一种微环境巨噬细胞调控递送系统及其制备方法和应用技术方案

本发明专利技术公开了一种微环境巨噬细胞调控递送系统及其制备方法和应用，具有核

【技术实现步骤摘要】
一种微环境巨噬细胞调控递送系统及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及生物医学工程领域，具体涉及一种微环境巨噬细胞调控递送系统及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]既往妊娠期间发生的恶性肿瘤并不常见，但随着近年来平均妊娠年龄的推迟，以及辅助生殖技术的发展，妊娠合并恶性肿瘤的发病率逐渐升高％。妊娠合并恶性肿瘤进入孕产妇死亡原因前五位，给母儿安全带来巨大影响【冯玲,何梦舟,王少帅.妊娠合并恶性肿瘤对孕产妇死亡的影响[J].实用妇产科杂志,2021,37(03):178
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180.】。在妊娠合并恶性肿瘤中，处理最为棘手的是发病于孕妇胎盘部位的妊娠合并滋养细胞肿瘤。此类肿瘤的病理学特点为，肿瘤发生于胎盘种植部位，为体积大小不一的实体肿瘤，瘤体可局限于子宫，也可突向宫腔呈息肉状，或侵入肌层甚至穿破浆膜，形成转移【虞海燕.足月妊娠合并胎盘部位滋养细胞肿瘤3例误诊分析[J].实用妇产科杂志,2006(09):548
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549.】。该类肿瘤存在于胎盘中，与胎盘组织密不可分，无法采用手术手段进行处理，如果采用药物治疗，往往伤及胎儿导致流产。但是，目前缺乏能够直接杀伤胎盘中滋养细胞来源肿瘤细胞的药物，需要寻找包括免疫治疗在内的其他疗法，实现对此类肿瘤的杀伤。
[0003]巨噬细胞(macrophage)是恶性实体肿瘤组织中最多的免疫细胞，在肿瘤微环境中多为接近M2表型的促肿瘤的表型，此类巨噬细胞在肿瘤发生发展中起到重要作用【Bioact Mater. 2020 Dec 26；6(7):1973
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1987.】。包括滋养细胞肿瘤等生殖系统肿瘤的发生发展中，巨噬细胞同样起到重要的免疫调节作用【Evol Med Public Health.2018 Apr 14；2018(1):106
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115.】在胎盘相关肿瘤中，这一作用尤其显著。这是因为，胎盘巨噬细胞是胎盘内最先出现和含量最高的免疫细胞【Annu Rev Immunol.2013；31:387
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411.】。巨噬细胞在肿瘤微环境中和胎盘中，均可能出现M1型和M2型等表型，一般在胎盘微环境中，多为可以促进肿瘤、抑制免疫杀伤的M2 表型【Arch Immunol Ther Exp(Warsz).2019 Oct；67(5):295
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309.】。所以，如果能够对胎盘中肿瘤组织里的M2型巨噬细胞表型进行调控，使其转换为具有抗肿瘤作用的M1表型，将可以有效地抑制肿瘤的生长，使患者获得较好的预后【Front Biosci.2008 Jan 1；13:453
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61.】。
[0004]如何实现胎盘内肿瘤中巨噬细胞M2表型向M1表型的转变？我们在前期研究中发现，如果能够促进M2型巨噬细胞NF
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κB通路活性，可以起到向M1表型转化的作用。同时，如果能抑制巨噬细胞PPARγ(Peroxisome Proliferator Activated Receptor Gamma)活性，也可以促进向M1表型转化【Eur J Pharmacol.2020 Jun 15；877:173090.】。联合应用NF
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κB/PPARγ两种调控手段，将会起到协同促进M2型巨噬细胞向抗肿瘤的M1表型转化的效果【Int J MolSci.2020 Dec 16；21(24):9605；Annu Rev Physiol.2010；72:219
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46.】。我们在前期已经证实单独或联合应用NF
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κB激活剂(如Betulinic acid)和PPARγ抑制剂(如siRNA)，可以实现有效的M2巨噬细胞再极化为M1细胞的效果，并且证明这种转化可以产生肿瘤杀伤效果。所以，如果能够实现体内联合应用Betulinic acid和PPARγ
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siRNA，促进胎盘内确切
的M1巨噬细胞增加，进而产生抗肿瘤效果，就有望有效改善妊娠合并滋养细胞肿瘤的治疗困境。
[0005]然而，巨噬细胞作为体内最重要的免疫细胞之一，在体内各器官组织广泛存在，并在不同的器官中分化为各种亚型，担负重要的免疫调控作用。如果将体内的巨噬细胞功能不加区别地加以调控，将产生类似自身免疫病、免疫抑制等症状的严重的免疫并发症。现有可能具有免疫功能调控作用的药物，均不可避免地在母体各器官分布，产生大量的免疫并发症；并通过胎盘，向胎儿分布。这些药物在免疫功能调控的同时，会产生对母体和胎儿的毒性。
[0006]目前包括急救药品在内的孕妇用药均存在极多的禁忌，孕妇的药物使用和新药开发中首先面临的问题是，需要考虑对药物在母体和胎儿的分布和毒性问题。绝大多数的药物可以通过胎盘，分布进入胎儿侧，影响胎儿发育。因此，目前在体外实验中实现巨噬细胞再极化、抗肿瘤功能增强等功能调控的药物，无法真正在保证用药安全的前提下，实现胎盘内巨噬细胞的功能调控。因此，如何避免对母体和胎儿的毒性，实现巨噬细胞功能调控药物对胎盘中巨噬细胞的精准递送，是解决巨噬细胞功能失调所致疾病的关键。
[0007]目前研究者尝试过的可能促进巨噬细胞特异性纳米药物递送的手段有2种，一种是通过加大纳米药物粒径，使其不能通过胎膜屏障，滞留于胎盘产生药物递送效果；另一种是针对巨噬细胞细胞膜标志物，进行抗体修饰纳米载体的特异性递送。
[0008]加大纳米药物粒径，促进胎盘内药物分布的原理在于，实验研究发现，＜300nm的纳米药物无法滞留于胎盘，容易通过胎盘进入胎儿。所以研究者尝试合成粒径＞300nm的纳米药物，使其滞留于胎盘，产生对胎盘巨噬细胞在内的多种细胞的功能调控。但是，过大的药物粒径(＞100nm)不利于药物的体内分布。此类＞300nm的纳米药物在母体循环中多数被网状内皮系统捕获，在全身各处产生副作用，能够到达胎盘中，实现巨噬细胞特异性分布的比例也较低。所以，需要采用其他方式实现纳米药物在胎盘中的滞留和对巨噬细胞细胞膜的靶向。
[0009]纳米药物可采用纳米药物链接抗体，靶向识别目的细胞的细胞膜标志，实现对目的细胞的特异性递送。巨噬细胞具有一些确定的，区别于胎盘组织中其他胎盘基质细胞的表面标志，例如EMR1(epidermal growth factor module
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containing mucin
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like hormone receptor 1)，可供与胎盘中其他细胞进行区别。但是，全身多器官组织表达量分析发现，这种表面标志在胎盘外其他部位的部分细胞(包括其他器官、组织中的巨噬细胞，以及单核巨噬细胞系统中的其他细胞)也有表达。在少量高表达细胞表面的表达丰度，与巨噬细胞差异不显著。如果在纳米药物载体表面连接EMR1的抗体，直接体内应用，将造成对体内其他表达标志物EMR1的细胞的免疫副作用。因此，只有在血液循环中进入胎盘前，屏蔽纳米载体的巨噬细胞细胞膜识别抗体，才可以避免其分布于胎盘外免疫细胞，避免产生免疫副作用。
[0010]综本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种微环境巨噬细胞调控递送系统，其特征在于，所述微环境巨噬细胞调控递送系统具有核
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壳双层结构，以在接触胎盘组织间液高表达的酶的作用下靶向崩解的酶底物多肽
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PEG修饰的脂质双分子膜作为外壳，所述胎盘组织间液高表达的酶为酪氨酸激酶TK、溶菌酶、激肽酶、组胺酶、催产素酶或基质金属蛋白酶中的一种或几种；以胎盘巨噬细胞表面特异性高表达的标志物抗体修饰的药物载体作为内核，所述药物载体为聚乙二醇修饰的聚阳离子载体与疏水性可降解聚酯形成的共聚物；所述的胎盘巨噬细胞表面特异性高表达的标志物抗体为EMR1抗体的Fab段；所述药物载体中负载超顺磁性四氧化三铁SPIO纳米粒子、调控胎盘巨噬细胞功能的小分子药物、治疗基因或其组合。2.根据权利要求1所述的微环境巨噬细胞调控递送系统，其特征在于，所述胎盘组织间液高表达的酶为酪氨酸激酶TK。3.根据权利要求1所述的微环境巨噬细胞调控递送系统，其特征在于，所述共聚物为聚乙二醇
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聚乙烯亚胺
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聚己内酯PEG
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PEI
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PCL、聚乙二醇
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聚乙烯亚胺
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聚乳酸PEG
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PEI
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PLA或聚乙二醇
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聚乙烯亚胺
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聚乳酸
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羟基乙酸PEG
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PEI
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PLGA中的一种或几种，优选聚乙二醇
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聚乙烯亚胺
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聚己内酯PEG
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【专利技术属性】
技术研发人员：郭宇，
申请(专利权)人：中山大学附属第一医院，
类型：发明
国别省市：