血管内皮干细胞的制造方法技术

技术编号:33078455 阅读:20 留言:0更新日期:2022-04-15 10:19
本发明专利技术提供由血管内皮干细胞以外的细胞人工制造血管内皮干细胞的方法。本发明专利技术的血管内皮干细胞的制造方法包括使不具有干细胞特性的血管内皮细胞与由新生儿期或幼年期的哺乳动物的器官分泌的因子接触的步骤,该步骤可以为(1)将不具有干细胞特性的血管内皮细胞移植到非人哺乳动物的器官中的步骤、或者(2)使用包含由新生儿期或幼年期的哺乳动物的器官分泌的因子的培养系统培养不具有干细胞特性的血管内皮细胞的步骤。的血管内皮细胞的步骤。的血管内皮细胞的步骤。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】血管内皮干细胞的制造方法


[0001]本专利技术涉及血管内皮干细胞的制造方法。

技术介绍

[0002]与血管相关的疾病被统称为血管病,例如存在恶性肿瘤、视网膜病、慢性炎性疾病、动脉硬化、缺血性疾病等多种疾病。针对这样的疾病,正在积极开发通过控制血管形成来改善疾病的治疗方法。其中,通过使血管再生来改善疾病的治疗被称为治疗性血管新生(therapeutic angiogenesis),是针对因各种原因而导致血管数的降低、血管功能的降低的疾病使血管再生来谋求病情改善的治疗方法。例如,可以列举:1)对心肌缺血、脑缺血、下肢缺血等诱导新血管来改善缺血的治疗、即改善作为血管原来的功能的血液输送的治疗方法;2)针对通常因遗传因素、后天因素使由血管内皮细胞分泌的因子从血管内皮细胞的分泌被抑制从而导致疾病等的疾病(例如,血管内皮细胞中的凝固因子的产生降低而发病的血友病等)的血管再生的治疗方法;3)使疾病器官的血管正常化而使器官的功能恢复的血管再生(例如,针对肝纤维化、肝硬化、肺不张、骨质疏松症、肾功能障碍等的血管再生)等。
[0003]虽然在基础医学上也开始证明治疗性血管再生对如上所述的疾病是有效的,但实际在临床上应用的是细胞治疗、细胞因子(基因)治疗。例如,作为细胞治疗,有使用存在于骨髓中的血管内皮祖细胞使血管再生的方法。但是,该祖细胞不是干细胞,因此认为由该祖细胞形成的血管不能长期维持。另外,还有注入脂肪组织等的间充质干细胞来诱导血管再生的方法。该方法被认为是通过由间充质干细胞分泌的诱导血管形成的物质使原有血管的血管内皮细胞增殖而使血管再生的方法。但是,不能用于血管再生能力减弱的患者。
[0004]除了细胞治疗以外,还实施了给用使血管内皮细胞增殖的生长因子的方法。血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor;VEGF)为能够最强地诱导血管内皮细胞的增殖的细胞因子。在2000年前后实施了将表达编码该VEGF的基因的质粒注入到陷入缺血的区域而使血管再生的治疗。但是,VEGF使血管透过性亢进,发生大量血液成分的组织内积存所引起的水肿。由于该副作用,现在不再进行使用VEGF的治疗。另一方面,使用肝细胞增殖因子(Hepatocyte growth factor:HGF)基因的血管再生的治疗也在临床上使用。显示其有效性的数据也在被介绍,但还没有提及长期的效果。
[0005]例如,如在骨髓移植中为了利用他人的骨髓重构骨髓而需要造血干细胞那样,为了长期地维持再生的血管,需要利用具有干细胞特性的细胞重构血管。本专利技术人发现,在原有血管的血管内皮细胞中,虽然比例非常小,但存在产生血管内皮细胞的能力极高的细胞(非专利文献1、2)。明确了该血管内细胞与存在于骨髓中的血管内皮祖细胞不同,是能够长期作为血管内皮细胞作出贡献的细胞。本专利技术人发现,这样的产生血管内皮细胞的能力极高的细胞作为药剂排出能力高的血管内皮细胞存在于原有血管中。
[0006]此外,本专利技术人为了详细地分析该产生血管内皮细胞的能力极高的血管内皮细胞作为干细胞的特征,进行了在该血管内皮细胞上表达的表面标记的分离,发现了在血管内皮干细胞上表达CD157和CD200(非专利文献2、专利文献1)。CD200阳性CD157阳性的血管内
皮细胞群具有维持未分化性并进行分裂(自我复制)、并且最终大量产生CD200阴性CD157阴性的分化的血管内皮细胞的能力。另外明确了,由该血管内皮细胞再生的血管不会退化,长期维持为血管。具体而言,不仅维持了血液输送功能,而且还维持了应由血管内皮细胞分泌的分子(例如凝固因子VIII等)的长期产生功能。以下,将本专利技术人发现的具有干细胞特性的血管内皮细胞称为“血管内皮干细胞”。
[0007]在诱导血管再生时,需要利用这样的具有干细胞特性的血管内皮细胞的血管再生,通过移植血管内皮干细胞,可能成为对没有血管再生的预备能力的患者也带来治疗效果的治疗。但是,血管内皮干细胞在生物体内极微量地存在,对每个进行血管再生的患者采集患者自身的血管内皮干细胞效率非常差。另外,还存在患者的血管内皮干细胞功能受到阻碍的可能性。因此,期望开发由某些细胞人工制造血管内皮干细胞的方法。
[0008]现有技术文献
[0009]专利文献
[0010]专利文献1:国际公开WO2019/098264A1
[0011]非专利文献
[0012]非专利文献1:Naito H.et al.,Identification and characterization of a resident vascular stem/progenitor cell population in preexisting blood vessels,EMBO J.2012Feb 15;31(4):842

55.
[0013]非专利文献2:Wakabayashi T.et al.,CD157 Marks Tissue

Resident Endothelial Stem Cells with Homeostatic and Regenerative Properties,Cell Stem Cell.2018Mar 1;22(3):384

397.

技术实现思路

[0014]专利技术所要解决的问题
[0015]本专利技术的目的在于提供由血管内皮干细胞以外的细胞人工制造血管内皮干细胞的方法。
[0016]用于解决问题的方法
[0017]为了解决上述问题,本专利技术包含以下的各专利技术。
[0018][1]一种血管内皮干细胞的制造方法,其特征在于,包括使不具有干细胞特性的血管内皮细胞与由新生儿期或幼年期的哺乳动物的器官分泌的因子接触的步骤。
[0019][2]如上述[1]所述的制造方法,其特征在于,上述步骤通过以下的(1)或(2)中的任意一个来进行:
[0020](1)将上述不具有干细胞特性的血管内皮细胞移植到非人哺乳动物的器官中;或者
[0021](2)使用包含由新生儿期或幼年期的哺乳动物的器官分泌的因子的培养系统培养上述不具有干细胞特性的血管内皮细胞。
[0022][3]如上述[1]或[2]所述的制造方法,其中,上述新生儿期或幼年期的哺乳动物为新生儿期的哺乳动物。
[0023][4]如上述[1]~[3]中任一项所述的制造方法,其中,上述不具有干细胞特性的血管内皮细胞为由新生儿期或幼年期的哺乳动物取得的细胞。
[0024][5]如上述[4]所述的制造方法,其中,上述不具有干细胞特性的血管内皮细胞为由新生儿期的哺乳动物取得的细胞。
[0025][6]如上述[1]~[5]中任一项所述的制造方法,其中,上述器官为肝脏。
[0026][7]一种血管内皮干细胞诱导剂,其含有由新生儿期或幼年期的哺乳动物的器官分泌的因子。
[0027][8]如上述[7]所述的血管内皮干细胞诱导剂,其中,含有包含上述因子的本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种血管内皮干细胞的制造方法,其特征在于,包括使不具有干细胞特性的血管内皮细胞与由新生儿期或幼年期的哺乳动物的器官分泌的因子接触的步骤。2.如权利要求1所述的制造方法,其特征在于,所述步骤通过以下的(1)或(2)中的任意一个来进行:(1)将所述不具有干细胞特性的血管内皮细胞移植到非人哺乳动物的器官中;或者(2)使用包含由新生儿期或幼年期的哺乳动物的器官分泌的因子的培养系统培养所述不具有干细胞特性的血管内皮细胞。3.如权利要求1或2所述的制造方法,其中,所述新生儿期或幼年期的哺乳动物为新生儿期的哺乳动物。4.如权利要求1~3中任一项所述的制造方法,其中,所述不具有干细胞特性的血管内皮细胞为由新生儿期或幼年期的哺乳动物取得的细...

【专利技术属性】
技术研发人员:高仓伸幸内藤尚道若林卓射场智大
申请(专利权)人:国立大学法人大阪大学
类型:发明
国别省市:

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