一种瞬时转化提高苹果砧木绿枝扦插生根的方法技术

本发明专利技术公开了一种基于瞬时转化提高苹果砧木绿枝扦插生根的方法，涉及苹果砧木绿枝扦插生根技术领域。本发明专利技术瞬时转化提高苹果砧木扦插生根的方法包括以下步骤：(1)构建35S:MdMIR156a6过表达载体，转化农杆菌(GV3101)；(2)苹果绿枝插穗的选取制作及预侵染的培养液；(3)设置菌液OD600浓度为0.6，抽真空压强为0.8Mpa，时间为5min。本发明专利技术通过以农杆菌(GV3101菌株)携带35S:MdMIR156a6表达载体通过抽真空的方式，实现了瞬时转化苹果成龄期砧木小金海棠当年生新捎茎皮，从而提高其绿枝扦插生根率，本发明专利技术通过使用阿司匹林溶液的浸泡，实现了对绿枝扦插的发芽率提高，从而能够能大幅缩短缓苗期，防止苗木干枯，提高苗木的成活率。成活率。成活率。

【技术实现步骤摘要】
一种瞬时转化提高苹果砧木绿枝扦插生根的方法


[0001]本专利技术属于苹果砧木绿枝扦插生根
，特别是涉及一种瞬时转化提高苹果砧木绿枝扦插生根的方法。

技术介绍

[0002]我国苹果栽培面积232.38万公顷，产量4388.23万吨，分别占世界的48％和54％，种植规模居世界之首，矮化密植集约化生产是苹果产业发展的重要趋势，也是现代苹果栽培制度和模式的主要改革方向，自根砧矮化苗木繁育成为苹果矮化密植产业亟待解决的技术问题，自根砧矮化苗木分为实生自根砧和营养系自根砧苗木，实生自根砧苗木后代严重分离，苗木整齐度、矮化性难以保证，而营养系自根砧苗木可保持母株的优良性状，矮化性整齐一致，适合机械化作业，剪枝管理相对容易，是高标准建园的首选矮化苗木类型，因此，自根砧苗木的繁育技术对于苹果矮化密植产业意义重大。现有方法无法瞬时转化苹果成龄期砧木小金海棠当年生新捎茎皮，提高其绿枝扦插生根率，同时苗木的成活率低。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的在于提供一种瞬时转化提高苹果砧木绿枝扦插生根的方法，以解决了现有的问题：现有方法无法瞬本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种瞬时转化提高苹果砧木绿枝扦插生根的方法，其特征在于：所述瞬时转化提高苹果砧木扦插生根的方法包括以下步骤：(1)构建35S:MdMIR156a6过表达载体，转化农杆菌(GV3101)；(2)苹果绿枝插穗的选取制作及预侵染的培养液；(3)设置OD600浓度为0.6；(4)把目标基因转入苹果绿枝插穗组织，向(3)中的溶液中施加压强进行真空环境作业，抽真空压强为0.8Mpa，时间为5min；(5)缓慢释放真空，使包含有目标基因的农杆菌(GV3101)细胞渗透苹果绿枝插穗中；(6)苹果绿枝插穗侵染后的进行共培养，实现目标基因的瞬时过量表达；(7)绿枝扦插(2g/L)IBA处理1min。2.根据权利要求1所述的一种瞬时转化提高苹果砧木绿枝扦插生根的方法，其特征在于，所述步骤(2)中苹果插穗采用成龄阶段的植株，苹果绿枝插穗携带miR156基因。3.根据权利要求1所述的一种瞬时转化提高苹果砧木绿枝扦插生根的方法，其特征在于，苹果绿枝插穗需要洗净去除污物,用50％的乙醇溶液进行消毒1min，再在次氯酸钠水溶液浸泡20min消毒，最后用无菌水漂洗...

【专利技术属性】
技术研发人员：李旭，杜睿胤，郑清波，刘庆丽，王康，鲍泽洋，
申请(专利权)人：浙江万里学院，
类型：发明
国别省市：