一种提高酪蛋白抗酶解能力、降低致敏性的方法技术

本发明专利技术涉及一种提高酪蛋白抗酶解能力、降低致敏性的方法，使汉麻籽蛋白与酪蛋白通过转谷氨酰胺酶交联，具体包括以下步骤：(1)配制酪蛋白与汉麻籽蛋白的混合溶液；(2)向酪蛋白与汉麻籽蛋白的混合溶液中加入转谷氨酰胺酶，进行交联反应，得到经交联的酪蛋白溶液；(3)将经交联的酪蛋白溶液置于3

【技术实现步骤摘要】
一种提高酪蛋白抗酶解能力、降低致敏性的方法


[0001]本专利技术涉及牛乳生产
，具体涉及一种提高酪蛋白抗酶解能力、降低致敏性的方法。

技术介绍

[0002]酪蛋白作为牛奶中最主要的蛋白质，也是一种最为常见的动物蛋白，约占牛奶蛋白的80％左右，由α
s1
‑
、α
s2
‑
、β
‑
和κ
‑
酪蛋白组成，分子量在19
‑
24KDa之间，他们各自具有独特的结构和功能特性。并且酪蛋白具有作为载体的潜力，可用于食品和制药行业敏感物质的递送。但牛乳也是联合国粮农组织公布的八大过敏原之一，大约有2％～6％的婴幼儿对牛奶过敏，成人中的过敏人数也达0.1％～0.5％。牛奶中含有超过20种可引起过敏反应的蛋白质过敏原。除β
‑
乳球蛋白外，酪蛋白是牛奶中的主要过敏原，其中α
s1
‑
酪蛋白致敏性最强，牛奶过敏人群中约有65％对α
s1
酪蛋白过敏。
[0003]目前，可通过一些物理、化学手段对蛋白进行改性，破坏牛乳蛋白的三维结构，从而改变蛋白的过敏性。这种改性方法包括：加热、远红外、超高压、糖基化等。但上述物理方法操作复杂、能耗高，化学改性后的产品存在食用安全问题。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种提高酪蛋白抗酶解能力、降低致敏性的方法。
[0005]本专利技术的目的可以通过以下技术方案来实现：一种提高酪蛋白抗酶解能力、降低致敏性的方法，使汉麻籽蛋白与酪蛋白通过转谷氨酰胺酶交联。
[0006]用低敏植物蛋白替代乳蛋白为降低牛乳致敏性最直接且简便的方法。汉麻籽蛋白来源与工业汉麻籽，是一种未被充分利用的优质蛋白质资源，被认为是酪蛋白理想替代品，其主要由70％左右的麻仁球蛋白和30％左右的白蛋白组成。汉麻籽蛋白具有丰富的氨基酸组成，包含所有必需氨基酸(EAA)。其中含有较多的天冬氨酸、谷氨酸和精氨酸且赖氨酸为第一限制性氨基酸。汉麻籽蛋白中远高于酪蛋白和大豆蛋白的精氨酸/赖氨酸比(4.7
‑
6.1)决定其具有降低胆固醇血症和动脉粥样硬化等慢性疾病风险的功效。在大麻蛋白中观察到的EAA占总氨基酸的比例显著高于大豆蛋白，表明汉麻籽蛋白具有优越的氨基酸模式。并且据报道，汉麻籽蛋白的必须氨基酸指数(>80)也显著高于其他植物蛋白，例如板栗蛋白(76
‑
79)、藜麦种子蛋白(79)。除此之外，汉麻籽蛋白几乎没有致敏性且抗营养因子含量极低。因此用汉麻籽蛋白替代酪蛋白不仅能降低牛乳致敏性，也符合动物蛋白的可持续发展原则。
[0007]优选地，所述的酪蛋白为牛乳酪蛋白；所述的转谷氨酰胺酶来源于微生物，酶活为140U/g。
[0008]具体地，该方法包括以下步骤：汉麻籽蛋白的提取、酪蛋白和汉麻籽蛋白混合溶液配制、交联反应、终止交联。
[0009]优选地，所述的提高酪蛋白抗酶解能力、降低致敏性的方法具体包括以下步骤：
[0010](1)配制酪蛋白与汉麻籽蛋白的混合溶液；
[0011](2)向酪蛋白与汉麻籽蛋白的混合溶液中加入转谷氨酰胺酶，进行交联反应，得到经交联的酪蛋白溶液；
[0012](3)将经交联的酪蛋白溶液置于3
‑
5℃环境中，终止交联。
[0013]优选地，所述的汉麻籽蛋白通过碱溶酸沉法制备。
[0014]进一步优选地，所述的汉麻籽蛋白的制备方法具体包括以下步骤：
[0015]S1：在经粉碎后汉麻籽中添加正己烷进行脱脂；
[0016]S2：将脱脂后的汉麻籽粉分散在去离子水中，用碱液调节pH至11
‑
12，并在室温下连续搅拌2
‑
3h，得到混合物；
[0017]S3：将混合物离心，并使用酸液将上清液的pH调节至4
‑
5，并在3
‑
5℃下过夜以沉淀得到所述的汉麻籽蛋白。
[0018]更进一步优选地，得到所述的汉麻籽蛋白后，将汉麻籽蛋白与溶液通过离心分离，然后分散于蒸馏水中并调节pH至中性，然后将混合物冻干并在4℃下储存，直至使用。
[0019]更进一步优选地，步骤S1所述的汉麻籽与正己烷的质量体积比为1g:(2.5
‑
3.5)mL；
[0020]步骤S2所述的汉麻籽粉与去离子水的质量体积比为1g:(9
‑
11)mL。
[0021]更进一步优选地，步骤S2所述的碱液为NaOH溶液；
[0022]步骤S3所述的酸液为HCl溶液。
[0023]优选地，所述的汉麻籽蛋白提取步骤为：首先在经粉碎后汉麻籽中添加正己烷(1:2.5
‑
1:3.5，w/v)进行脱脂，搅拌2
‑
3h，并重复该过程三次。然后在室温下，在通风橱中风干22
‑
24h。将脱脂后的汉麻籽粉分散在去离子水中(1:9
‑
1:11，w/v)，用6M NaOH调节pH至11
‑
12，并在25℃下连续搅拌2
‑
3h。将混合物在6000
×
g下离心10
‑
15min，并使用6M HCl将上清液的pH调节至4.5，并在4℃下过夜以沉淀蛋白质。沉淀通过6000
×
g离心10
‑
15min分离，然后分散于蒸馏水中并调节pH至7.0。然后将混合物冻干并在4℃下储存，直至使用。
[0024]优选地，步骤(1)所述的酪蛋白与汉麻籽蛋白的混合溶液的配制过程具体为：分别配制质量浓度相同的酪蛋白溶液和汉麻籽蛋白溶液，将酪蛋白溶液与汉麻籽蛋白溶液按(6
‑
8):1的质量比混合，搅拌，得到所述的酪蛋白与汉麻籽蛋白的混合溶液。
[0025]优选地，所述的酪蛋白和汉麻籽蛋白混合溶液配制步骤为：首先分别配制浓度为6％(w/v)的酪蛋白和汉麻籽蛋白溶液，以7:1的质量比混合，室温下用磁力搅拌器搅拌30min，转速为300r/min。得到酪蛋白、汉麻籽蛋白混合溶液。
[0026]优选地，步骤(2)所述的交联反应过程具体为：将酪蛋白与汉麻籽蛋白的混合溶液置于40℃水浴锅中预热5
‑
10min，称取并加入10
‑
50U/g转谷氨酰胺酶，搅拌后孵育1
‑
3h，完成交联。
[0027]优选地，所述的交联反应步骤为：将酪蛋白、汉麻籽蛋白混合溶液置于40℃水浴锅中预热5
‑
10min，称取并加入10
‑
50U/g转谷氨酰胺酶至上述混合物溶液，用磁力搅拌器搅拌3min，转速为300r/min。置于40℃水浴锅中孵育1
‑
3h，完成交联。
[0028]优选地，步骤(3)所述的终止交联过程具体为：将经交联的酪蛋白溶液置于3
‑...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提高酪蛋白抗酶解能力、降低致敏性的方法，其特征在于，使汉麻籽蛋白与酪蛋白通过转谷氨酰胺酶交联。2.根据权利要求1所述的提高酪蛋白抗酶解能力、降低致敏性的方法，其特征在于，具体包括以下步骤：(1)配制酪蛋白与汉麻籽蛋白的混合溶液；(2)向酪蛋白与汉麻籽蛋白的混合溶液中加入转谷氨酰胺酶，进行交联反应，得到经交联的酪蛋白溶液；(3)将经交联的酪蛋白溶液置于3
‑
5℃环境中，终止交联。3.根据权利要求1或2所述的提高酪蛋白抗酶解能力、降低致敏性的方法，其特征在于，所述的汉麻籽蛋白通过碱溶酸沉法制备。4.根据权利要求3所述的提高酪蛋白抗酶解能力、降低致敏性的方法，其特征在于，所述的汉麻籽蛋白的制备方法具体包括以下步骤：S1：在经粉碎后汉麻籽中添加正己烷进行脱脂；S2：将脱脂后的汉麻籽粉分散在去离子水中，用碱液调节pH至11
‑
12，并在室温下连续搅拌2
‑
3h，得到混合物；S3：将混合物离心，并使用酸液将上清液的pH调节至4
‑
5，并在3
‑
5℃下过夜以沉淀得到所述的汉麻籽蛋白。5.根据权利要求4所述的提高酪蛋白抗酶解能力、降低致敏性的方法，其特征在于，得到所述的汉麻籽蛋白后，将汉麻籽蛋白与溶液通过离心分离，然后分散于蒸馏水中并调节pH至中性，然后将混合物冻干并在4℃下储存，直至使用。6.根据权利要求4所述的提高酪蛋白抗酶解能...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓云，周学府，郑远荣，钟宇，王丹凤，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：