本发明专利技术涉及一种羟考酮定量检测试纸条、试剂盒及方法。所述的羟考酮定量检测试纸条包括：样品垫、结合垫、检测膜、吸收垫和底板，样品垫、结合垫、检测膜和吸收垫在底板的一端至另一端依次连接；结合垫包被有荧光微球标记的特异性单克隆抗体，荧光微球标记的特异性单克隆抗体可以与羟考酮反应；检测膜上设有检测线以及质控蛋白构成的质控线，检测线包被有羟考酮合成抗原。上述的羟考酮定量检测试纸条能够快速检测毛发中的羟考酮，灵敏度高、特异性好，并能在室温长期稳定保存。能在室温长期稳定保存。能在室温长期稳定保存。
【技术实现步骤摘要】
一种羟考酮定量检测试纸条、试剂盒及方法
[0001]本专利技术涉及毒品检测
，特别是涉及一种时间分辨荧光免疫层析法定量检测毛发中羟考酮的试纸条、试剂盒及方法。
技术介绍
[0002]羟考酮是一种从毒品蒂巴因提取的一种生物碱，它是阿片类的一种毒品，它的成分与吗啡比较类似，作用在人体是一种抑制类毒品。它是一个强效的一个镇痛药，长期服用会使人形成一定的瘾，如果不按医生的处方而滥用，就会产生一种成瘾阶段的一个反应。
[0003]针对吸毒者体内毒品含量的检测，体液(主要指尿液和血液)仍是检验毒品较好的生物检材。然而体液中毒品的检出时限短，吸毒者吸毒后，一般在3至7天就由于代谢而难以通过尿液、血液、唾液精确检测出毒品成分及含量，且体液不易保存，不能探究受检者更长一段时间内的吸毒信息，导致部分吸毒人员借此规避查处和管理。而传统的毛发检测技术中，高效液相色谱法得到结果需要的时间长，操作复杂，不适用于现场执法工作。
技术实现思路
[0004]基于此，有必要针对羟考酮检出时限短、检测时间长、操作复杂的问题，提供一种能够快速检测、灵敏度高、特异性好的羟考酮定量检测试纸条、试剂盒及使用该羟考酮定量检测试纸条的羟考酮定量检测方法。
[0005]一种羟考酮定量检测试纸条，包括：样品垫、结合垫、检测膜、吸收垫和底板，所述样品垫、所述结合垫、所述检测膜和所述吸收垫在所述底板的一端至另一端依次连接；所述结合垫包被有荧光微球标记的特异性单克隆抗体，所述荧光微球标记的特异性单克隆抗体可以与羟考酮反应；所述检测膜上设有检测线以及质控蛋白构成的质控线，所述检测线包被有羟考酮合成抗原。
[0006]在其中一个实施例中，所述荧光微球为时间分辨荧光微球。
[0007]在其中一个实施例中，检测羟考酮的特异性单克隆抗体的所述羟考酮合成抗原为羟考酮偶联蛋白复合物。
[0008]在其中一个实施例中，所述偶联蛋白为牛血清白蛋白或酪蛋白。
[0009]在其中一个实施例中，所述质控蛋白为羊抗鼠IgG抗体。
[0010]在其中一个实施例中，所述结合垫选自玻璃纤维膜或聚酯膜。
[0011]在其中一个实施例中，所述检测膜选自硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜。
[0012]在其中一个实施例中，所述底板为PVC底板或其他硬质不吸水的材料底板。
[0013]在其中一个实施例中，所述检测膜上从所述样品垫至所述吸收垫一端，依次为检测羟考酮的单克隆抗体的所述检测线以及所述质控线。
[0014]在其中一个实施例中，所述检测线和所述质控线的间隔为3.5mm～4.5mm。
[0015]一种如上所述的羟考酮定量检测试纸条的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：
[0016]分别制备所述结合垫和所述检测膜，其中，
[0017]制备所述结合垫包括如下步骤：制备获得包含所述荧光微球标记的特异性单克隆抗体的溶液，将制备得到的荧光微球标记的特异性单克隆抗体喷点于结合垫，将结合垫进行干燥；
[0018]制备所述检测膜包括如下步骤：制备获得包含羟考酮合成抗原的溶液以及包含质控蛋白的溶液，分别划线于检测膜，将检测膜进行干燥；
[0019]组装所述的样品垫、结合垫、检测膜、吸收垫以及所述的底板。
[0020]在其中一个实施例中，所述荧光微球标记的特异性单克隆抗体的溶液浓度为0.1mg/mL～1mg/mL。
[0021]在其中一个实施例中，所述羟考酮合成抗原的喷点浓度为0.3mg/mL～1mg/mL。
[0022]在其中一个实施例中，所述羊抗鼠IgG抗体的浓度为1mg/mL～3mg/mL。
[0023]在其中一个实施例中，制备获得包含所述荧光微球标记的羟考酮特异性单克隆抗体的溶液的步骤包括：
[0024]将荧光微球溶于MES缓冲液中，加入EDC/NHS活化剂活化，洗涤、离心后，将荧光微球用硼酸缓冲液复溶，制备获得混合液a；
[0025]取羟考酮特异性单克隆抗体，分散于偶联缓冲液中，制备获得混合液b；
[0026]在所述混合液a中加入混合液b进行反应，制备获得混合液c；
[0027]对混合液c进行离心，去除上清，再加入封闭液混合，制备获得混合液d；
[0028]将混合液d洗涤、离心，去除上清，用硼酸缓冲液及封闭剂将荧光微球复溶，超声波振荡，使荧光微球均匀分散在缓冲液中，2～8℃避光保存。
[0029]在其中一个实施例中，所述混合液a的制备步骤中，所述荧光微球的质量浓度为10％～40％。
[0030]在其中一个实施例中，所述活化是于24℃～40℃活化0.3h～0.9h。
[0031]在其中一个实施例中，所述离心是于12000rpm～15000rpm下冷冻离心8min～12min。
[0032]在其中一个实施例的所述混合液c的制备步骤中，所述混合液a中加入混合液b进行反应，所述荧光微球与羟考酮特异性单克隆抗体的质量比为1mg：0.5mg～1mg：0.01mg。
[0033]在其中一个实施例的所述混合液c的制备步骤中，反应条件是在25℃～37℃下超声波振荡0.5h～2h。
[0034]在其中一个实施例的所述混合液d的制备步骤中，所述离心是于8000rpm～20000rpm下冷冻离心5min～10min。
[0035]在其中一个实施例的所述混合液d的制备步骤中，所述超声波振荡是于25℃～37℃下振荡0.5h～2h。
[0036]在其中一个实施例中，对所述混合液d进行离心是于8000rpm～20000rpm下冷冻离心5min～10min。
[0037]在其中一个实施例中，所述封闭剂是牛血清白蛋白。
[0038]一种羟考酮定量检测试剂盒，包括：检测卡、样品裂解液以及如上所述的羟考酮定量检测试纸条；
[0039]所述检测卡具有检测腔，并设有与所述检测腔连通的加样槽和观察窗，所述的羟
考酮定量检测试纸条安装在所述检测腔内；所述样品垫位于所述检测卡的加样槽中，且所述检测线和所述质控线露于所述检测卡的观察窗；
[0040]所述样品裂解液分装至2mL冻存管内保存。
[0041]一种毒品的检测方法，所述毒品的检测方法包括：
[0042]取待测样品滴加至前述任意一项所述的羟考酮定量检测试纸条的样品垫上，或滴加至前述的羟考酮定量检测试剂盒的检测卡的加样槽内，荧光检测。
[0043]本专利技术的有益效果如下：
[0044]本专利技术可以快速检测毛发中羟考酮的含量，只需要10分钟，相比高效液相色谱法数小时，效率大大提高，且可以现场执法。本专利技术采用时间分辨微球进行标记和优选的抗体抗原配对，保证了毛发中羟考酮毒品检测的高灵敏度要求。在快速检测毛发毒品的市场中，刚开始普遍灵敏度较低。采用了独有的毛发裂解液，能快速是释放毛发中的羟考酮，不影响检测的特异性和灵敏度，并能在室温长期稳定保存。
附图说明
[0045]图1为本专利技术一实施例的羟考酮定量检测试本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种羟考酮定量检测试纸条，其特征在于，包括：样品垫(1)、结合垫(2)、检测膜(3)、吸收垫(4)和底板(5)，所述样品垫(1)、所述结合垫(2)、所述检测膜(3)和所述吸收垫(4)在所述底板(5)的一端至另一端依次连接；所述结合垫(2)包被有荧光微球标记的特异性单克隆抗体，所述荧光微球标记的特异性单克隆抗体可以与羟考酮反应；所述检测膜(3)上设有检测线(7)以及质控蛋白构成的质控线(6)，所述检测线(7)包被有羟考酮合成抗原。2.根据权利要求1所述的羟考酮定量检测试纸条，其特征在于，所述荧光微球为时间分辨荧光微球。3.根据权利要求1至2任一项所述的羟考酮定量检测试纸条，其特征在于，检测羟考酮的特异性单克隆抗体的所述羟考酮合成抗原为羟考酮偶联蛋白复合物。4.根据权利要求1至2任一项所述的羟考酮定量检测试纸条，其特征在于，所述质控蛋白为羊抗鼠IgG抗体；和/或所述结合垫(2)选自玻璃纤维膜或聚酯膜；和/或所述检测膜(3)选自硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜；和/或所述底板(5)为PVC底板或其他硬质不吸水的材料底板；和/或所述检测膜(3)上从所述样品垫(1)至所述吸收垫(4)一端，依次为检测羟考酮的单克隆抗体的所述检测线(7)以及所述质控线(6)；和/或所述检测线(7)和所述质控线(6)的间隔为3.5mm～4.5mm。5.一种如权利要求1至4任一项所述的羟考酮定量检测试纸条的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：分别制备所述结合垫(2)和所述检测膜(3)，其中，制备所述结合垫(2)包括如下步骤：制备获得包含所述荧光微球标记的特异性单克隆抗体的溶液，将制备得到的荧光微球标记的特异性单克隆抗体喷点于结合垫(2)，将结合垫(2)进行干燥；制备所述检测膜(3)包括如下步骤：制备获得包含羟考酮合成抗原的溶液以及包含质控蛋白的溶液，分别划线于检测膜(3)，将检测膜(3)进行干燥；组装所述的样品垫(1)、结合垫(2)、检测膜(3)、吸收垫(4)以及所述的底板(5)。6.根据权利要求5所述的羟考酮定量检测试纸条的制备方法，其特征在于，所述荧光微球标记的特异性单克隆抗体的溶液浓度为0.1mg/mL～1mg/mL；和/或，所述羟考酮合成抗原的喷点浓度为0.3mg/mL～1mg/mL；和/或，所述羊抗鼠IgG抗体的浓度为1mg/mL～3mg/mL。7.根据权利要求...
【专利技术属性】
技术研发人员：梁德智，漆彦斌，谭有将，江海婷，黄子珊，张国芬，
申请(专利权)人：佛山墨赛生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。