类夜明珠发光特性的检测系统及配套检测试纸的制备方法技术方案

本发明专利技术提供类夜明珠发光特性的检测系统及配套检测试纸的制备方法，其中包括水溶性类夜明珠发光材料的制备：将200mg类夜明珠材料9,9'

【技术实现步骤摘要】
类夜明珠发光特性的检测系统及配套检测试纸的制备方法


[0001]本专利技术属于检测设备
，尤其涉及类夜明珠发光特性的检测系统及配套检测试纸的制备方法。

技术介绍

[0002]类夜明珠发光是一种延迟发光现象，现实生活中又将这种材料称为夜光粉或长余辉粉。其发光原理属于光致发光，即当材料受到光源激发时在激发态存储激发能，当激发光源关掉后，再将能量以光的形式缓慢释放出来。1996年Matsuzawa等人报道了将铕(Eu)、镝(Dy)等掺杂到铝酸锶(srA l 2
O4)体系中，发现余辉可以达到10小时，发光效率和热稳定性、化学稳定性等方面都很好。在此之后这种稀土掺杂的铝酸盐长余辉材料就得到了商业界的广泛关注，在照明发光、信息加密防伪、安全应急指示、生物成像等领域得到了广泛运用。而免疫层析技术因其快速、简便、检测成本低等特点得到迅速发展，已经广泛应用于医学检测、食品质量监测、毒品检测和环境监测。将类夜明珠发光特性检测系统与免疫层析检测卡相结合，可实现对各类抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等高灵敏、高特异性的快速检测。
[0003]胶体金免疫层析技术是20世纪80年代发展起来的。由于其检测时间短、安全、简便、且不需任何仪器设备等优点，被广泛应用于医学检测、农产品农药兽药残留、进出口产品病原微生物检测等领域。胶体金是呈胶体状态的金颗粒。由于碱性溶液中的金颗粒表面带有负电荷，它们之间的静电斥力使其在溶液中形成稳定的胶体。当溶液中有较大的分子如蛋白质分子时，金颗粒表面的负电荷与蛋白质表面的正电荷结合，使金颗粒能够吸附到蛋白质分子上，并且不影响蛋白质的生物活性。胶体金溶液呈现一定的颜色，随着溶液浓度的升高，溶液的颜色也会由低浓度的桔红色变化为高浓度紫红色。也正是因为它具有化学性质稳定、可吸附和有颜色这3种性质，使它具备了作为检测标记物的特点。免疫层析技术在层析材料上发生的免疫反应，具备免疫反应的高特异性、高效率性、高亲和性的特点。具体过程含有待测物的样品溶液通过纤维层析材料的毛细作用沿着层析材料上移，与固定在层析材料上的针对待测物的受体(抗原或抗体)结合并发生特异性免疫反应。在该过程中，抗原抗体复合物不断被积累富集，通过如标记物胶体金使之显色，从而达到检测目标物质的目的。
[0004]荧光免疫层析技术是基于抗原抗体特异性免疫反应的新型膜检测技术。该技术以固定有检测线(包被抗体或包被抗原)和质控线(抗体)的条状纤维层析材料为固定相，测试液为流动相，荧光标记抗体或抗原固定于连接垫，通过毛细管作用使待分析物在层析条上移动。对于带有多个抗原决定簇的大分子抗原(蛋白、病毒、致病菌等)，通常采用“三明治”型双抗夹心免疫层析方法，即待测物在流动相作用下先与荧光标记抗体结合，当到达检测线时再与包被抗体结合形成双抗夹心的“三明治”型。对于只具有单一抗原表位的小分子抗原(农兽药、违禁药物等)，待测小分子抗原与荧光标记抗体结合后，由于空间位阻作用难以再与检测线上的包被抗体结合。所以，具有单一抗原表位的小分子待测物多采用竞争免疫
层析法检测。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于解决上述现有技术存在的缺陷，提供类夜明珠发光特性的检测系统及配套检测试纸的制备方法。
[0006]本专利技术采用如下技术方案：
[0007]水溶性类夜明珠发光材料的制备方法，包括如下步骤：
[0008]步骤1.将10份类夜明珠材料9,9'
‑
(2,5
‑
二溴
‑
1,4
‑
苯撑)双[9H咔唑]，2份表面活性剂聚乙烯吡络烷酮，1份羧甲基纤维素混合；
[0009]步骤2.并向步骤1中加入水与四氢呋喃的共混体系，水的体积分数为85％；
[0010]步骤3.用细胞破碎机在70℃的水浴环境中对其超声120分钟，工作时间：2s；暂停时间：2s；超声功率：240w；
[0011]步骤4.将所得的溶液反复离心清洗后重悬于适量的去离子水，再用细胞破碎仪超声细乳化30分钟，工作时间：2s；暂停时间：4s；超声功率40w。
[0012]类夜明珠发光特性试纸制备方法，包括如下步骤：
[0013]从上述制备(水溶性类夜明珠发光材料)的溶液中取3mg类夜明珠发光材料于离心管中；并加入适量MES溶液至总体积为1mL；用冷冻离心机离心，离心机工作时间8分钟，工作温度4℃，离心转速12000rmp；
[0014]步骤2.离心完成后倒去离心管中的上清液，并加入1mLMES，用超声波细胞粉碎机超声1分钟，工作时间：2s；暂停时间：2s；超声功率：240W；
[0015]步骤3.超声后向步骤2中加入1.5mgEDC、1.2mgNHS，然后将离心管放于转盘式混匀器上转动1h；转完1h后，用冷冻离心机离心，(工作时间8分钟，工作温度4℃，离心转速12000rmp)，离心后倒去上清液，然后加入1mL的PBS，用超声波细胞粉碎机超声1分钟，工作时间：2s；暂停时间：2s；超声功率：240W，然后取0.5mg待标记的蛋白质加入离心管中，放于转盘式混匀器上转动2h；
[0016]步骤4.转完后用冷冻离心机离心，(工作时间8分钟，工作温度4℃，离心转速12000rmp)；离心后倒去上清液，然后加入1mL的PBS，用超声波细胞粉碎机超声1分钟，工作时间：2s；暂停时间：2s；超声功率：240W，然后加入100uL的含10％BSA的PBS溶液，放于转盘式混匀器上转动1h；
[0017]步骤5.转完1h，用冷冻离心机离心，(工作时间8分钟，工作温度4℃，离心转速12000rmp)，离心后倒去上清液，然后加入1mL的含1％BSA的水溶液，用超声波细胞粉碎机超声1分钟，工作时间：2s；暂停时间：2s；超声功率：240W，完成标记溶液的制备；
[0018]步骤6.用三维划膜喷金仪将标记溶液在玻纤上进行喷金；喷金完成后，将玻纤放入电热鼓风干燥箱烘干，37℃过夜；
[0019]步骤7.将吸水纸、NC膜分别贴在底卡上，并用三维划膜喷金仪在NC膜上用抗体和二抗进行划线，划线完成后，将底卡放入干燥箱烘干，37℃过夜；将烘干的玻纤贴在底卡上，并用试纸数量拆切机将底卡切成试纸条。
[0020]类夜明珠发光特性检测系统，由上壳体、主控板、硅光电池、激发光源、触发开关、显示屏、底壳组成，上壳体安装在底壳上，显示屏安装在上壳体上，底壳上具有检测卡插口。
主控板安装于底壳底部，硅光电池安装在主控板上部，激发光源安装在硅光电池的侧面，主控板通过触发开关与激发光源相连接、主控板与硅光电池相连接，触发开关安装在主控板的上侧，位于检测卡插口相对的另一侧，显示屏位于上壳体上。
[0021]当有检测卡插入触发开关即系统进入检测状态，主控板控制激发光源发光、获取硅光电池的信号，然后通过信号放大、AD转换、MCU处理，最后显示在显示屏上。所有的状态、结果通过显示屏进行显示。
[0022]类夜明珠发光特性检测卡，检测卡，由试纸条、上卡壳、下卡本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.类夜明珠发光特性试纸的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1.制备得到水溶性类夜明珠发光材料；步骤1.将200mg类夜明珠材料9,9'
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(2,5
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二溴
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1,4
‑
苯撑)双[9H咔唑]，40mg表面活性剂聚乙烯吡络烷酮，20mg羧甲基纤维素混合；步骤2.并向步骤1中加入水与四氢呋喃的共混体系12mL，水的体积分数为85％；步骤3.用细胞破碎机在70℃的水浴环境中对其超声120分钟，工作时间：2s；暂停时间：2s；超声功率：240w；步骤4.将所得的溶液反复离心清洗后重悬于适量的去离子水，再用细胞破碎仪超声细乳化30分钟，工作时间：2s；暂停时间：4s；超声功率40w；步骤S2.制备类夜明珠发光特性检测试纸；步骤1.从S1中取3mg类夜明珠发光材料于离心管中；并加入适量MES溶液至总体积为1mL；用冷冻离心机离心，离心机工作时间8min，工作温度4℃，工作速率12000rmp；步骤2.离心完成后倒去离心管中的上清液，并加入1mLMES溶液，用超声波细胞粉碎机超声1分钟，工作时间：2s；暂停时间：2s；超声功率：240W；步骤3.超声后向步骤2中加入1.5mgEDC、1.2mgNHS，然后将离心管放于转盘式混匀器上转动1h；转完1h后，用冷冻离心机离心，工作时间8min，工作温度4℃，工作速率12000rmp，离心后倒去上清液，然后加入1mL的PBS，用超声波细胞粉碎机超声1分钟，工作时间：2s；暂停时间：2s；超声功率：240W，然后取0.5mg待标记的蛋白质加入离心管中，放于转盘式混匀器上转动2h；步骤4.转完后用冷冻离心机离心，工作时间8min，工作温度4℃，工作速率12000rmp；离心后倒...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭九川，马星，郭劲宏，
申请(专利权)人：成都云芯医联科技有限公司，
类型：发明
国别省市：