【技术实现步骤摘要】
一种在单分子水平检测TET2的无扩增的单量子点生物传感器及其检测方法和应用
[0001]本专利技术属于荧光检测
,具体涉及一种在单分子水平检测TET2的无扩增的单量子点生物传感器及其检测方法和应用。
技术介绍
[0002]本专利技术
技术介绍
中公开的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解,而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
[0003]TET2是一种依赖铁(II)和α
‑
酮戊二酸(αKG)的双加氧酶,能够将5
‑
甲基胞嘧啶(5mC)氧化成5
‑
羟甲基胞嘧啶(5hmC),然后氧化成5
‑
甲酰胞嘧啶(5fC)或5
‑
羧基胞嘧啶(5caC)。胞嘧啶的氧化产物可被胸腺嘧啶DNA糖基化酶(TDG)识别和切割,生成碱性核苷酸,该核苷酸可通过DNA碱基切除修复(BER)被胞嘧啶取代,从而启动哺乳动物活跃的DNA去甲基化过程。TET2的正常活动保证了生物体内甲基化的动态平衡。此外, ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种单量子点传感器,其特征在于,所述单量子点传感器至少包括:报告探针,捕获探针,量子点以及游离的荧光染料;其中,所述报告探针具有与所述捕获探针特异性杂交的互补区域;所述报告探针修饰有5
‑
碘代胞嘧啶,其能够在钯配体配合物的作用下形成5
‑
乙烯基胞嘧啶;所述捕获探针末端修饰有生物素。2.如权利要求1所述的单量子点传感器,其特征在于,所述量子点为605QD;优选的,所述605QD为链霉亲和素包被的605QD;所述荧光染料为Cy5;优选的,所述Cy5为氨基化的Cy5。3.如权利要求1所述的单量子点传感器,其特征在于,所述报告探针的碱基序列为5
’‑
CTC CTC CCC CAT CTC CTC CCA GTC C
‑3’
,下划线碱基“C”表示5
‑
碘代胞嘧啶;所述捕获探针的碱基序列为5
’‑
GGA CTG GGA GGA GAT GGG GGA GGA G
‑
biotin
‑3’
。4.权利要求1
‑
3任一项所述单量子点传感器在检测TET2中的应用。5.一种检测TET2的方法,其特征在于,所述方法包括采用权利要求1
‑
3任一项所述单量子点传感器进行检测。6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述方法包括:S1、将经过预处理后获得的5
‑
乙烯基胞嘧啶修饰的报告探针与捕获探针共孵育获得双链DNA;S2、将待测样品与步骤S1获得的双链DNA共孵育后高温灭活,然后加入荧光染料继续孵育;最后向其中加入量子点。7.如权利要求6所述的方法,其特征在于,所述步骤S1中,经过预处理后获得的5
‑
乙烯基胞嘧啶修饰的报告探针的具体方法为:5
‑
吲哚胞嘧啶修饰的报告探针在钯配体复合物存在下发生Suzuki
‑
Miyaura反应生成5
‑
乙烯基胞嘧啶修饰的报告探针;优选的,所述预处理方法包括:将乙烯基硼酸MIDA酯、5
‑
碘代胞嘧啶修饰的报告探针、醋酸钯(II)、2
‑
氨基
‑
4,6
‑
二羟基嘧啶...
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