一种羊传染性脓疱病毒减毒株的制备方法及其应用技术

本发明专利技术提供了一种羊传染性脓疱病毒减毒株的制备方法，将羊传染性脓疱病毒毒力基因突变失活，所述毒力基因突变为ORFs 120/121双基因突变。缺失ORFs 120/121基因后ORFV的致病性显著降低。本发明专利技术通过敲除ORFV

【技术实现步骤摘要】
一种羊传染性脓疱病毒减毒株的制备方法及其应用


[0001]本专利技术涉及兽医领域，具体涉及一种荧光标记的羊传染性脓疱病毒双基因缺失毒株的制备方法及其应用。

技术介绍

[0002]羊传染性脓疱病俗称“羊口疮(Orf)”，是由羊传染性脓疱病毒(Orf virus,ORFV)感染引起绵羊、山羊等的一种急性、高度接触性的人兽共患传染病。该病是羊群常发疫病，主要危害3～6月龄羔羊，造成其生长/繁殖性能的下降甚至死亡，给我国乃至世界养羊业造成严重的经济损失。由于ORFV体外生存能力强，羊群一旦发生感染很难进行清除，可持续多年对羊群造成危害。因此，该病不仅对养羊业的危害较为突出，从事饲养、屠宰、兽医等职业的从业人员也常发生感染，对全球公共卫生安全也带来了严峻挑战。
[0003]目前尚无有效的特异性药物用于羊传染性脓疱病的治疗，疫苗接种仍然是预防和控制该病的重要措施，尽管针对ORFV疫苗研究也取得了积极的进展，但常规的灭活疫苗和弱毒疫苗存在的缺陷，使得疫苗的安全性和免疫保护效果尚待提高。因此急需开展安全有效的羊传染性脓疱病疫苗的创新，这对于羊传染性脓疱本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种羊传染性脓疱病毒减毒株的制备方法，将羊传染性脓疱病毒毒力基因突变失活，其特征在于，所述毒力基因突变为ORFs 120/121双基因突变。2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述毒力基因突变ORFs 120/121双基因缺失突变。3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述羊传染性脓疱病毒为羊传染性脓疱病毒ORFV
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SY17株。4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，缺失的ORFs 120/121基因序列包括如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述ORFs 120/121双基因缺失突变为ORFV
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SY17株全长序列的120779至122185位核苷酸缺失突变。6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：步骤1：准备亲本毒株，所述亲本毒株为羊传染性脓疱病毒ORFV
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SY17株，全长基因序列如GenBank：MG712417.1所述；步骤2：同源重组穿梭质粒的构建：分别扩增ORFV
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SY17株的ORFs 120/121基因两侧的序列作为重组同源臂，克隆至pUC57
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vv7.5
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eGFP筛选表达盒上，获得携带标记基因eGFP的pUC57
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LFΔORFs120/121
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eGFP
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RFΔORFs 120/...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵魁，王帅，何师师，方梓煜，周艳龙，关继羽，陆慧君，吕品，徐梦实，贺文琦，高丰，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：