一种降解餐厨垃圾的耐盐复合菌剂的制备方法技术

本发明专利技术涉及可降解餐厨垃圾的微生物菌剂及其制备方法，包括优势菌种的分离筛选以及复合菌剂的制备。其特征在于所分离菌种的高耐盐性能、对餐厨垃圾主要成分的高效降解功能以及工艺简单。该复合菌剂包括8种耐盐菌、3种油脂降解菌、4种蛋白降解菌、5种纤维素降解菌和1种淀粉降解菌，载体材料为稻壳，复合菌体占微生物菌剂的6~10%。本发明专利技术通过分离筛选耐盐菌及餐厨垃圾主要成分降解菌与透气的具有吸附性的稻壳来制备复合菌剂，将其应用于餐厨垃圾处理，餐厨垃圾减量率达88~92%，解决了餐厨垃圾中高盐高油对微生物生长的抑制问题；且不需要将微生物菌液过滤除水，工艺简单，成本低，效果稳定，无环境污染。无环境污染。

【技术实现步骤摘要】
一种降解餐厨垃圾的耐盐复合菌剂的制备方法


[0001]本专利技术涉及微生物菌剂技术和餐厨垃圾减量化、无害化、资源化的环保技术，具体为一种降解餐厨垃圾的耐盐复合菌剂的制备方法。

技术介绍

[0002]城市生活垃圾的排放量愈来愈大，其中餐厨垃圾所占比例日渐上升，其比重高达50%左右，其成分复杂，主要包括米面、油、水、固体残澄果皮、废餐具等。从化学组分上看，餐厨垃圾主要以碳水化合物、纤维素、脂肪、蛋白质及少量的无机盐为主，是城市生活垃圾中有机相的主要来源。餐厨垃圾的含盐量在1.5%左右，在垃圾堆放过程中含盐量可达4%以上，因此筛选出可以耐受高盐分的菌株才能提高微生物菌剂在处理餐厨垃圾过程中的生存和降解能力。
[0003]目前餐厨垃圾的处理方法主要采用填埋、焚烧、堆肥、热解、蚯蚓床法等，但都不够安全有效，在应用中也存在各自的局限性。从环保和资源化的观点出发，利用微生物技术处理城市生活垃圾正渐渐受到人们青睐。好氧降解是在通气的条件下，以好氧微生物为主将大分子的餐厨垃圾分解为小分子的有机物，微生物吸收、利用中间的代谢产物合成自身的细胞物质，并进行生长繁殖。生物法处理餐厨垃圾的效率较高、成本低且无二次污染，但是微生物往往限制于餐厨垃圾中的高盐高油而无法正常生长繁殖。针对微生物降解餐厨垃圾过程中出现的高盐抑制微生物这一难题，本专利技术制备一种耐盐的复合微生物菌剂高效降解餐厨垃圾。

技术实现思路

[0004]本专利技术是一种降解餐厨垃圾的耐盐复合菌剂的制备方法，克服餐厨垃圾盐分过高导致微生物不生长甚至死亡的缺陷，提供一种简单有效的微生物菌剂制备方法。为实现上述目的，本专利技术通过以下技术方案来实现。
[0005]一种降解餐厨垃圾的耐盐复合菌剂的制备方法，包括以下步骤：（1）将10 g餐厨垃圾或固体菌剂加入90 mL含玻璃珠的无菌生理盐水中，将微生物浸提出来，即得稀释10倍的浸提液；从浸提液中取1mL加入9mL无菌生理盐水中，得稀释100倍的微生物菌液
……
，最终得到稀释倍数为10^3、10^4、10^5、10^6、10^7、10^8的微生物稀释液。
[0006]（2）将稀释倍数为10^4、10^5、10^6、10^7、10^8的微生物稀释液分别涂布到牛肉膏蛋白胨琼脂培养基（牛肉膏5 g/L，蛋白胨10 g/L，氯化钠5 g/L，琼脂15 g/L）、PDA琼脂培养基（马铃薯浸粉3 g/L，葡萄糖20 g/L，琼脂15 g/L）和高氏一号琼脂培养基（可溶性淀粉20 g/L，硝酸钾1 g/L，磷酸二氢钾0.5 g/L，氯化钠0.5 g/L，七水合硫酸镁0.5 g/L，硫酸亚铁0.01 g/L，琼脂15 g/L）上，30-36℃培养2-3天，培养出细菌、放线菌和酵母菌；将培养出的微生物进行平板划线接种分离：每种微生物各挑取形态不同的单菌落进行分区划线接种，每个划线两个平板培养基，于30-36℃培养2-3天。挑取单菌落接种于对应的液体培养基，于200rpm、30-36℃培养12-18小时。
[0007]（3）将上述培养出的微生物稀释涂布于含1~5%氯化钠的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、淀粉筛选培养基（牛肉膏5 g/L，蛋白胨10 g/L，氯化钠5 g/L，琼脂15 g/L，可溶性淀粉2 g/L，菌生长以后滴加碘液检测淀粉水解情况）、纤维素筛选培养基（硝酸钾2 g/L，硫酸镁0.5 g/L，磷酸二氢钾1 g/L，氯化钠1 g/L，磷酸氢二钠1 g/L，羧甲基纤维素钠20 g/L，刚果红0.2 g/L，琼脂15 g/L）、蛋白质筛选培养基（脱脂奶粉25 g/L，可溶性淀粉10 g/L，酵母膏5 g/L，磷酸二氢钾1 g/L，硫酸镁0.2 g/L，琼脂15 g/L）、脂肪筛选培养基（牛肉膏5 g/L，蛋白胨10 g/L，氯化钠5 g/L，琼脂15 g/L，0.1%的溴甲酚紫指示剂10 mL/L，每个平板2-3滴橄榄油）。将筛出的单菌落转接于对应的培养基中，于200rpm、30-36℃培养12-18小时。
[0008]（4）将筛出的耐盐菌、蛋白质降解菌、脂肪降解菌、淀粉降解菌、纤维素降解菌按照（1~5）：（1~2）：（1~2）：（1~2）：（1~2）的比例混合均匀，得复合菌液；复合菌液直接与载体稻壳混合，24小时后再次加入复合菌液混匀，反复包裹三次，最终混合菌液与载体稻壳比例为50~70 mL/100 g，使有效活菌数达到（1~8）
×
10^8 CFU/g。制得耐盐复合微生物菌剂。
[0009]（5）取菌剂投入餐厨垃圾处理一体机中活化12-20小时，然后每隔一天投入去掉大骨头等难解物的餐厨垃圾1-4kg，连续反应10-20天。
[0010]本专利技术具有菌种来源广、成本低、制备方法简单、适用范围广的特点，尤其对于高盐高油的餐厨垃圾降解有显著的效果；工艺简单，菌液不需离心和烘干；反复包裹使稻壳上的活菌数达到更多，延长作用时间。
具体实施方式
[0011]以下是本专利技术的具体实施例，对本专利技术的技术方案作进一步的描述，但本专利技术并不限于这些实施例。
[0012]一种降解餐厨垃圾的耐盐复合菌剂的制备方法，其制备方法为：筛选菌株：将10 g餐厨垃圾或固体菌剂加入90 mL含玻璃珠的无菌生理盐水中，即得稀释10倍的浸提液；从浸提液中取1mL加入9mL无菌生理盐水中，得稀释100倍的微生物菌液
……
，最终得到稀释倍数为10^3、10^4、10^5、10^6、10^7、10^8的微生物稀释液，将这些分别涂布到牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、PDA琼脂培养基和高氏一号琼脂培养基上，于30-36℃培养2-3天，培养出细菌、放线菌和酵母菌；将培养出的微生物进行平板划线接种分离，于30-36℃培养2-3天。挑取单菌落接种于对应的液体培养基，于200rpm、30-36℃培养12-18小时。将上述培养出的微生物稀释涂布于含1~5%氯化钠的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、淀粉筛选培养基、纤维素筛选培养基、蛋白质筛选培养基、脂肪筛选培养基。将筛出的单菌落转接于对应的培养基中，于200rpm、30-36℃培养12-18小时。
[0013]耐盐复合菌剂对餐厨垃圾的降解实验：（1）餐厨垃圾：食堂的剩饭剩菜，香蕉皮等果皮，去除大骨头及坚硬部分。
[0014]（2）将制备的复合耐盐微生物菌剂投入到处理机中，活化发酵16小时，然后加入2-4 kg上述餐厨垃圾，每隔一天加入2 kg，连续14-20天。
[0015]（3）耐盐复合菌剂对餐厨垃圾的减量率以重量减量效率体现，通过以下计算：
其中，A：投入垃圾处理前总重，kg；B：加入的餐厨垃圾总重，kg；C：处理后总重，kg。
[0016]实施例1.不含耐盐菌的复合菌剂处理餐厨垃圾实验将不含耐盐菌的微生物发酵菌液混合后再与稻壳充分搅拌混合，24小时后再次加入复合菌液混匀，反复包裹三次，最终混合菌液与载体稻壳比例为60 mL/100 g，制得复合微生物菌剂。投入到处理机中，活化发酵16小时，然后加入2 kg上述餐厨垃圾，每隔一天加入2 kg，连本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种降解餐厨垃圾的耐盐复合菌剂的制备方法，其特征在于所分离菌的高耐盐性能、对餐厨垃圾主要成分的降解功能以及操作简单快速，包括以下步骤：（1）用灭过菌的生理盐水从餐厨垃圾和购买的固体菌剂中分离出菌液，稀释涂布于不同的培养基分离菌种；（2）挑取不同的单菌落接不同的液体培养基培养出菌液，稀释涂布含1~5%的氯化钠琼脂培养基筛选；筛出的菌落进行平板划线分离，再次挑取单菌落转接含氯化钠的液体培养基，待生长12-18小时后转接发酵培养基培养；（3）挑取不同的单菌落接不同的液体培养基培养出菌液，分别稀释涂布蛋白、脂肪、淀粉、纤维素筛选培养基筛选；筛出的菌落进行平板划线分离，再次挑取单菌落转接对应的液体培养基，待生长12-18小时后转接发酵培养基培养；（4）将（2）和（3）的微生物发酵液按照权利要求3进...

【专利技术属性】
技术研发人员：李卫星，金梦蒙，季红军，李佳尧，
申请(专利权)人：南京工大膜应用技术研究所有限公司，
类型：发明
国别省市：