一种维纳卡兰有关物质的分析方法技术

本发明专利技术公开了一种盐酸维纳卡兰中间体的对映异构体的分离与分析测定方法，选用硅胶表面共价键合有纤维素

【技术实现步骤摘要】
一种维纳卡兰有关物质的分析方法


[0001]本专利技术涉及一种高效液相色谱法，尤其涉及是一种拆分盐酸维纳卡兰中间体的对映异构体的手性拆分方法，本专利技术属于化学分析领域。

技术介绍

[0002]盐酸维纳卡兰(vernakalant hydrochloride)，[CAS：748810
‑
28
‑
8化学名为(3R)
‑1‑
[(1R,2R)
‑2‑
[2
‑
(3,4
‑
二甲氧基苯基)乙氧基]环己基]‑3‑
吡咯烷醇盐酸盐]，化学结构式如下：
[0003][0004]维纳卡兰是一种新型的心房选择性的III类抗心律失常药物。由加拿大CardionmePharma制药公司和美国Astellas Pharma制药公司共同研制开发，作用机制是在心房颤动发作期选择性地阻滞心房的钠和钾(IKur)离子通道，抑制IKur电流能延长心房的动作电位时程，降低发生心律失常的危险。从现有的数据来看，在转复新近发生的心房颤动上它显示良好的有效性和安全性，疗效好于胺碘酮，临床上用于治疗心房纤维性颤动。
[0005]维纳卡兰及其中间体可通过文献中公开的方法合成：
[0006][0007]维纳卡兰及其中间体A4有多个手性碳原子，存在着多种对映异构体。由于细胞表达的不同，使得盐酸维纳卡兰对映体在药代动力学方面存在着显著的差异。将其对映异构体有效的检测或分离除去，是维纳卡兰研发过程中质量控制中的难点。因此，建立一种好的分离维纳卡兰或中间体的对映异构体的高效液相色谱方法，具有重要的应用价值。一是为合成、分离纯化的工艺改进提供依据；二是为制剂质量提供依据；三是用于探讨对映体在动物或人体内的转化或代谢规律，为临床合理用药提供依据。
[0008]迄今为止，对于分离或检测维纳卡兰或其中间体的光学异构体，还没有文献报道。
[0009]维纳卡兰中间体A4如式(III)所示，由于含有手性中心，存在着多种对映异构体，其中一种光学异构体如式(IV)所示，由于结构相近，在检测和分离方面存在较大的难度。
[0010][0011]药物的研发过程中，为保证药物的安全有效，需要对药物原料及其制剂中的杂质进行研究、检测和监控。药品在临床使用过程中产生的不良反应除了与主成分的药理活性有关，与杂质的影响也密不可分。为保证临床安全用药，必须严格控制药品中的杂质含量。

技术实现思路

[0012]本专利申请的专利技术人发现了一种高效液相色谱法，可以将维纳卡兰中间体A4的对映异构体进行有效分离。本专利技术方法操作简便、成本低廉，能简单、快速、准确地拆分维纳卡兰中间体A4的对映异构体。
[0013]本专利技术的目的在于提供一种既简便又快速的拆分维纳卡兰中间体A4的对映异构体的高效液相色谱方法，从而实现式(III)所示的维纳卡兰中间体A4的与式(IV)所示的维纳卡兰中间体A4对应异构体的有效分离与准确测定。
[0014]具体地说，在本专利技术的一种实施方案中，提供了一种维纳卡兰有关物质的分析方法，其特征在于，采用高效液相色谱法，将待测物在纤维类手性柱中进行洗脱；所述的纤维类手性柱优选为纤维素
‑
三(3,5
‑
二氯苯基氨基甲酸酯)手性柱；
[0015]所述待测物是包含以下式(I)的化合物和/或其对映异构体式(II)
[0016][0017]其中R各自独立地选自氢原子、C1‑3烷基、C1‑3烷氧基、羟基、氨基、巯基、羰基、醛基、羧基、硝基、氰基、酯基、酰胺基、卤素、C1‑3卤代烷基、磺酰基、磺酸基、季铵基；
[0018]优选的，所述待测物是包含式(III)的维纳卡兰中间体A4和/或维纳卡兰中间体A4的对映异构体式(IV)：
[0019][0020]在本专利技术提供的一种实施方案中，一种维纳卡兰有关物质的分析方法，以正己烷
‑
醇类溶剂
‑
酸类溶剂的混合溶剂为流动相，所述醇类溶剂选自无水甲醇、无水乙醇、乙醇
‑
异丙醇、异丙醇中的一种或多种；优选为无水乙醇；所述酸类溶剂选自冰醋酸、三氟乙酸、甲酸中的一种或多种，优选为三氟乙酸。
[0021]在本专利技术提供的一种实施方案中，所述纤维素
‑
三(3,5
‑
二氯苯基氨基甲酸酯)手性柱为DAICEL优选的，所述DAICEL的长度是50mm
‑
300mm，进一步优选的，为250mm；所述的粒径为1μm
‑
10μm，优选的为3μm；更优选的，所述DAICEL为4.6mm
×
250mm，3μm。
[0022]在本专利技术提供的一种实施方案中，所述正己烷
‑
醇类溶剂
‑
酸类溶剂的混合溶剂为流动相的体积比为85：15～95：5：0.5；优选为85：15：0.08～95：5：0.12，进一步优选为85：15：0.1～95：5：0.1；流速为0.5
‑
1.2ml/min，进一步优选为0.8
‑
1.1ml/min，最优选为1.0ml/min。
[0023]本专利技术提供的一种实施方案中，所述正己烷
‑
醇类溶剂
‑
酸类溶剂的混合溶剂为流动相是正己烷
‑
无水乙醇
‑
三氟乙酸的混合溶剂；所述正己烷
‑
无水乙醇
‑
三氟乙酸的混合溶剂的体积比为86:14:0.1；和/或，流速为1.0mL/min。
[0024]关于维纳卡兰中间体A4及其对映异构体的拆分无现有技术报道。本专利技术通过大量的实验摸索发现，采用常规填料的手性分离柱均难以实现维纳卡兰中间体A4及其对映异构体的完全分离并获得良好的峰形，尤其是方法的运行时间较短时，对映异构体的完全拆分存在较大的难度。再者，在采用本专利技术所使用的特定手性分离柱条件下，如果流动相组成和配比不在所选范围内，也难以有效的分离，充分说明本专利技术选择存在明显的特异性。
[0025]在本专利技术提供的一种实施方案中，提供了一种高效液相色谱拆分和定量维纳卡兰中间体A4的对映异构体的方法，包括如下步骤：
[0026](1)取维纳卡兰中间体A4样品适量，用流动相溶解并定量稀释制成每1ml约含维纳卡兰中间体A4样品0.2mg的供试品溶液；精密量取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。
[0027](2)设置流动相流速为0.5
‑
1.2ml/min，优选1.0ml/min，检测波长为210
±
2nm，优选210nm，柱温：25～35℃，优选30℃；
[0028](3)取步骤(1)的样品溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。
[0029]其中，所述的液相色谱仪为高效液相色谱仪，可选用沃特世e2695高效液相色谱仪；
[0030]其中，色本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种维纳卡兰有关物质的分析方法，其特征在于，采用高效液相色谱法，将待测物在纤维类手性柱中进行洗脱；所述的纤维类手性柱优选为纤维素
‑
三(3,5
‑
二氯苯基氨基甲酸酯)手性柱；所述待测物是包含以下式(I)的化合物和/或其对映异构体式(II)其中R各自独立地选自氢原子、C1‑3烷基、C1‑3烷氧基、羟基、氨基、巯基、羰基、醛基、羧基、硝基、氰基、酯基、酰胺基、卤素、C1‑3卤代烷基、磺酰基、磺酸基、季铵基；优选的，所述待测物是包含式(III)的维纳卡兰中间体A4和/或式(IV)的维纳卡兰中间体A4的对映异构体：2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，以正己烷
‑
醇类溶剂
‑
酸类溶剂的混合溶剂为流动相，所述醇类溶剂选自无水甲醇、无水乙醇、乙醇
‑
异丙醇、异丙醇中的一种或多种；优选为无水乙醇；所述酸类溶剂选自冰醋酸、三氟乙酸、甲酸中的一种或多种，优选为三氟乙酸。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述纤维素
‑
三(3,5
‑
二氯苯基氨基甲酸酯)手性柱为DAICEL IC
‑
3，优选的，所述DAICELIC
‑
3的长度是50mm
‑
300mm，进一步优选的，为250mm；所述IC
‑
3的粒径为1μm
‑
10μm，优选的为3μm；更优选的，所述DAICELIC
‑
3为4.6mm
×
250mm，3μm；和/或，所述正己烷
‑
醇类溶剂
‑
酸类溶剂的混合溶剂为流动相的体积比为85：15～95：5：0.5；优选为85：15：0.08～95：5：0.12，进一步优选为85：15：0.1～95：5：0.1；和/或，流速为0.5
‑...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨易可，周洁，康文瑞，梁屹，
申请(专利权)人：上海旭东海普药业有限公司，
类型：发明
国别省市：