一种肽及其制备方法技术

本发明专利技术提供了一种肽，所述的肽的氨基酸序列具有以下通式：X1GX2X3X4X5X6X7APIIVX8X9X

【技术实现步骤摘要】
一种肽及其制备方法


[0001]本专利技术属于基因工程领域，具体涉及一种肽及其制备方法。

技术介绍

[0002]细菌可侵入宿主体内并引起各种病理变化，可导致发热、局部脓肿、发言等症状。目前对于细菌感染的应对方法一般采用抗菌药物治疗，其中抗生素是较为普遍且有效的治疗方法。但旺盛的抗生素需求导致当前滥用抗生素的情况非常严重，可导致其药效降低，从而影响治疗效果。
[0003]炎症反应是临床常见的一个病理过程，可以发生于机体各部位的组织和各器官。当机体细胞受到刺激时会产生各种炎症因子，主要有肿瘤坏死因子
‑
α(TNF
‑
α)、白介素
‑
1β(IL
‑
1β)、白介素
‑
6(IL
‑
6)、转化生长因子
‑
β(TGF
‑
β)等。
[0004]能够起抗菌作用的多肽，具有杀菌快速、抗菌谱广、毒副作用小、无免疫原性等优点。并且，由于其特殊的杀菌机理，被抑制或杀灭的病原性微生物不会产生抗性菌株，不会由于耐药性而减弱杀灭细菌的作用。
[0005]中国专利202110720025.9中公开了本专利技术公开了一种水貂蛙抗菌肽的制备方法及其应用，属于生物工程
，包括以下步骤：所述水貂蛙抗菌肽为[D4K]B2RP，并在该序列的3
′
端加入氨基酸形成[D4K]B2RPR，将[D4K]B2RPR与[D4K]B2RPR之间通过Gly和Arg连接，进行多次重复串联，形成抗菌肽多聚体[D4K]B2RPRM；将所述抗菌肽多聚体[D4K]B2RPRM连接至PGEX
‑
4T
‑
2载体上，并与PGEX
‑
4T
‑
2载体自带的融合蛋白GST标签进行融合表达出抗菌肽多聚体融合蛋白；上GST标签亲和层析柱，去除GST标签，得到抗菌肽单体[D4K]B2RPR。通过该制备方法能够大大提高抗菌肽的产量。但其制备方法操作繁琐。
[0006]中国专利202011280998.7中公开了一种抗菌肽及其药物组合物以及应用，所述抗菌肽包括：抗菌肽1、抗菌肽2、抗菌肽3中的任意一种。三种抗菌肽均是以天然抗菌肽PGLa
‑
AM1为基础进行改造而成，具有抗菌效果更强、性能更优的特点。这三种抗菌肽对幽门螺杆菌的抑制效果均强于PGLa
‑
AM1，其中抗菌肽3的广谱抗菌效果最强，并且具有很好的pH响应性，从而更好的与幽门螺杆菌接触，抑制幽门螺杆菌生长。根据本专利技术提供的三种抗菌肽均具有强抑菌活性、生物相容性、及低成本的优点，有望被广泛应用。
[0007]但现有技术中的起抗菌作用的多肽往往功能较为单一，有进一步优化的空间。

技术实现思路

[0008]为了解决上述问题，本专利技术提供了一种肽的表达基因，用以表达具有抑菌和消炎效果的肽，该肽特殊的结构还可以有效的结合炎症因子，阻断炎症的进程，快速消除炎症带来的组织红肿疼痛。
[0009]一方面，本专利技术提供了一种肽。
[0010]所述的肽的氨基酸序列具有以下通式：
[0011]X1GX2X3X4X5X6X7APIIVX8X9X
10
RX
11
S；
[0012]其中X1为M或无；
[0013]X2为GH、GK、SH、SK中的一种；
[0014]X3为RR、HH中的一种；
[0015]X4为KK、HH中的一种；
[0016]X5为RR、HH中的一种；
[0017]X6为HR、KR、KH中的一种；
[0018]X7为R、H中的一种；
[0019]X8为KK、HH、LE中的一种；
[0020]X9为H或无；
[0021]X
10
为L、H中的一种或无。
[0022]优选地，所述的肽的氨基酸序列氨基酸序列选自SEQ ID NO.1
‑
5。
[0023]另一方面，本专利技术提供了一种编码肽的基因。
[0024]所述的基因编码前述的肽。
[0025]优选地，所述的基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.6或与SEQ ID NO.6具有80％以上同一性的序列。
[0026]再一方面，本专利技术提供了一种载体。
[0027]所述的载体为基因工程载体，所述的载体上插入前述的基因。
[0028]优选地，所述的载体骨架为pET
‑
28a载体。
[0029]优选地，插入载体的酶切位点为限制性内切酶NcoI和XhoI。
[0030]又一方面，本专利技术提供了一种细胞。
[0031]所述的细胞为基因工程细胞。
[0032]所述的细胞中包括前述的载体；
[0033]或所述的细胞表达前述的肽。
[0034]又一方面，本专利技术提供了一种肽的制备方法。
[0035]所述的制备方法中包括通过基因工程手段表达前述的肽。
[0036]所述的制备方法中包括将前述的基因通过基因工程手段进行表达。
[0037]所述的生物工程手段为通过基因工程载体转导表达细胞并表达肽。
[0038]所述的基因工程载体上插入前述的表达肽的基因。
[0039]又一方面，本专利技术提供了前述的基因和/或肽和/或载体和/或细胞在制备抗菌产品中的应用。
[0040]又一方面，本专利技术提供了前述的基因和/或肽和/或载体和/或细胞在制备消炎产品中的应用。
[0041]又一方面，本专利技术提供了前述的制备方法在制备抗菌产品或消炎产品中的应用。
[0042]所述的应用为先通过前述的制备方法制备肽，再将肽加入抗菌产品或消炎产品中。
[0043]又一方面，本专利技术提供了一种抗菌剂。
[0044]所述的抗菌剂中包括前述的的表达肽的基因和/或肽和/或载体和/或细胞。
[0045]又一方面，本专利技术提供了一种治疗和/或预防细菌和/或真菌感染的药物。
[0046]所述的药物中包括前述的抗菌剂；
[0047]或者所述的药物中包括前述的的表达肽的基因和/或肽和/或载体和/或细胞。
[0048]所述的细菌或真菌为革兰氏阴性菌和/或革兰氏阳性菌。
[0049]所述的细菌或真菌为大肠杆菌或白色念珠菌。
[0050]又一方面，本专利技术提供了一种消炎药物，其特征在于，包括前述的的表达肽的基因和/或肽和/或载体和/或细胞。
[0051]有益效果：
[0052](1)本专利技术提供的表达肽的基因表达得到的肽对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均有较好的抑制效果，并伴有一定的消炎作用。
[0053](2)本专利技术提供的基因序列的表达效率高。
附图说明
[0054]图1为候选多肽溶血性检测。
[0055]图2为重组细胞表达量检测图；图中左1条带为marker，左2条带为空白样品本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种肽，其特征在于，所述的肽的氨基酸序列具有以下通式：X1GX3X4X5X6X7X8X9X
10
X
11
X
12
APIIVX
18
X
19
X
20
X
21
RX
23
S；其中X1为M或无；X3为G、S中的一种；X4、X7、X8、X
11
为H、K中的一种；X5、X6、X9、X
10
、X
12
、X
18
为R、H中的一种；X
19
为H、K、L中的一种；X
20
为H、K、E中的一种；X
21
为H或无；X
23
为L、H或无。2.根据权利要求1所述的肽，其特征在于，氨基酸序列选自SEQ ID NO.1
‑
5。3.一种基因，其特征在于，所述的基因编码权利要求1所述的肽。4.根据权利要求3所述的基因，其特征在于，核苷酸序列为SEQ ID NO.6或与SEQ ID NO.6具有80％以上同一性的序列。5.一种载体，其特征在于，所述的载体为基因工程载体，所述的载体上插入权利要求3所述的基因。6.一种细胞，其特征在于，所述的细胞为基因工程细胞，所述的细胞中包括权利要求5所述的载体。7.一种肽的制备方法，其特征在于，所述的制备方法中包括通过基因工程手段表达权利要求1所述的肽。8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述的基因工程手段为通过基因工程载体转导表达细胞并表达肽。9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：张剑，丁德军，
申请(专利权)人：杭州吉越生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：