一种T细胞受体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种T细胞受体(T cell receptor，TCR)及其应用，该TCR能够与CT83抗原短肽CT83

【技术实现步骤摘要】
一种T细胞受体及其应用


[0001]本专利技术涉及免疫治疗
，具体地，涉及一种T细胞受体(TCR)及其应用。

技术介绍

[0002]睾丸抗原83(CT83)作为一种内源性蛋白质，在各种恶性肿瘤细胞均有高表达，属于癌症睾丸抗原类。CT83在细胞内生成后被降解成长短不一的小分子短肽，其中能够与HLA分子结合的短肽，与之形成复合物，被转运呈递到细胞表面。CT83最早是由Fukuyama等人于2006年发现的[FUKUYAMA T,HANAGIRI T,TAKENOYAMA M,et al.Identification of a new cancer/germLine gene,CT83,encoding an antigen recognized by autologous CTL induced on human lung adenocarcinoma.Cancer research,2006,66(9)：4922
‑
8.]；以后陆续有研究表明CT83在81％胃癌[Shida A,Futawatari N,Fukuyama T,et al.Frequent High Expression of Kita
‑
Kyushu Lung Cancer Antigen
‑
1(KK
‑
LC
‑
1)in Gastric Cancer.Anticancer Res.2015；35(6)：3575
‑
3579.]，53％三阴性乳腺癌[Paret C,Simon P,Vormbrock K,et al.CXorf61 is a target for T cell based immunotherapy of triple
‑
negative breast cancer.Oncotarget.2015；6(28)：25356
‑
25367.]，40％转移性宫颈癌和40％非小细胞肺癌[S,Pasetto A,Helman SR,et al.Landscape of immunogenic tumor antigens in successful immunotherapy of virally induced epithelial cancer.Science.2017；356(6334)：200
‑
205.]中表达，但不在除睾丸外的正常组织中表达，这表明它可能作为T细胞免疫治疗的安全靶点。
[0003]目前，对于上述疾病的治疗，可以采用化疗和放射性治疗等方法，但都会对自身的正常细胞造成损害。细胞过继免疫治疗指的是，体外活化和扩增的自体或异体免疫效应细胞输注患者体内的治疗方法，该方法对于患者的自身的正常细胞不会严重的损害。因此进行细胞过继免疫治疗的十分必要。
[0004]T细胞过继免疫治疗是将对靶抗原具有特异性的T细胞输入病人体内，使其对靶细胞发挥杀伤作用。T细胞受体(TCR)是T细胞表面的一种膜蛋白，其能够识别靶细胞表面的抗原短肽/MHC复合物(pMHC复合物)。在免疫系统中，通过特异性的TCR与pMHC复合物的结合引发T细胞与抗原提呈细胞(antigen
‑
presenting cells，APC)直接的物理接触，然后T细胞及APC两者的其他细胞膜表面分子就会发生相互作用，导致T细胞活化，从而引起一系列后续的细胞内信号传递和反应。活化的T细胞进入增生状态，进而分化为效应细胞与记忆细胞。当这些抗原特异性T细胞，再次遇到抗原阳性同时表达对应MHC分子的靶细胞(如癌症细胞)时，会对靶细胞产生杀伤作用，从而产生抗癌效果。因此，我们致力于分离出对CT83抗原短肽具有特异性的T细胞，进而分离对CT83抗原短肽具有特异性的TCR，以便用该TCR转导外周血T细胞，从而大量产生对CT83短肽具有特异性的T细胞，进而用于癌症的过继T细胞免疫治疗。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是为了克服现有技术的上述不足，建立一种精准肿瘤免疫治疗新技术，专利技术TCR
‑
T抗癌原创细胞药，因此，提供一种T细胞受体及其应用，该T细胞受体具有抗癌的作用。
[0006]本专利技术的第一个目的是提供一种T细胞受体。
[0007]本专利技术的第二个目的是提供一种核酸分子。
[0008]本专利技术的第三个目的是提供一种表达载体。
[0009]本专利技术的第四个目的是提供一种宿主细胞。
[0010]本专利技术的第五个目的是提供中任一项所述的T细胞受体，所述的核酸分子、任一项所述的表达载体，或权利要求所述的宿主细胞，在制备治疗疾病的药物中的应用。
[0011]为了实现上述目的，本专利技术是通过以下方案予以实现的：
[0012]本专利技术人经过实验研究，成功分离得到了能够与CT83癌症睾丸抗原表位CT83
14
‑
22
(ALIVFWKYR，氨基端酸序列如SEQ IN NO：9所示)特异性结合的TCR基因(命名为TCR3851
CT83
)，其能够与被呈递到细胞表面的CT83
14
‑
22
/HLA
‑
A*11：01复合物特异性结合。进一步还提供了编码所述TCR的核酸分子以及包含所述核酸分子的载体，以及转导本专利技术TCR的细胞(体外扩增的原代T细胞)。
[0013]因此本专利技术要求保护以下内容：
[0014]一种T细胞受体(TCR)，所述T细胞受体包含TCRα链和TCRβ链；
[0015]其中，TCRα链的可变域的αCDR1、αCDR2、αCDR3氨基酸序列分别如SEQ ID NO：10～12所示；TCRβ链的可变域的βCDR1、βCDR2、βCDR3氨基酸序列分别如SEQ ID NO：13～15所示。
[0016]本专利技术的TCR分子是由α与β链构成的异二聚体，α与β链均包括可变域和恒定域。
[0017]具体地，其中，所述TCRα链可变域的3个互补决定区(CDR)为：
[0018]αCDR1：TSESDYY(氨基酸序列如SEQ ID NO：10所示)，
[0019]αCDR2：QEAYKQQN(氨基酸序列如SEQ ID NO：11所示)，
[0020]αCDR3：CAYRSFRQDSGNTPLVF(氨基酸序列如SEQ ID NO：12所示)；
[0021]所述TCRβ链可变域的3个互补决定区(CDR)为：
[0022]βCDR1：SGHRS(氨基酸序列如SEQ ID NO：13所示)，
[0023]βCDR2：YFSETQ(氨基酸序列如SEQ ID NO：14所示)，
[0024]βCDR3：CKNSRTNYGYTF(氨基酸序列如SEQ ID NO：15所示)。
[0025]优选地，所述TCR分子是分离的或纯化的。
[0026]优选地，T细胞受体具有结合CT8本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种T细胞受体，其特征在于，所述T细胞受体包含TCRα链和TCRβ链；其中，TCRα链可变域αCDR1、αCDR2、αCDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO：10～12所示；TCRβ链可变域βCDR1、βCDR2、βCDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO：13～15所示。2.根据权利要求1所述的，其特征在于，其具有结合CT83抗原短肽CT83
14
‑
22
/HLA
‑
A*11：01复合物的性质，其中所述CT83抗原短肽CT83
14
‑
22
氨基酸序列如SEQ ID NO：9所示。3.根据权利要求1或2所述的T细胞受体，其特征在于，TCRα链可变域的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。4.根据权利要求3所述的T细胞受体，其特征在于，TCRα链的氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示。5.根据权利要求1或2所述的T细胞受体，其特征在于，TCRβ链可变域的氨基酸序列如SEQ ID NO：5所示。6.根据权利要求5所述的T细胞受体，其特征在于，TCRβ链的氨基酸序列如SEQ ID NO：7所示。7.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码包含权利要求1～6任一项所述的T细胞受体的核苷酸序列，或其互补序列。8.根据权利要求7所述的核酸分子，其特征在于，所述核苷酸分子包含SEQ ID NO：2...

【专利技术属性】
技术研发人员：李亮平，李清扬，
申请(专利权)人：暨南大学，
类型：发明
国别省市：