一种毛囊外根鞘细胞培养基制造技术

本发明专利技术提供了一种毛囊外根鞘细胞培养基，以DMEM/F

【技术实现步骤摘要】
一种毛囊外根鞘细胞培养基


[0001]本专利技术是一种毛囊外根鞘细胞培养基，属于细胞工程


技术介绍

[0002]毛囊是表皮向真皮凹陷后形成的能控制毛发生长的皮肤附属器官，是由胚胎期神经外胚层与间充质相互作用，最终发育形成的由多层细胞组成的、具有合成多种特异角质蛋白功能的复杂的动态器官。
[0003]外根鞘是毛囊结构的重要组成部分，具有高度增生的潜能，因此外根鞘细胞(ORSC)在创面愈合领域具有较高的研究价值。目前毛囊外根鞘细胞的培养较为复杂，再生和分化效率比较低，因此，开发新的技术和方法来提高细胞的再生和分化能力是非常重要的。

技术实现思路

[0004]针对现有技术存在的不足，本专利技术的目的是提供一种毛囊外根鞘细胞培养基，使毛囊外根鞘细胞具有较高的再生和分化能力。
[0005]为了实现上述目的，本专利技术提供了一种毛囊外根鞘细胞培养基的制备方法，包括如下步骤：以DMEM/F
‑
12为基础培养基，包含以下含量的组分：
[0006][0007]采用上述方案，人参皂苷和黄芪多糖具有协同作用，能够提高毛囊外根鞘细胞的再生和分化能力，表皮生长因子和纤维生长因子的加入可以进一步促进毛囊外根鞘细胞的分裂、繁殖和生长分化，氢化可的松能够抗病毒，防止细菌内毒素的损害作用，转铁蛋白、壳聚糖和烟酰胺为毛囊外根鞘细胞提供了营养物质，促使毛囊外根鞘细胞生长。
[0008]优选的，以DMEM/F
‑
12为基础培养基，包含以下含量的组分：
[0009][0010]优选的，还包括自体血清，所述自体血清的体积百分含量为4
‑
6％。
[0011]采用上述方案，加入的自体血清不会引入外源蛋白，避免了外源血清存在的安全隐患。
[0012]优选的，还包括无机盐，所述无机盐的含量为1
‑
4mg/mL。
[0013]优选的，还包括维生素C，所述维生素C的含量为50
‑
56μg/mL。
[0014]优选的，还包括氨基酸，所述氨基酸的含量为40
‑
60ng/mL。
[0015]优选的，所述氨基酸为非必需氨基酸。
[0016]采用上述方案，加入的无机盐、维生素C和氨基酸为细胞再生提供了营养物质。
[0017]优选的，还包括羟基乙醇，所述羟基乙醇的含量为15
‑
18mg/mL。
[0018]优选的，还包括海藻糖，所述海藻糖的含量为50
‑
200μg/mL。
[0019]采用上述方案，加入的海藻多糖能够有效的保持毛囊外根鞘细胞的活性，并且对人体无任何伤害。
[0020]优选的，还包括牛垂体提取物、胰岛素、肾上腺素、氯化钙，所述牛垂体提取物的含量为10
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50mg/mL、所述胰岛素的含量为2
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10μg/mL，所述肾上腺素的含量为0.1
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0.6μg/mL，所述氯化钙的含量为10
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15μg/mL。
[0021]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：培养基中添加的人参皂苷和黄芪多糖具有协同作用，能够显著提高毛囊外根鞘细胞的再生和分化能力，表皮生长因子和纤维生长因子的加入可以进一步促进毛囊外根鞘细胞的分裂、繁殖和生长分化，加入的无机盐、维生素C和氨基酸为细胞再生提供了营养物质，从而能够进行体外传代培养，使毛囊外根鞘细胞具有较高的再生和分化能力。
附图说明
[0022]图1为采用不同毛囊外根鞘细胞培养基培养的毛囊外根鞘细胞的生长曲线图，培养基分别为实施例3、对比例1、对比例3、对比例5和对比例7的毛囊外根鞘细胞培养基。
[0023]图2为采用不同毛囊外根鞘细胞培养基培养的毛囊外根鞘细胞的生长曲线图，培养基分别为实施例4、对比例2、对比例4、对比例6和对比例7的毛囊外根鞘细胞培养基。
[0024]图3为采用实施例3的毛囊外根鞘细胞培养基培养的毛囊外根鞘细胞的细胞形态
图，培养时间为第3天。
[0025]图4为采用实施例3的毛囊外根鞘细胞培养基培养的毛囊外根鞘细胞的细胞形态图，培养时间为第9天。
[0026]图5为图4的局部放大图。
具体实施方式
[0027]为使本专利技术实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施方式，进一步阐述本专利技术。
[0028]实施例1
[0029]一种毛囊外根鞘细胞培养基，以DMEM/F
‑
12为基础培养基，包含以下含量的组分：
[0030][0031]还包括自体血清，自体血清的体积百分含量为4％。
[0032]实施例2
[0033]一种毛囊外根鞘细胞培养基，以DMEM/F
‑
12为基础培养基，包含以下含量的组分：
[0034][0035][0036]还包括自体血清，自体血清的体积百分含量为6％。
[0037]实施例3
[0038]一种毛囊外根鞘细胞培养基，以DMEM/F
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12为基础培养基，包含以下含量的组分：
[0039][0040][0041]还包括自体血清，自体血清的体积百分含量为5％。
[0042]实施例4
[0043]一种毛囊外根鞘细胞培养基，以DMEM/F
‑
12为基础培养基，包含以下含量的组分：
[0044][0045][0046]还包括自体血清，自体血清的体积百分含量为6％。
[0047]对比例1
[0048]具体同实施例3，所不同的是，对比例1中不加入人参皂苷。
[0049]对比例2
[0050]具体同实施例4，所不同的是，对比例2中不加入人参皂苷。
[0051]对比例3
[0052]具体同实施例3，所不同的是，对比例3中不加入黄芪多糖。
[0053]对比例4
[0054]具体同实施例4，所不同的是，对比例4中不加入黄芪多糖。
[0055]对比例5
[0056]具体同实施例3，所不同的是，对比例5中不加入人参皂苷和黄芪多糖。
[0057]对比例6
[0058]具体同实施例4，所不同的是，对比例6中不加入人参皂苷和黄芪多糖。
[0059]对比例7
[0060]以DMEM/F
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12为基础培养基，包含以下含量的组分：5ng/mL表皮生长因子、0.4μg/mL氢化可的松、40mg/mL牛垂体提取物、5μg/mL胰岛素、0.4μg/mL肾上腺素、10μg/mL转铁蛋白、13μg/mL氯化钙。
[0061]试验例1人参皂苷和黄芪多糖对毛囊外根鞘细胞的影响
[0062]利用实施例1
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4、对比例1
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7中的培养基对毛囊外根鞘细胞进行培养，培养条件具体为：在37℃、含5％CO2的组织培养箱本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种毛囊外根鞘细胞培养基，其特征在于，以DMEM/F
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12为基础培养基，包含以下含量的组分：2.根据权利要求1所述的一种毛囊外根鞘细胞培养基，其特征在于，以DMEM/F
‑
12为基础培养基，包含以下含量的组分：3.根据权利要求1所述的一种毛囊外根鞘细胞培养基，其特征在于，还包括自体血清，所述自体血清的体积百分含量为4
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6％。4.根据权利要求1所述的一种毛囊外根鞘细胞培养基，其特征在于，还包括无机盐，所述无机盐的含量为1
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4mg/mL。5.根据权利要求1所述的一种毛囊外根鞘细胞培养基，其特征在于，还包括维生素C，所述维生素C的含量为50
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56μg/mL。6.根据权利要求1所述的一种毛囊外根鞘细胞培养基，其特征在于，还包括氨基酸，所述氨基酸的含量为40
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【专利技术属性】
技术研发人员：陈锦阳，
申请(专利权)人：浙江卫未生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：