一种检测低聚软骨基质蛋白的试纸条及检测方法技术

本发明专利技术公开了一种检测低聚软骨基质蛋白的试纸条及检测方法，涉及免疫层析法定量检测技术领域。与现有技术相比，本发明专利技术提供的检测试纸条具有如下优势：制作方便，体积小、便于携带且成本较低，克服了酶联免疫吸附法(ELISA)制作复杂、体积大、不便于携带等缺点，可以实现单人份检测。上述试纸条具有检测灵敏度高，可以满足定量检测的需求。通过免疫分析仪对结果进行判读，可实现自动化，减少主观因素的影响，提供便利、快速、可靠、结果可重复的诊断结果。采用上述试纸条适用于各种医疗现场的检测所需。需。需。

【技术实现步骤摘要】
一种检测低聚软骨基质蛋白的试纸条及检测方法


[0001]本专利技术涉及免疫层析法定量检测
，具体而言，涉及一种检测低聚软骨基质蛋白的试纸条及检测方法。

技术介绍

[0002]低聚软骨基质蛋白(cartilage oligomeric matrix protein,COMP)，又称软骨低聚基质蛋白、软骨低聚物基质蛋白或软骨寡聚基质蛋白。低聚软骨基质蛋白属于一种骨代谢标志物，它是一种由五个独立的次级单位经二硫键相连的五聚蛋白，最早发现于软骨，近年也少量出现于肌腱和滑膜，但在皮肤、肺等结缔组织中却未曾有报道。软骨由于疾病的发生在破碎时会释放蛋白分子进入滑液中，在血液中也可以发现这些蛋白如低聚软骨基质蛋白。
[0003]低聚软骨基质蛋白的检测对骨关节炎、类风湿关节炎软骨病变等疾病的早期诊断、预后及疗效观察具有重要的临床意义。目前国内外临床上检测低聚软骨基质蛋白的常用方法有酶联免疫吸附法(ELISA)。该方法存在耗时长、灵敏度低、背景值高、操作繁琐的问题，且易产生假阳性和假阴性结果，ELISA检测需要专业人员进行操作，不适应临床对低聚软骨基质蛋白快速准确定量检测的需要。目前国内检测低聚软骨基质蛋白的产品较少，临床上迫切需要建立一种快速、便捷、准确的检测低聚软骨基质蛋白的产品或方法。
[0004]鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种检测低聚软骨基质蛋白的试纸条及检测方法以解决上述技术问题。
[0006]本专利技术是这样实现的：
[0007]本专利技术提供了一种检测低聚软骨基质蛋白的试纸条，其包括基板，基板上依次设置有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，结合垫上固定有示踪物标记的抗低聚软骨基质蛋白抗体1和示踪物标记的质控线配体1，硝酸纤维素膜上设置有检测线和质控线，检测线上固定有抗低聚软骨基质蛋白的抗体2，质控线上固定有能与质控线配体1特异结合的配体2。
[0008]上述抗低聚软骨基质蛋白的抗体1和抗低聚软骨基质蛋白的抗体2是针对低聚软骨基质蛋白的两种不同表位的抗体。可以根据需要选择市售的对低聚软骨基质蛋白具有高亲和力的抗体。
[0009]本专利技术利用试纸条中具特异性的抗低聚软骨基质蛋白的抗体与待检样本中低聚软骨基质蛋白(抗原)结合的特性，可以实现待测样本中的低聚软骨基质蛋白的快速、准确检出。
[0010]与现有技术相比，本专利技术提供的检测试纸条具有如下优势：制作方便，体积小、便于携带且成本较低，克服了酶联免疫吸附法(ELISA)制作复杂、体积大、不便于携带等缺点，
可以实现单人份检测。
[0011]上述试纸条具有检测灵敏度高，可以满足定量检测的需求。通过免疫分析仪对结果进行判读，可实现自动化，减少主观因素的影响，提供便利、快速、可靠、结果可重复的诊断结果。采用上述试纸条适用于各种医疗现场的检测所需。
[0012]在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述示踪物是一种能发光且能与抗低聚软骨基质蛋白抗体1和质控线配体1结合的物质。
[0013]在一种可选的实施方式中，示踪物包括不限于胶体金、量子点、荧光微球、上转发光、时间分辨荧光或金磁纳米。示踪物是一种能发光且能与抗低聚软骨基质蛋白抗体1和质控线配体1结合的物质。示踪物发光的强度可利用特定仪器定量判读或检测。而通过将示踪物与抗低聚软骨基质蛋白抗体1以及质控线配体1偶联，从而对形成的偶联复合物进行示踪，在层析作用下，偶联复合物中的抗低聚软骨基质蛋白抗体1先与样本中的低聚软骨基质蛋白结合，再一起与检测线上的抗低聚软骨基质蛋白抗体2结合，而偶联复合物中的质控线配体1直接与硝酸纤维膜上的配体2结合，最终，检测线位置的示踪物含量与待测样本中的低聚软骨基质蛋白的浓度成正相关，而质控线上的示踪物含量在同一批试纸条中基本不变。通过与已知不同浓度的低聚软骨基质蛋白在试纸条上检测所制定的标准曲线进行比较分析，实现对低聚软骨基质蛋白的定量检测。
[0014]在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述质控线配体1和配体2为一对能发生特异性结合的生物材料。
[0015]在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述质控线配体1选自如下物质中的任意一种：兔抗牛血清白蛋白与二硝基苯酚偶联物、X IgY，其中所述X为兔、羊、牛、马、猪、鼠、狗、猫、兔、骆驼、驴、鹿、貂、鸡、鸭或鹅；配体2选自如下物质中的任意一种：牛血清白蛋白与二硝基苯酚偶联物、Z抗X IgY；Z为兔、羊、牛、马、猪、鼠、狗、猫、兔、骆驼、驴、鹿、貂、鸡、鸭或鹅，且X与Z不同；在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述Z为羊，X为鸡。
[0016]在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述检测线上抗低聚软骨基质蛋白的抗体2的包被浓度为1
‑
1.2mg/mL；
[0017]质控线上配体2的包被浓度为1
‑
1.2mg/mL。
[0018]在上述包被浓度下可以满足低聚软骨基质蛋白的快速高灵敏度检出。
[0019]在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述试纸条还包括卡壳，卡壳具有腔体，试纸条固定设置在腔体内，在卡壳上还设有加样孔和观察窗，加样孔对应样品垫设置，观察窗对应硝酸纤维素的检测线和质控线设置。
[0020]在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述样品垫上还设置有红细胞截留膜；在一种可选的实施方式中，红细胞截留膜为滤血膜。样品垫用于过滤样本中的红细胞或其他杂质。
[0021]当样本中含有红细胞时，红细胞被滤血膜阻挡，可以减少红细胞对检测结果的影响，提升检测的准确度。因而，本专利技术提供的试纸条可以满足全血样本的检测。
[0022]本专利技术还提供了一种使用上述检测低聚软骨基质蛋白的试纸条进行低聚软骨基质蛋白检测的方法，方法为非疾病的诊断目的，其包括：
[0023]上样至样品垫上，采用能对示踪物含量进行定量检测的仪器对试纸条的检测线进行检测，根据已知浓度的低聚软骨基质蛋白在试纸条上检测所制定的标准曲线(例如五点取样测得的标曲)，获得低聚软骨基质蛋白的定量结果。
[0024]在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述低聚软骨基质蛋白的含量根据检测线示踪物含量与质控线示踪物含量的比值来计算。
[0025]本专利技术具有以下有益效果：
[0026]本专利技术利用试纸条中具特异性的抗低聚软骨基质蛋白的抗体与待检样本中低聚软骨基质蛋白(抗原)结合的特性，可以实现待测样本中的低聚软骨基质蛋白的快速、准确检出。
[0027]与现有技术相比，本专利技术提供的检测试纸条具有如下优势：制作方便，体积小、便于携带且成本较低，克服了酶联免疫吸附法(ELISA)制作复杂、体积大、不便于携带等缺点，可以实现单人份检测。
[0028]上述试纸条具有检测灵敏度高，可以满足定量检测的需求。通过免疫分析仪对结果进行判读，可实现自动化，减少主观因素的影响，提供便利、快速、可靠、结果可重复的诊断结果。采用上述试纸条适用于各种医疗现场的检测所需。
附图说明
[0029]为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测低聚软骨基质蛋白的试纸条，其特征在于，其包括基板，所述基板上依次设置有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述结合垫上固定有示踪物标记的抗低聚软骨基质蛋白抗体1和示踪物标记的质控线配体1，所述硝酸纤维素膜上设置有检测线和质控线，所述检测线上固定有抗低聚软骨基质蛋白的抗体2，所述质控线上固定有能与质控线配体1特异结合的配体2。2.根据权利要求1所述的检测低聚软骨基质蛋白的试纸条，其特征在于，所述示踪物是一种能发光且能与所述抗低聚软骨基质蛋白抗体1和所述质控线配体1结合的物质；优选地，所述示踪物为胶体金、量子点、荧光微球、上转发光、时间分辨荧光或金磁纳米。3.根据权利要求2所述的检测低聚软骨基质蛋白的试纸条，其特征在于，所述质控线配体1和所述配体2为一对能发生特异性结合的生物材料。4.根据权利要求3所述的检测聚集蛋白聚糖的试纸条，其特征在于，所述质控线配体1选自如下物质中的任意一种：兔抗牛血清白蛋白与二硝基苯酚偶联物、XIgY，其中所述X为兔、羊、牛、马、猪、鼠、狗、猫、兔、骆驼、驴、鹿、貂、鸡、鸭或鹅；所述配体2选自如下物质中的任意一种：牛血清白蛋白与二硝基苯酚偶联物、Z抗X IgY；所述Z为兔、羊、牛、马、猪、鼠、狗、猫、兔、骆驼、驴、鹿、貂、鸡、鸭或鹅，且X与Z不同；优选地，所述Z为羊，所述X为鸡。5.根据权利要求3所...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗进才，毛晴，盛正明，段丹，王飞，陈珍，周志丽，崔昆，宋卫，
申请(专利权)人：西安依朵生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：