冠病毒抗原不限于N抗原，或者也可以是S抗原，不限于野生株，也可以是突变株。在一些实施方案中，所述新冠病毒抗原为新冠病毒抗原N抗原。
[0022]利用本专利技术的抗体，任何免疫检测方法均可适用。在一些实施方案中，所述方法可以是免疫层析法、酶联免疫吸附法、化学发光法、胶乳免疫比浊法。
[0023]例如在一些实施方案中，采用免疫层析法，制备一种鉴别新冠突变型抗原的免疫层析试纸，所述免疫本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗体，其特征在于，所述抗体结合新冠病毒野生株N抗原第28
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36位氨基酸片段。2.权利要求1所述的抗体，其特征在于，所述抗体不结合新冠病毒野生株N抗原第31
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33位发生缺失的氨基酸片段；可选地，所述抗体不结合SEQ ID NO:3或4所示的氨基酸片段；可选地，所述抗体不结合新冠病毒Omicron突变株N抗原；可选地，所述新冠病毒野生株N抗原第28
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36位氨基酸片段如SEQ ID NO:5所示。3.抗体偶联物，包括权利要求1或2所述的抗体及偶联部分；其特征在于，所述偶联部分选自标记物，固相载体，结合配偶体之一；可选地，所述标记物选自金属粒子，荧光标记，发色团标记，电子致密标记，化学发光标记，电化学标记，放射性标记，核酸标记，或酶标记；可选地，所述标记物选自罗丹明，荧光素，荧光微球，胶体金，吖啶酯，胶乳微球，三联钌、鲁米诺类、Eu螯合物，荧光素酶，辣根过氧化物酶，碱性磷酸酶，β
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半乳糖苷酶，葡糖淀粉酶，溶菌酶，糖氧化酶，葡萄糖氧化酶，半乳糖氧化酶或葡萄糖
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磷酸脱氢酶标记；可选地，所述固相载体选自磁性颗粒、胶乳粒子、微量滴定板、硝酸纤维素膜，玻璃纤维素膜，尼龙膜或微流控芯片；可选地，结合配偶体选自生物素/抗生物素蛋白，生物素/链霉抗生物素蛋白。4.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1或2所述的抗体。5.一种鉴别新冠突变型抗原的方法，其特征在于，利用抗体1、抗体2和抗体3对待测样本进行免疫检测，所述抗体1能与...

【专利技术属性】
技术研发人员：李瑞净，易嘉乐，梁艳艳，刘旭霞，
申请(专利权)人：广东菲鹏生物有限公司，
类型：发明
国别省市：