一种同步测定细菌多糖中多糖和磷含量的定量核磁方法技术

本发明专利技术公开了一种同步测定细菌多糖中多糖和磷含量的定量核磁方法，属于医药工程领域。本发明专利技术以六甲基磷酰三胺作为定量1H

【技术实现步骤摘要】
一种同步测定细菌多糖中多糖和磷含量的定量核磁方法


[0001]本专利技术涉及一种同步测定细菌多糖中多糖和磷含量的定量核磁方法，属于医药工程


技术介绍

[0002]细菌性感染引起的肺炎和脑膜炎是威胁婴幼儿生命健康的严重疾病，流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)和肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)是引起相关疾病的主要致病菌。根据产生荚膜的情况，流感嗜血杆菌可分为产荚膜的6种血清型(a
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f型)菌株和不产荚膜的不可分型菌株，而侵袭性感染主要由产荚膜的菌株引起。b型流感嗜血杆菌(Hib)是最主要的致病亚型，其引起的脑膜炎致死率高达5
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10％，且约30％治愈者存在中枢神经系统缺陷。根据产生荚膜的情况，肺炎链球菌可分为97种血清型菌株，其中1，2，3，4，5，6A，6B，7F，8，9N，9V，10A，11A，12F，14，15B，17F，18C，19A，19F，20，22F，23F和33F这24种血清型涵盖引起婴幼儿重症肺炎的90％以上临床病例。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种同步测定细菌多糖中多糖和磷含量的定量核磁方法，其特征在于，利用六甲基磷酰三胺作为单一内标，包括如下过程：(1)以六甲基磷酰三胺作为单一内标物，溶于氘代水中配制得到内标溶液；(2)将细菌多糖样品加入到内标溶液中，获得检测样液；(3)将检测样液装入核磁管中进行核磁检测，测得1H
‑
NMR图谱、
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P
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NMR图谱；然后通过细菌多糖的1H
‑
NMR特征峰的积分与内标物的1H
‑
NMR特征峰的积分进行关联换算，测得细菌多糖中多糖含量；同时，通过细菌多糖的
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P
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NMR特征峰的积分相应与内标物的
31
P
‑
NMR特征峰的积分进行关联换算，测得细菌多糖中磷含量。2.根据权利要求1所述的定量核磁方法，其特征在于，细菌多糖包括b型流感嗜血杆菌荚膜多糖、6A型肺炎链球菌荚膜多糖、6B型肺炎链球菌荚膜多糖、10A型肺炎链球菌荚膜多糖、11A型肺炎链球菌荚膜多糖、17F型肺炎链球菌荚膜多糖、18C型肺炎链球菌荚膜多糖、19A型肺炎链球菌荚膜多糖、19F型肺炎链球菌荚膜多糖、20型肺炎链球菌荚膜多糖、23F型肺炎链球菌荚膜多糖型肺炎链球菌荚膜多糖，以及上述多糖的降解物。3.根据权利要求1所述的定量核磁方法，其特征在于，内标物的1H
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NMR特征峰的积分的范围为2.65
‑
2.53ppm。4.根据权利要求1
‑
3任一项所述的定量核磁方法，其特征在于，细菌多糖的1H
‑
NMR特征峰的积分包括：细菌多糖为b型流感嗜血杆菌荚膜多糖时，1H
‑
NM特征峰的积分的范围为4.27
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4.20ppm；或者，细菌多糖为6A型肺炎链球菌荚膜多糖时，1H
‑
NMR特征峰的积分的范围为5.74
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5.56ppm；或者，细菌多糖为6B型肺炎链球菌荚膜多糖时，1H
‑
NMR特征峰的积分的范围为5.74
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5.56ppm；或者，细菌多糖为18C型肺炎链球菌荚膜多糖时，1H
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NMR特征峰的积分的范围为1.70
‑
0.9...

【专利技术属性】
技术研发人员：尹健，胡静，刘建凯，佟巍，秦春君，
申请(专利权)人：北京民海生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：