一种具有促进石斛茎粗生长的胶膜菌菌株TP-2和应用制造技术

本发明专利技术提供了一种具有促进石斛茎粗生长的胶膜菌(Tulasnella sp.)菌株TP

【技术实现步骤摘要】
一种具有促进石斛茎粗生长的胶膜菌菌株TP
‑
2和应用


[0001]本专利技术属于微生物
，具体涉及一种具有促进石斛茎粗生长的胶膜菌(Tulasnella sp.)菌株TP
‑
2和应用。

技术介绍

[0002]石斛属(学名：Dendrobium Sw.)附生植物，石斛，又名万丈须。假鳞茎丛生，伸长呈茎状，多节；总状花序生茎上部节上，具花数朵或仅1朵；花大而艳丽，花被片开展，侧萼片宽阔的基部着生在蕊柱足上，与唇瓣基部共同形成萼囊；唇瓣3裂。本属国产种类中具细茎而花小的类群，如细茎石斛、铁皮石斛、梳唇石斛、美花石斛、钩状石斛、霍山石斛等是中药“石斛”的原植物；茎粗而花大的种类均可作花卉供观赏。其中铁皮石斛(Dendrobium officinale)被《道藏》誉为“中华九大仙草之首”，具有多种药理作用。然而石斛植物自然条件下繁殖率低，生长周期长，再加上生境破坏严重，导致野生资源极度匮乏，因此急需人工栽培石斛的方法。
[0003]铁皮石斛幼苗可通过非共生萌发培养和共生萌发培养两种方式获得，通过非共生萌发培养，虽具有较高幼苗率，但是方法获得的幼苗移植到自然环境，由于缺少与之建立共生关系的真菌伙伴，适应能力弱，抗病原微生物能力差，生长缓慢，且存活率低，导致后继生长严重受阻。而共生萌发培养技术是指在特定的基质(培养基)中同时播种植物种子和侵染促进种子萌发的共生真菌，该方法可以提高种子的萌发率、幼苗形成率。但由于兰科植物与其真菌伙伴组成复杂多样，幼苗建成后，幼苗矮小，抵御外界阻力能力弱，生长往往受阻停滞或者直接致死，故幼苗后期生长需要与更适合的真菌形成共生，刺激幼苗继续生长。因此，确定能与铁皮石斛幼苗形成共生关系并促进其生长的有效真菌是培育、保护铁皮石斛的关键环节。而菌根化的幼苗的获取是开展铁皮石斛保护、回归、重建种群实践、以及发展铁皮石斛恢复友好栽培的基础。铁皮石斛在各生长阶段所需的真菌种类不一样，通过测定铁皮石斛原球茎和组培苗的生理指标发现，内生真菌主要通过产生内源激素来调节铁皮石斛的生长发育的。然而，现有技术报道了从铁皮石斛成年植株根分离获得的真菌菌株，有些菌株对石斛种子和原球茎致死，有些菌株则能够促进铁皮石斛生长，主要体现在提高幼苗鲜重增长、叶绿素含量、促进营养元素的吸收等方面。石斛为附生草本，茎丛生，少有疏生在匍匐茎上，大风暴雨均可能导致石斛茎发生折断，从而影响幼苗的成活率。因此，提供一种石斛幼苗茎粗的胶膜菌菌株对于人工培育石斛幼苗是有帮助的。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种胶膜菌菌株TP
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2，具有促进石斛茎粗的作用，能够用于石斛栽培中。
[0005]本专利技术提供了一种具有促进石斛茎粗生长的胶膜菌菌株TP
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2，保藏编号为CCTCC NO：M 20211281。
[0006]优选的，胶膜菌菌株TP
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2的ITS序列如SEQ ID NO:1所示。
[0007]本专利技术提供了一种用于培育石斛植物的产品，包括所述胶膜菌菌株TP
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2和可接受的辅料。
[0008]优选的，所述产品包括植物菌肥和微生物菌剂。
[0009]本专利技术提供了所述胶膜菌菌株TP
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2或所述产品在促进石斛生长中的应用。
[0010]优选的，所述石斛生长包括促进石斛茎粗生长。
[0011]本专利技术提供了所述胶膜菌菌株TP
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2在制备促进石斛生长的产品中的应用。
[0012]本专利技术提供了一种促进石斛幼苗茎粗生长的方法，包括以下步骤：
[0013]将石斛幼苗和所述胶膜菌菌株TP
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2进行共生培养。
[0014]优选的，所述石斛包括铁皮石斛。
[0015]优选的，所述共生培养的温度为23～27℃，所述共生培养的光周期L/D＝12/12，光照强度为2000～3000Lx。
[0016]本专利技术提供的具有促进石斛茎粗生长的胶膜菌菌株TP
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2，是从铁皮石斛幼苗迁地诱导获得的形成共生关系的幼苗菌根中分离筛选获得，经形态鉴定以及分子鉴定，得到TP
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2菌株属于胶膜菌 (Tulasnella sp.)。与同批分离的同种或不同种菌株比，TP
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2菌株与铁皮石斛共生培养能够显著促进茎粗生长，将所述菌株TP
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2进行保藏，保藏编号为CCTCC NO：M 20211281。与此同时，所述菌株TP
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2 还能促进幼苗叶片、根系、萌蘖、株高生长，提高幼苗的鲜重及干重。利用胶膜菌属真菌TP
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2将铁皮石斛幼苗菌根化，可获得适应性强，节茎粗壮、成活率高的共生幼苗，有望实现重建铁皮石斛种群，实现药用铁皮石斛高效栽培。
[0017]本专利技术还提供一种促进石斛幼苗茎粗生长的方法，工艺简单，操作容易，成本低，适于推广应用，在珍稀濒危兰科植物的回归保护、种群重建实践、药用兰科植物的生态栽培、解决铁皮石斛栽培产业的优质种苗来源瓶颈问题等方面都具有巨大的推广应用价值。
附图说明
[0018]图1为本专利技术使用菌株TP
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2与铁皮石斛共生促进幼苗茎粗生长的形态图。
[0019]生物材料保藏存活信息
[0020]胶膜菌属真菌(Tulasnella sp.)，于2021年10月15日保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏地址：湖北省武汉市武昌区八一路武汉大学，保藏编号为：CCTCC NO：M 20211281，菌株编号为TP
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2。
具体实施方式
[0021]本专利技术提供了一种具有促进石斛茎粗生长的胶膜菌菌株TP
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2，保藏编号为CCTCC NO：M 20211281。
[0022]在本专利技术中，所述菌株TP
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2是从铁皮石斛幼苗迁地诱导获得的形成共生关系的幼苗菌根中分离得到。所述菌株TP
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2的形态特征如下：在PDA平板上培养10天，其菌落呈白色毯状，气生菌丝发达，规则圆形发散生长，菌落表面粗糙、干燥，边缘菌丝较稀薄。所述菌株TP
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2的菌丝特征如下：观察菌株显微形态特征，在25
±
2℃条件下培养箱内黑暗培养10天，光学显微镜下观察，菌丝粗35～4.41μm，分枝近直角，新菌丝着生于老菌丝顶部，具更明显隔膜，且隔膜数量更多，老菌丝细胞壁具有加厚现象。经ITS分子鉴定，胶膜菌菌株 TP
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2的ITS序列优选如SEQ ID NO:1所示，经比对，该菌株与真菌 Tulasnella sp.(NCBI登录号
GQ241863.1)最为相似，最大相似度达到99％。综合形态鉴定、分子鉴定，所述菌株TP
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2被鉴定为胶膜菌 (Tulasnella sp.)。
[0023]在本专利技术中，所述菌株TP
‑...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有促进石斛茎粗生长的胶膜菌(Tulasnella sp.)菌株TP
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2，其特征在于，保藏编号为CCTCC NO：M 20211281。2.根据权利要求1所述胶膜菌菌株TP
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2，其特征在于，胶膜菌菌株TP
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2的ITS序列如SEQ ID NO:1所示。3.一种用于石斛植物栽培的产品，其特征在于，包括权利要求1或2所述胶膜菌菌株TP
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2和可接受的辅料。4.根据权利要求3所述产品，其特征在于，所述产品包括植物菌肥和微生物菌剂。5.权利要求1或2所述胶膜菌菌株TP
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【专利技术属性】
技术研发人员：高江云，吴益花，陈德赟，陈香归，
申请(专利权)人：云南大学，
类型：发明
国别省市：