度拉糖肽在制备抗肿瘤药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及肿瘤治疗领域，具体涉及度拉糖肽在制备抗肿瘤药物上的用途。本发明专利技术公开了度拉糖肽在免疫活化方面的效应，以及在抗肿瘤免疫活化方面的效应；还公开了度拉糖肽在抗肿瘤免疫治疗方面的作用。本发明专利技术的结果显示度拉糖肽能显著刺激免疫细胞增殖，其可以显著刺激干扰素γ(IFN

【技术实现步骤摘要】
度拉糖肽在制备抗肿瘤药物中的应用


[0001]本专利技术涉及肿瘤治疗领域，具体来说是指度拉糖肽的免疫活化作用和抗肿瘤用途。

技术介绍

[0002]肿瘤是威胁人类健康的重大疾病。传统的手术、放疗、化疗等方案在一定程度上抑制了肿瘤的进展，但难以控制肿瘤的复发、转移。随着不断出现的令人振奋的临床研究结果，抗肿瘤免疫治疗给肿瘤患者带来了希望。免疫系统具有识别并清除异己的能力，肿瘤在发生发展过程中不仅通过多种途径抑制免疫系统的先天性免疫反应，也通过限制自身“新”抗原的“展示”和启动免疫检查点等诸多方法来“麻痹”浸润的免疫效应细胞，从而达到逃避免疫识别和免疫清除的目的。如何有效的活化抗肿瘤免疫反应，解除免疫逃避，从而达到免疫清除的效果，一直是肿瘤免疫治疗领域所追求的目标。
[0003]胰高血糖素样肽-1(GLP-1)是人体内分泌的一种内源性多肽，它是胰高血糖素原基因经组织特异性的翻译后加工得到的30个氨基酸的肽类激素。GLP-1通过与其受体GLP-1R结合，刺激胰岛素分泌，起到降低血糖的作用。GLP-1还可以通过多种途径产生降低体重的效果，包括抑制胃肠道蠕动和胃液分泌、抑制食欲及摄食、延缓胃内容物排空等等。除此之外，GLP-1还可作用于中枢神经系统(尤其是下丘脑)，从而使人产生饱胀感并降低食欲。GLP-1还具有许多生理功能，比如降脂、降压、保护心血管系统，再比如通过作用于中枢增强学习和记忆功能、保护神经等等。目前为止，并未出现其具有免疫活化或者具有抗肿瘤免疫活化的报道。
[0004]GLP-1的半衰期极短，仅有1.5～2分钟，无法在临床上用于糖尿病和其他病症的治疗。因此，目前制药领域都是在尝试研发半衰期长的胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R)的人工合成激动剂，期望延长半衰期、又具有GLP-1类似的活性和功能。
[0005]度拉糖肽(度易达)是一种新型的胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体激动剂。它是礼来公司研制的一种胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R)的人工合成激动剂。
[0006]目前为止还没有度拉糖肽用于肿瘤治疗或者抗肿瘤的报道，也没有其具有免疫活化或者抗肿瘤免疫活化的数据或者结果的报道。我们在筛选具有免疫活化功能的上市多肽类药物时发现其具有令人意想不到的功能——免疫活化作用，因此，我们尝试将其应用于抗肿瘤免疫活化和抗肿瘤免疫治疗。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的是通过体外研究揭示度拉糖肽的免疫活化活性及其在制备活化抗肿瘤免疫药物上的应用；通过多个体内动物模型，确认度拉糖肽的免疫活化作用及其在制备抗肿瘤免疫治疗药物上的应用。
[0008]本专利技术在体外确认了度拉糖肽在制备免疫活化药物上的应用。进一步，本专利技术在多个体内模型上确认了度拉糖肽在制备抗肿瘤免疫活化药物上的应用，在体内确认了度拉
糖肽在制备抗肿瘤免疫治疗药物上的应用。同时，也确认了度拉糖肽的基本安全性。
[0009]本
技术实现思路
概括如下：
[0010](1)度拉糖肽在体外显著刺激免疫细胞增殖，显著刺激干扰素γ(IFN-γ)的释放，具有明确的免疫活化作用，揭示了度拉糖肽在制备免疫活化药物上的应用。
[0011](2)度拉糖肽在体内显著刺激干扰素γ(IFN-γ)的释放，具有明确的免疫活化作用，揭示了度拉糖肽在制备抗肿瘤免疫活化药物上的应用。
[0012](3)度拉糖肽在体内显著抑制肿瘤生长，显著延长荷瘤小鼠的生存期，具有明确的抗肿瘤免疫治疗作用，揭示了度拉糖肽在制备抗肿瘤免疫治疗药物上的应用。
[0013](4)度拉糖肽在多个体内动物肿瘤模型上显著抑制肿瘤生长、显著延长荷瘤小鼠的生存期，这些肿瘤包括：乳腺癌、结肠癌和黑色素瘤，具有广泛的作用范围，具有明确的广谱抗肿瘤免疫治疗作用，揭示了度拉糖肽在制备抗肿瘤免疫治疗药物上的广泛应用价值。
[0014](5)度拉糖肽在体内具有明确的抑制或者延缓转移复发，以及延长肿瘤术后生存期的作用。
[0015](6)而且，非常重要的一点是，由于是在免疫健全、血糖正常的小鼠上荷瘤，所以度拉糖肽的功能并不依赖于其已有功能——降血糖。
[0016]总的来说，度拉糖肽可以用来制备刺激免疫细胞增殖药物，度拉糖肽可以用来制备增强干扰素γ(IFN-γ)表达药物，度拉糖肽可以用来制备免疫活化药物，度拉糖肽可以用来制备抗肿瘤免疫活化药物，度拉糖肽可以用来制备抗肿瘤免疫治疗药物，度拉糖肽可以用来制备抗肿瘤药物。度拉糖肽可以用来制备抑制或者延缓转移复发以及延长肿瘤术后生存期药物。而且，由于是在免疫健全、血糖正常的小鼠上荷瘤，所以度拉糖肽的功能并不依赖于其已有功能——降血糖。
附图说明
[0017]图1度拉糖肽对外周血单核细胞(PBMC)的增殖刺激作用
[0018]图2度拉糖肽对外周血单核细胞(PBMC)分泌IFN-γ的刺激作用
[0019]图3小鼠黑色素瘤模型上度拉糖肽的抗肿瘤免疫治疗效果(A)Elispot结果(B)不同处理之后肿瘤体积随着时间的变化情况(C)不同处理组小鼠的生存期变化
[0020]图4小鼠乳腺癌模型上度拉糖肽的抗肿瘤免疫治疗效果(A)Elispot结果(B)不同处理之后肿瘤体积随着时间的变化情况(C)不同处理组小鼠的生存期变化
[0021]图5小鼠结肠癌模型上度拉糖肽的抗肿瘤免疫治疗效果(A)Elispot结果(B)不同处理之后肿瘤体积随着时间的变化情况(C)不同处理组小鼠的生存期变化
[0022]图6小鼠转移复发性乳腺癌模型上术后不同处理组小鼠的生存期变化
具体实施方式
[0023]实施例1在外周血单核细胞上检测多肽药物的免疫活化功能
[0024]一、实验方法
[0025]1、筛选对象的确定
[0026]我们利用DrugBank数据库检索多肽药物，排除FDA批准的用于感染性疾病治疗、血液系统疾病治疗、肿瘤治疗和免疫调节的多肽，留下的这些多肽所获批的功能与肿瘤治疗
和免疫调控是没有关系的。功能集中为治疗激素失调、治疗性功能障碍、治疗糖尿病、治疗胃肠消化道疾病、治疗遗传性疾病、治疗心血管疾病、治愈骨病、治疗神经系统疾病、治疗呼吸紊乱、治疗眼障碍治疗吸收不良症。这当中包括用于糖尿病治疗的多肽药物。另外，也检索了中国上市的特有的用于糖尿病治疗的多肽药物。在汇总FDA和中国SFDA批准的用于糖尿病治疗的多肽药物之后，我们通过各种途径购买获得这些多肽用于本专利技术的体内外活性检测和确认。我们首先在外周血单核细胞上筛选这批多肽的免疫活化功能，筛选发现其中一种糖尿病治疗多肽——度拉糖肽具有较强的免疫活化功能。度拉糖肽由礼来制药公司出品(Eli Lilly Italia S.p.A.)，我们购自南京医药门市(生产批号：D096286)，直接按照剂量使用或者PBS稀释使用。
[0027]2、度拉糖肽对外周血单核细胞(PBMC)的增殖刺激作用的检测
[0028]无菌条件下取健康志愿者的外周血,利用肝素抗凝,然后使用淋巴细胞分离液分离外周血单核细胞(P本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.度拉糖肽用于制备免疫活化药物。2.如权利要求1所述的度拉糖肽用于制备免疫活化药物，其特征为所述免疫活化包括刺激免疫细胞扩增或者促进干扰素γ的表达分泌。3.如权利要求1所述的度拉糖肽用于制备免疫活化药物，其特征为所述免疫活化为抗肿瘤免疫活化。4.度拉糖肽在制备抗肿瘤药物中的应用。5.如权利要求4所述的度拉糖肽在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征为所述肿瘤包括乳腺癌、结肠癌和黑色素...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴俊华，刘淑雯，魏继武，江春平，张姗，石维维，马丁，王忠夏，张广，曹胤，
申请(专利权)人：南京大学，
类型：发明
国别省市：