一种检测乳腺癌组织间隙液中标志物的微针及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种检测乳腺癌组织间隙液中标志物的微针及其制备方法，其中，方法包括步骤：将甲基丙烯酸化透明质酸溶液和甲基丙烯酸化明胶溶液按照预定体积比混合，制得预聚体溶液；提供氨基化碳量子点以及与乳腺癌中目标miRNA发生CHA反应的H1，H2溶液；将所述氨基化碳量子点和H1，H2溶液以及光固化剂加入到所述预聚体溶液中并混合，得到复合溶液；将所述复合溶液加入到预制的聚二甲基硅氧烷微针阴模中，经过光照固化处理后，制得检测乳腺癌组织间隙液中标志物的微针。本发明专利技术制备的微针在提高力学性能和膨胀率的同时，对乳腺癌组织液中miRNA和Cu

【技术实现步骤摘要】
一种检测乳腺癌组织间隙液中标志物的微针及其制备方法


[0001]本专利技术涉及生物检测领域，尤其涉及一种检测乳腺癌组织间隙液中标志物的微针及其制备方法。

技术介绍

[0002]即时检测(POCT)技术非常适合公共筛查和个性化医疗保健纵向监测，开发微创、低成本和高度自动化的体液采样方法对于POCT检测至关重要。目前，血液因其丰富的生物学信息成为诊断和跟踪疾病进展的常规手段，但是静脉采血会导致组织损伤、感染以及引起患者不适，因此，寻找可以提供与个人健康状况息息相关的血液采样替代方法正越来越引起人们的关注。
[0003]皮肤间隙液(ISF)由血液经过毛细血管过滤而得到，其中的小分子、电解质和蛋白质的数量与血浆中的成分相似，同时ISF充当细胞/癌细胞和循环系统之间的中间体，所以ISF中的一些生物标志物是独一无二的。利用微针进行ISF采样的优点是穿透深度大大减小，同时避免激活疼痛感知神经元，是一种无创监测健康相关重要参数的新兴方法。皮肤以及皮肤组织间隙液所携带的与健康相关的信息较多，微针(MNs)具有以非侵入方式获取这些信息的重要特征。乳腺癌是全世界女性死亡率最高的恶性肿瘤，对于乳腺癌检查，乳房周围的组织液可以实时反映癌细胞的状态。流行病学和实验室研究证明miRNA在乳腺癌中出现异常表达。金属离子是健康所必需的，在癌症形成和转移的过程往往伴随着血管生成，而Cu
2+
在血管的形成中起着重要的作用。所以，开发能够在ISF中同步检测miRNA和Cu
2+
的方法对于乳腺癌监测具有重要的临床价值。
[0004]目前制备的水凝胶微针主要用于给药，通过微针可以克服皮肤角质层层的屏障作用，极大地提高药物递送效率，但是用于提取生物标志物的微针却为数不多。文献1(Al Sulaiman,D.Hydrogel
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Coated Microneedle Arrays for Minimally Invasive Sampling and Sensing of Specific Circulating Nucleic Acids from Skin Interstitial Fluid.ACS Nano 2019,13,9620
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9628.)报道，利用水凝胶涂层微针，可以从皮肤ISF中采取和分离特定的miRNA生物标志物，同时能够原位检测捕获的miRNA，但是捕获的生物标志物后续依然需要特定的分离步骤和检测仪器。文献2(Philip R,Miller.Extraction and biomolecular analysis of dermal interstitial fluid collected with hollow microneedles.Commun Biol 2018,1,173.)报道，首次利用中空微针实现了ISF中外泌体的分离和表征，但是微针的材料是不锈钢，制作过程繁琐且需要昂贵的仪器，并且会造成生物材料医用垃圾。文献3(Chang,H.A Swellable Microneedle Patch to Rapidly Extract Skin Interstitial Fluid for Timely Metabolic Analysis.Adv.Mater.2017,29(37):1702243.)报道，利用多聚物水凝胶微针可以提取ISF中的葡萄糖，以实现个人医疗保健监测，但是存在采样量少，力学性能不足等缺点。上述制备的微针，存在力学性能不足，采样量较少，需要的设备昂贵且复杂，会造成格外的医疗垃圾等问题，除了给药之外，即使进行ISF采样，也需要后续的分离监测步骤，不适合POCT的应用，并且并未对乳腺癌的生物标志物实
现同步检测。
[0005]因此，现有技术还有待于改进和发展。

技术实现思路

[0006]鉴于上述现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种检测乳腺癌组织间隙液中标志物的微针及其制备方法，旨在解决现有微针机械强度不足、吸水膨胀率较低以及无法实时检测乳腺癌标志物的问题。
[0007]本专利技术的技术方案如下：
[0008]一种检测乳腺癌组织间隙液中标志物的微针的制备方法，其中，包括步骤：
[0009]将甲基丙烯酸化透明质酸溶液和甲基丙烯酸化明胶溶液按照预定体积比混合，制得预聚体溶液；
[0010]提供氨基化碳量子点以及与乳腺癌中目标miRNA发生CHA反应的H1，H2溶液；
[0011]将所述氨基化碳量子点和H1，H2溶液以及光固化剂加入到所述预聚体溶液中并混合，得到复合溶液；
[0012]将所述复合溶液加入到预制的聚二甲基硅氧烷微针阴模中，经过光照固化处理后，制得检测乳腺癌组织间隙液中标志物的微针。
[0013]所述检测乳腺癌组织间隙液中标志物的微针的制备方法，其中，所述甲基丙烯酸化透明质酸溶液的制备包括步骤：
[0014]向透明质酸水溶液中加入甲基丙烯酸酐，调节pH为8
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10，室温反应12
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24h后，制得所述甲基丙烯酸化透明质酸溶液。
[0015]所述检测乳腺癌组织间隙液中标志物的微针的制备方法，其中，所述甲基丙烯酸化明胶溶液的制备包括步骤：
[0016]向明胶水溶液中加入甲基丙烯酸酐中，反应2
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4h后加入PBS终止反应，制得所述甲基丙烯酸化明胶溶液。
[0017]所述检测乳腺癌组织间隙液中标志物的微针的制备方法，其中，所述甲基丙烯酸化透明质酸溶液和甲基丙烯酸化明胶溶液的体积比为1:1
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10:3。
[0018]所述检测乳腺癌组织间隙液中标志物的微针的制备方法，其中，所述氨基化碳量子点的制备包括步骤：
[0019]将柠檬酸和聚乙烯亚胺溶解在去离子水中，并经过超声处理后形成均匀的混合溶液；
[0020]将所述混合溶液置于水热反应釜中，在180
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250℃条件下加热2
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4h，然自然冷却至室温，得到氨基化碳量子点。
[0021]所述检测乳腺癌组织间隙液中标志物的微针的制备方法，其中，所述聚二甲基硅氧烷微针阴模的制备包括步骤：
[0022]将聚二甲基硅氧烷和固化剂混合，将混合液浇筑在金属商业微针模板表面，抽真空去除气体中的气泡；
[0023]将浇筑了混合液的金属商业微针模板放入烘箱中进行加热固化，冷却后将固化的聚二甲基硅氧烷与金属商业微针模板分离，得到聚二甲基硅氧烷微针阴模。
[0024]所述检测乳腺癌组织间隙液中标志物的微针的制备方法，其中，所述光固化剂为
苯基
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2,4,6
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三甲基苯甲酰基亚膦酸锂。
[0025]所述检测乳腺癌组织间隙液中标志物的微针的制备方法，其中，将所述复合溶液加入到预制的聚二甲基硅氧烷微针阴模中，经过光照固化处理的步骤中，所述光固化处理为蓝光照射，时间为5
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15s。
[0026]所述检测乳腺本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测乳腺癌组织间隙液中标志物的微针的制备方法，其特征在于，包括步骤：将甲基丙烯酸化透明质酸溶液和甲基丙烯酸化明胶溶液按照预定体积比混合，制得预聚体溶液；提供氨基化碳量子点以及与乳腺癌中目标miRNA发生CHA反应的H1，H2溶液；将所述氨基化碳量子点和H1，H2溶液以及光固化剂加入到所述预聚体溶液中并混合，得到复合溶液；将所述复合溶液加入到预制的聚二甲基硅氧烷微针阴模中，经过光照固化处理后，制得检测乳腺癌组织间隙液中标志物的微针。2.根据权利要求1所述检测乳腺癌组织间隙液中标志物的微针的制备方法，其特征在于，所述甲基丙烯酸化透明质酸溶液的制备包括步骤：向透明质酸水溶液中加入甲基丙烯酸酐，调节pH为8
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10，室温反应12
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24h后，制得所述甲基丙烯酸化透明质酸溶液。3.根据权利要求1所述检测乳腺癌组织间隙液中标志物的微针的制备方法，其特征在于，所述甲基丙烯酸化明胶溶液的制备包括步骤：向明胶水溶液中加入甲基丙烯酸酐中，反应2
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4h后加入PBS终止反应，制得所述甲基丙烯酸化明胶溶液。4.根据权利要求1所述检测乳腺癌组织间隙液中标志物的微针的制备方法，其特征在于，所述甲基丙烯酸化透明质酸溶液和甲基丙烯酸化明胶溶液的体积比为1:1
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10:3。5.根据权利要求1所述检测乳腺癌组织间隙液中标志物的微针的制备方法，其特征在于，所述氨基化碳量子点的制备包括步骤：将柠檬酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：董海峰，李金泽，
申请(专利权)人：深圳大学，
类型：发明
国别省市：