一种含甘油葡萄糖苷和酵母发酵产物的组合物及其制备方法技术

本发明专利技术提供一种含甘油葡萄糖苷和酵母发酵产物的组合物的制备方法，包括以下步骤：培养表达蔗糖磷酸化酶的微生物，获得包含蔗糖磷酸化酶的培养液；向所述培养液中加入蔗糖和甘油进行转化反应，获得含甘油葡萄糖苷的转化液；将所述转化液灭活从而结束转化反应收集上清液；以所述上清液为培养基，接种酵母菌进行培养，获得酵母菌培养液；将所述酵母菌培养液进行处理，获得含甘油葡萄糖苷和酵母发酵产物的组合物。本发明专利技术产生特定的酵母菌发酵产物，最终获得一种含有甘油葡萄糖苷、酵母发酵产物的，具有强效保湿、修复等功效的液体，且制备工艺操作简便、生产成本低、废液产生量低，非常适合工业上放大生产。合工业上放大生产。

【技术实现步骤摘要】
一种含甘油葡萄糖苷和酵母发酵产物的组合物及其制备方法


[0001]本专利技术属于生物医药领域，具体涉及一种含甘油葡萄糖苷和酵母发酵产物的组合物及其制备方法。

技术介绍

[0002]甘油葡萄糖苷是一种渗透压调节溶质，存在于多种植物、藻类和细菌体内，使生命体适应高盐胁迫和干旱环境，应用在化妆品中可以起到保湿与激活细胞的作用。甘油葡萄糖苷的制备方法有三种：化学合成法、酶催化法以及生物发酵法。其中，化学合成法制备甘油葡萄糖苷的产率低，立体选择性差，后续纯化步骤复杂；生物发酵法制备甘油葡萄糖苷的产量目前仅为每升培养液中含有毫克级的甘油葡萄糖苷，远远达不到工业化要求；酶催化法是目前最具应用前景的甘油葡萄糖苷制备方法，尤其是蔗糖磷酸化酶催化蔗糖和甘油合成甘油葡萄糖苷，转化率高达90％以上，是一种有前景的甘油葡萄糖苷工业生产用酶。
[0003]甘油葡萄糖苷的分离提取方法并不简单，这是由于目标物甘油葡萄糖苷与杂质分子中含有的结构官能团类似，且分子量相近，一般的分离提取方法无法将其有效分离。文献中报道最多的分离纯化方法有柱层析和纳滤两种。其中，柱层析主要采用活性炭层析柱吸附目标物与副产物，然后用一定浓度的乙醇洗脱，目标物与副产物分别存在于不同的流出液中。这种分离方法采用的是粉末活性炭，由于粉末活性炭的粒度很小，在层析柱中的密度很大，层析柱的流速很低，加上活性炭对目标物的单位吸附量并不高，导致纯化的效率非常低，放大到工业生产中并不经济。另一个分离方法是纳滤，由于目标物甘油葡萄糖苷与副产物果糖、葡萄糖与甘油的分子量比较接近，采用纳滤将其分离并不十分充分，而且必须采用截留分子量较低的纳滤膜，所以单位时间内的处理量较低，不太适合放大到工业生产中。另外，甘油葡萄糖苷的分离提取可以参考果糖工业生产中用到的模拟移动床色谱技术。利用模拟移动床色谱可以有效地将甘油葡萄糖苷从果糖、葡萄糖和甘油中分出来。但由于模拟移动床色谱系统设备成本较高，柱温与洗脱液温度较高，生产能耗高，工业上这一分离纯化工艺无法广泛使用。

技术实现思路

[0004]针对现有技术存在的上述问题，本专利技术提供一种含甘油葡萄糖苷和酵母发酵产物的组合物及其制备方法。
[0005]具体来说，本专利技术涉及如下方面：
[0006]1、一种含甘油葡萄糖苷和酵母发酵产物的组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
[0007]培养表达蔗糖磷酸化酶的微生物，获得包含蔗糖磷酸化酶的培养液；
[0008]向所述培养液中加入蔗糖和甘油进行转化反应，获得含甘油葡萄糖苷的转化液；
[0009]将所述转化液灭活从而结束转化反应收集上清液；
[0010]以所述上清液为培养基，接种酵母菌进行培养，获得酵母菌培养液；
[0011]将所述酵母菌培养液进行处理，获得含甘油葡萄糖苷和酵母发酵产物的组合物。
[0012]2、根据项1所述的制备方法，其特征在于，在接种酵母菌进行培养之前，对上清液稀释到适当的浓度再作为培养基培养酵母，优选，将上清液稀释到2倍
ꢀ‑
3倍的体积。
[0013]3、根据项1所述的制备方法，其特征在于，向培养液中加入蔗糖和甘油，使得初始加入的蔗糖浓度为50
‑
500g/L，甘油的浓度为20
‑
300g/L，转化反应结束时蔗糖的终浓度为0
‑
50g/L，甘油的终浓度为10
‑
200g/L。
[0014]4、根据项1所述的制备方法，其特征在于，在所述转化反应中，当所述转化液中甘油葡萄糖苷的浓度为30
‑
300g/L，且甘油葡萄糖苷浓度不再随转化反应的时间变化而显著增加，果糖的浓度为25
‑
250g/L，葡萄糖的浓度为5
‑
60g/L时结束转化反应。
[0015]5、根据项1所述的制备方法，其特征在于，接种酵母菌后的OD
600
为0.1
‑
1.0。
[0016]6、根据项1所述的制备方法，其特征在于，所述组合物中甘油葡萄糖苷的浓度为30
‑
300g/L，甘油的浓度为10
‑
200g/L。
[0017]7、根据项1所述的制备方法，其特征在于，所述组合物中蔗糖、果糖和葡萄糖的浓度低于检测下限或为0。
[0018]8、根据项1所述的制备方法，其特征在于，所述酵母菌选自毕赤酵母菌、酿酒酵母菌、克鲁弗酵母菌中的一种或两种以上，优选克鲁弗酵母菌。
[0019]9、一种含甘油、甘油葡萄糖苷和酵母发酵产物的组合物，其特征在于，所述组合物包含甘油葡萄糖苷、甘油和酵母发酵产物，其中甘油葡萄糖苷的浓度为 30
‑
300g/L，甘油的浓度为10
‑
200g/L，并且蔗糖、果糖和葡萄糖的浓度低于检测下限或为0。
[0020]10、根据项9所述的组合物，其由项1
‑
8中任一项所述的制备方法得到。
[0021]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：用蔗糖磷酸化酶培养液直接转化生成甘油葡萄糖苷，再在转化液中接种酵母菌进行发酵，酵母菌在消耗果糖与葡萄糖等副产物的同时，产生特定的酵母菌发酵产物，最终获得一种含有甘油葡萄糖苷、酵母发酵产物的，具有强效保湿、修复等功效的液体，且制备工艺操作简便、生产成本低、废液产生量低，非常适合工业上放大生产。
具体实施方式
[0022]下面结合实施例进一步说明本专利技术，应当理解，实施例仅用于进一步说明和阐释本专利技术，并非用于限制本专利技术。
[0023]除非另外定义，本说明书中有关技术的和科学的术语与本领域内的技术人员所通常理解的意思相同。虽然在实验或实际应用中可以应用与此间所述相似或相同的方法和材料，本文还是在下文中对材料和方法做了描述。在相冲突的情况下，以本说明书包括其中定义为准，另外，材料、方法和例子仅供说明，而不具限制性。以下结合具体实施例对本专利技术作进一步的说明，但不用来限制本专利技术的范围。
[0024]酵母是人们应用最早、最广泛的一种微生物。各大品牌的护肤品中常常加入某种酵母菌发酵产物的提取物或滤液。酵母菌发酵产物中含有多种活性成分，除了氨基酸、核苷酸，还含有单糖、多糖、矿物质、维生素等肌肤有益成分，可以对皮肤起到保湿、促进细胞代谢等作用。
[0025]甘油，又名丙三醇。可与水以任何比例溶解，低浓度丙三醇溶液可做润滑油对皮肤
进行滋润，因此作为一种优良的保湿剂，普遍添加在护肤品中。
[0026]甘油葡萄糖苷是由一分子甘油及一分子葡萄糖通过糖苷键连接而形成的糖苷类化合物，根据立体构型(α和β)及糖苷键连接位置不同，甘油葡萄糖苷有6种不同的立体结构，包括2
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αGG，2S
‑1‑
αGG，2R
‑1‑
αGG，2
‑
βGG，2S
‑1‑
βGG 和2R
‑1‑
βGG。甘油葡萄糖苷拥本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种含甘油葡萄糖苷和酵母发酵产物的组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：培养表达蔗糖磷酸化酶的微生物，获得包含蔗糖磷酸化酶的培养液；向所述培养液中加入蔗糖和甘油进行转化反应，获得含甘油葡萄糖苷的转化液；将所述转化液灭活，结束转化反应收集上清液；以所述上清液为培养基，接种酵母菌进行培养，获得酵母菌培养液；将所述酵母菌培养液进行处理，获得含甘油葡萄糖苷和酵母发酵产物的组合物。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在接种酵母菌进行培养之前，对上清液稀释到适当的浓度再作为培养基培养酵母，优选，将上清液稀释到2倍
‑
3倍的体积。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，向培养液中加入蔗糖和甘油，使得初始加入的蔗糖浓度为50
‑
500g/L，甘油的浓度为20
‑
300g/L，转化反应结束时蔗糖的终浓度为0
‑
50g/L，甘油的终浓度为10
‑
200g/L。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在所述转化反应中，当所述转化液中甘油葡萄糖苷的浓度为30
‑
300g/L，且甘油葡萄糖苷浓度不再随转化反应的时间变化而显著增加，...

【专利技术属性】
技术研发人员：王冠凤，董艳美，周雪，钱晓路，李晓天，毛华，郭学平，
申请(专利权)人：华熙生物科技天津有限公司，
类型：发明
国别省市：