一种基于交联网络结构的CHA-PHCR检测系统及其应用技术方案

本发明专利技术公开了一种基于交联网络结构的CHA

【技术实现步骤摘要】
一种基于交联网络结构的CHA
‑
PHCR检测系统及其应用


[0001]本专利技术属于纳米材料
，具体涉及一种基于交联网络结构的CHA
‑
PHCR检测系统及其应用。

技术介绍

[0002]MicroRNA (miRNA) 是小的非编码内源性RNA分子，通过调节基因表达，如细胞增殖、分化、凋亡和死亡，在调节许多生物过程中发挥着至关重要的作用。各种人类疾病，包括癌症、神经系统疾病通常与miRNA表达紊乱有关。据报道miRNA
‑
21在许多癌症中具有异常表达谱，如肺癌、乳腺癌、胰腺癌、慢性淋巴细胞白血病、肝癌、宫颈癌、乳腺癌和前列腺癌。近年来，miRNA 已成为各种癌症早期诊断的新型生物标志物。然而，由于小尺寸、低含量以及和家族成员之间的高序列同源性，在正常溶液中，特别是在活细胞中高度特异性和灵敏地检测miRNA仍然是一个巨大的挑战。因此，迫切需要开发一种用于miRNA定量检测的准确、可靠和抗降解的探针。
[0003]迄今为止，已经报道了许多成熟的方法来检测miRNA。Northern本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于交联网络结构的CHA
‑
PHCR检测系统，其特征在于：所述检测系统由4种发卡探针构成，包括发卡探针H1、发卡探针H2、回文发卡探针f
‑
PH1和回文发卡探针f
‑
PH2；其中，所述发卡探针H1为：5
’‑
ATCAGACTGATGTTGATACCTGCTCCATCCTCAACATCAGTCTGATAAGCTA
‑3’
；所述发卡探针H2为：5
’‑
CTGATGTTGATACCTGCTCCATCCTAGCTTATCAGACTGATGTTGAGGATGGAGCAGGTATCAACATCAGTCTGAT
‑3’
;所述回文发卡探针f
‑
PH1为：5
’‑
GGATGGAGCAGGTATCAACATCAGTCTGATG/Cy3/GTAGGATCAGACTGATGTTGATACCTGCTTTTgatcgatc
‑3’
；所述回文发卡探针f
‑
PH2为：5
’‑
ccgtacggTTTATCAGACTGATGTTGATACCTGCTCCATCCAGCAGGTATCAACATCAGTCTGATCCTACC/Cy5/
‑3’
。2.一种如权利要求1所述的基于交联网络结构的CHA
‑
PHCR检测系统的构建方法，其特征在于：包括以下步骤：1）将发卡探针H1、发卡探针H2、回文发卡探针f
‑
PH1和回文发卡探针f
‑
PH2在5.2 μL的 1
×
TAE/Mg
2+
缓冲液中混合，得到探针混合液；2）向步骤1）所得探针混合液中加入miRNA靶标，在37℃下孵育3 h，触发催化发夹组装反应和基于回文的杂交链反应。3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于：所述探针混合液中，四条发卡探针H1:H2:f
‑
PH1:f
‑
PH2的摩尔比为1:1:10:40。4.如权利要求1所述的基于交联网络结构的CHA
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PHCR检测系统在检测活细胞内miRNA
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21中的应用。5.一种由权利要求1所述的基于交联网络结构的CHA
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PHCR检测系统改造而来的通用型CHA
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PHCR检测系统，其特征在于：所述通用型CHA
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PHCR检测系统为针对检测目标改变目标结合的发卡探针的序列所得。6.根据权利要求5所述的通用型检测系统，其特征在于：所述通用型CHA
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PHCR检测系统为针对miRNA
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【专利技术属性】
技术研发人员：吴再生，李丛丛，张晶晶，高艳莎，罗沙沙，
申请(专利权)人：福州大学，
类型：发明
国别省市：