【技术实现步骤摘要】
一种外泌体的提取方法及其应用
[0001]本专利技术涉及生物医药
，具体而言，涉及一种外泌体的提取方法及其应用。
技术介绍
[0002]目前，针对皮肤创伤的治疗手段主要有皮肤移植、生长因子治疗、神经植入、干细胞治疗、基因治疗、机械刺激疗法等。其中，皮肤移植和生长因子是目前临床上治疗皮肤创伤的主要方法。皮肤移植主要包括活体皮肤移植和皮肤替代物移植。活体皮肤移植分为中厚皮肤移植和全层皮肤移植，主要来源分为同种自体、同种异体以及异种来源的移植，这种移植没有免疫排斥，但是存在挛缩和移植范围受限的问题。由于活体皮肤移植的应用局限性，人工皮肤替代物成为有前景的发展方向，在体外通过生物工程制备的皮肤替代物有充足的细胞来源，但是存在耗时和免疫排斥的问题，这仍需要较长时间去解决。在生长因子疗法中，目前只有血小板衍化生长因子PDGF
‑
BB被美国FDA批准用于慢性创伤的临床治疗。临床发现becaplermin能有效治疗糖尿病足部溃疡[，但由于使用剂量大，可能有潜在的副作用与安全风险，如何在不提高剂量的情况下提高递送效率是
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种外泌体的提取方法，其特征在于，所述提取方法包括以下步骤：将人多能干细胞放置第一培养基进行人多能干细胞传代培养，待人多能干细胞生长至20％
‑
25％的密度，转移至第一诱导培养基进行第一诱导培养，所述第一诱导培养2d
‑
3d后转移至第二诱导培养基进行第二诱导培养，所述第二诱导培养至5d后，用Accutase酶消化细胞，用神经维持培养基将其放置提前铺胶处理的六孔板中，并添加小分子抑制剂，记为第一代神经干细胞的第一代；继续传代培养至第14代后，往所述神经维持培养基中添加牛血清蛋白，得到神经干细胞；将所述神经干细胞进行第一离心处理、第二离心处理、第三离心处理以及第四离心处理后，添加PBS重悬外泌体沉淀，经过第五离心处理，得到神经干细胞外泌体；其中，所述外泌体粒径为30nm
‑
150nm；所述外泌体能应用于皮肤修复组合物的制备中。2.根据权利要求1所述的外泌体的提取方法，其特征在于，所述第一培养基为DMEM/F12培养基。3.根据权利要求2所述的外泌体的提取方法，其特征在于，所述人多能干细胞传代培养为：将基质胶溶解后与所述DMEM/F12培养基混合，加入六孔板中，然后放置细胞培养箱中于37℃的条件孵育处理1h，去除所述基质胶，再铺入多能干细胞，且每日更换新鲜的DMEM/F1...
【专利技术属性】
技术研发人员：郭莹，李晶，
申请(专利权)人：深圳市夏同生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。