一种啶虫脒化学发光免疫分析试剂盒及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及农药残留化学发光免疫分析技术领域，具体而言，涉及一种啶虫脒化学发光免疫分析试剂盒及其制备方法和应用。一种啶虫脒化学发光免疫分析试剂盒，包括纳米酶Au探针、抗体标记微孔板、啶虫脒标准品、A液和B液；所述A液包括3

【技术实现步骤摘要】
一种啶虫脒化学发光免疫分析试剂盒及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及农药残留化学发光免疫分析
，具体而言，涉及一种啶虫脒化学发光免疫分析试剂盒及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]啶虫脒作为防治刺吸式口器害虫、小型鳞翅目和鞘翅目害虫最有效的一类杀虫剂，广泛用于蔬菜、果蔬、水稻等农产品中病虫害的防止。啶虫脒不规范使用，会对蜜蜂以及环境土壤等生态系统造成破坏。因此研发啶虫脒快速检测试剂盒具有重要意义。
[0003]啶虫脒常用的检测方法有高效液相、气相色谱技术等，传统的检测技术操作复杂，成本高，耗时长等弊端。化学发光免疫分析不仅结合了化学发光技术的高灵敏度和免疫分析的高特异性，还具备操作简单、成本低，耗时短等优势。
[0004]传统的化学发光免疫分析中，常用的催化酶是HRP天然酶等，天然酶催化活性因环境温度、湿度、酸碱度变化而变化，对环境的耐受性差，造成化学发光免疫分析技术的精密度和准确度差，其次，天然酶制备过程复杂、成本比较高，难以实现现场快速检测。
[0005]有鉴于此，特提出本专利技术。
专本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种啶虫脒化学发光免疫分析试剂盒，其特征在于，包括纳米酶Au探针、抗体标记微孔板、啶虫脒标准品、A液和B液；所述A液包括3
‑
氨基
‑
苯二甲酰肼和Tris缓冲溶液；所述B液包括双氧水溶液。2.根据权利要求1所述的啶虫脒化学发光免疫分析试剂盒，其特征在于，所述A液中，3
‑
氨基
‑
苯二甲酰肼的浓度为0.005～0.03mol/L；所述B液中，双氧水的浓度为0.015～0.03mol/L；优选地，所述A液和所述B液的体积比为(0.8～1.2)：(0.8～1.2)；优选地，所述Tris缓冲溶液的浓度为0.08～0.12mol/L，pH为10.5～10.8；优选地，所述啶虫脒标准品包括啶虫脒、甲醇和水；其中，啶虫脒的浓度为小于或等于200μg/L。3.根据权利要求1所述的啶虫脒化学发光免疫分析试剂盒，其特征在于，所述的纳米酶Au探针包括卵清蛋白偶联的啶虫脒半抗原标记到纳米酶Au颗粒上的所得物；优选地，所述的抗体标记微孔板包括啶虫脒抗体标记到96白色微孔板的所得物。4.根据权利要求1～3中任一项所述的啶虫脒化学发光免疫分析试剂盒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：分别制备纳米酶Au探针、抗体标记微孔板、啶虫脒标准品、A液和B液。5.根据权利要求4所述的啶虫脒化学发光免疫分析试剂盒的制备方法，其特征在于，所述纳米酶Au探针的制备方法，包括以下步骤：将卵清蛋白偶联的啶虫脒半抗原和纳米酶Au溶液的混合物进行振荡处理，再进行离心和洗涤，收集所得固相并用水进行复溶；优选地，所述纳米酶Au溶液的制备方法，包括：将氯金酸和水在加热条件下进行第一搅拌处理，再加入柠檬酸三钠溶液并进行第二搅拌处理，得到的混合体系冷却后进行离心处理，收集固相并用水进行复溶；优选地，所述氯金酸和所述柠檬酸三钠的摩尔比为(0.8～1.2)：(3.5～4.2)；优选地，所述第一搅拌处理的温度为99～100℃，第一搅拌处理的时间为30...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐东辉，陈鸽，刘广洋，黄晓冬，翟荣启，许晓敏，张延国，李凌云，
申请(专利权)人：中国农业科学院蔬菜花卉研究所，
类型：发明
国别省市：