AFP检测用双酶共载纳米球及其制备方法、AFP检测方法技术

本发明专利技术提供了一种甲胎蛋白AFP检测用双酶共载纳米球及制备方法、探针、试剂盒及AFP检测方法，属于生物检测与酶负载材料领域。所述双酶共载纳米球包括：核

【技术实现步骤摘要】
AFP检测用双酶共载纳米球及其制备方法、AFP检测方法


[0001]本专利技术属于生物检测与酶负载材料领域，具体涉及一种AFP检测用双酶共载纳米球及其制备方法、AFP检测方法。

技术介绍

[0002]甲胎蛋白AFP由591个氨基酸组成，是胎儿发育早期由肝脏和卵黄囊合成的一种糖蛋白。正常人血清中AFP含量较低，在10 ng
•
mL
‑1‑
20 ng
•
mL
‑1之间。当肝细胞发生恶性病变时，AFP的浓度会急剧升高，是临床用于诊断原发性肝癌的常用标志物，对肝癌的确诊率在70%左右，同时其还与多种肿瘤的发生发展密切相关。当血清中AFP含量在2个月内均大于200 ng
•
mL
‑1或在一个月内均大于400 ng
•
mL
‑1时，即可判定为肝癌。因此，可通过对AFP的检测辅助对肝癌进行诊断。
[0003]现有技术中，血清中AFP的检测方法包括：酶联免疫吸附测定(Enzyme
‑
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种甲胎蛋白AFP检测用双酶共载纳米球，其特征在于，所述纳米球包括：核
‑
壳结构磁性介孔二氧化硅纳米球，以及分布于介孔孔道中的葡萄糖氧化酶GoD和辣根过氧化物酶HRP；其中，所述核
‑
壳结构具有磁性内核颗粒和分布有介孔孔道的二氧化硅壳结构；所述磁性内核颗粒用于通过磁性分离作用富集血清样本中的AFP；所述葡萄糖氧化酶GoD和辣根过氧化物酶HRP用于催化底物显色。2. 根据权利要求1所述的甲胎蛋白AFP检测用双酶共载纳米球，其特征在于，所述磁性内核颗粒粒径为230
‑
250nm，所述分布有介孔孔道的二氧化硅球形壳结构层的厚度为50
‑
200 nm。3.根据权利要求1所述的甲胎蛋白AFP检测用双酶共载纳米球，其特征在于，所述GoD和HRP的投料比为1:1。4.一种甲胎蛋白AFP检测用双酶共载纳米球的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤S101，将三氯化铁、柠檬酸三钠和乙酸钠溶解于乙二醇中，通过溶剂热法合成230
‑
250 nm的Fe3O4磁性纳米粒子；步骤S102，采用界面共组装法在磁性纳米粒子外制备介孔二氧化硅壳结构层；具体地，将所述Fe3O4磁性纳米粒子分散在乙醇
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水的混合溶液中，以正硅酸四乙酯TEOS为硅源、十六烷基三甲基溴化铵CTAB为模板剂、有机试剂为扩孔剂、碱性试剂为催化剂，在机械搅拌条件下水浴反应得到核
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壳结构的磁性介孔二氧化硅纳米球；步骤S103，采用共价偶联法将葡萄糖氧化酶GoD和辣根过氧化物酶HRP偶联到壳结构层的介孔孔道中。5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓勇辉，李娟，
申请(专利权)人：复旦大学，
类型：发明
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