一种用于检测JPH3基因的引物对、试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术涉及分子生物学领域，具体涉及一种用于检测JPH3基因的引物对、试剂盒及检测方法；引物对的正向引物的5

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测JPH3基因的引物对、试剂盒及检测方法


[0001]本专利技术涉及分子生物学领域，具体涉及一种用于检测JPH3基因的引物对、试剂盒及检测方法。

技术介绍

[0002]亨廷顿病样2(Huntington Disease
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like 2,HDL2)是一种类似于亨廷顿病(Huntington Disease,HD)的神经退行性疾病，其临床表型、遗传特征、神经病理学和发展均与HD相似。亨廷顿病样2(HDL2)通常出现在中年，伴有持续的运动、情绪和认知异常三联征。神经系统异常包括舞蹈病、运动减退(僵直、运动迟缓)、构音障碍和后期反射亢进，在疾病的持续时间和运动和认知障碍的进展之间有很强的相关性，会导致10至20年内死亡。
[0003]在HDL2相关的IPH3基因中CTG会出现大约大于40个三碱基CTG重复扩增。但目前对IPH3基因中CTG重复状况并没有适配分析方法，所以需要设计新的检测方法对CTG重复状况进行分析，以便对IPH3基因进行分析。

技术实现思路

[0004]针对上述现有技术的不足，本专利技本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于检测JPH3基因CTG重复序列动态突变的引物对，其特征在于，所述引物对的正向引物的5
’
端和反向引物的5
’
端中的至少一端由荧光基团标记，所述引物对序列如下：JPH3
‑
famF：GGCAGAGCCGGGGCCGG；JPH3
‑
R：GGTTCCCTGCACAGAAACCATC。2.根据权利要求1所述用于检测JPH3基因CTG重复序列动态突变的引物对，其特征在于，所述引物对famF向引物5
’
端带5
’‑
FAM荧光基团。3.一种用于检测JPH3基因CTG重复序列动态突变的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求1所述的引物对。4.根据权利要求3所述用于检测JPH3基因CTG重复序列动态突变的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括25体积份的2xGoldStar Best MasterMix、2.4体积份的DMSO、13.6体积份的无核酸酶纯化水和4体积份权利要求1所述的引物对。5.一种检测JPH3基因CTG重复序列动态突变的非诊断目的的检测方法，其特征在于，包括：1)提取DNA并利用权利要求1所述的引物对进行PCR扩增；2)对所述步骤1)PCR扩增后的产物进行毛细管电泳；3)分析JPH3基因中CTG重复情况。6.根据权利要求5所述检测JPH3基因CTG重复序列动态突变的非诊断目的的检测方法，其特征在于，所述步骤1)PCR扩增包括：按DNA检测样本数量配置扩增反应液混合液，所述扩增反应液混合液中：2
×
GoldStar Best Master Mix试剂用量25
×
nμl；10uM的JPH3
‑
famF引物用量2
×
nμl；10uM的JPH3
‑
R引物用量2
×
nμl；DMSO用量2.4
×
nμl；ddH2O用量13.6
×
nμl；所述n＝检测样本数+1；按45ul扩增反应混合液中加入5ulDNA；进行PCR扩增。7.根据权利要求6所述检测JPH3基因CTG重复序列动态突变的非诊断目的的检测方法，其特征在于，所述PCR扩增包括：在PCR仪中先以95℃变性1分钟；再运行35次如下循环：94℃变性30秒、59℃退火30...

【专利技术属性】
技术研发人员：伍建，姬晓雯，武璇，
申请(专利权)人：迈基诺重庆基因科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：