一种Boc-人胰岛素融合蛋白包涵体的高效复性液及其复性方法技术

本发明专利技术涉及一种Boc

【技术实现步骤摘要】
一种Boc-人胰岛素融合蛋白包涵体的高效复性液及其复性方法


[0001]本专利技术属于生物医药领域，具体涉及一种Boc-人胰岛素融合蛋白包涵体的高效复性液及其复性方法。

技术介绍

[0002]胰岛素是一种两条氨基酸链共有51个氨基酸组成，分别是21个氨基酸的A链和30个氨基酸的B链，由A7-B7和A20-B19之间的两对二硫键连接，另外在A链内还有一个A6-A11的链内二硫键。
[0003]人胰岛素是一种由51个氨基酸组成的蛋白质类激素，由胰脏内的胰岛细胞分泌。胰岛素参与人体内的糖代谢，从而控制人体内的血糖平衡。1978年，美国的Genetech公司首次利用生物重组的方法在大肠杆菌内表达胰岛素。在“胰岛素原”的酶切复性过程中，胰蛋白酶识别胰岛素B29位的赖氨酸，产生大量的B30位苏氨酸消去的胰岛素副产物(DesB30-胰岛素)。由于DesB30-胰岛素和胰岛素之间只相差一个苏氨酸，他们之间的分离非常的困难，因此，将N-(叔丁氧碳基)-赖氨酸(BocK)定点的引入到重组人胰岛素的B29位上产生Boc-人胰岛素融合蛋白。
[0004本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种Boc-人胰岛素融合蛋白的复性方法，其特征在于，所述的方法包括步骤：(1)将含有Boc-人胰岛素融合蛋白的包涵体进行裂解，得到裂解混合液，向所述的裂解混合液中加入变性溶液，得到Boc-人胰岛素融合蛋白变性溶液；(2)将所述Boc-人胰岛素融合蛋白变性溶液与复性液混合后进行反应，得到复性的Boc-人胰岛素融合蛋白。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的包涵体包括表达Boc-人胰岛素融合蛋白的重组菌的包涵体。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的Boc-人胰岛素融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.:1所示，且第83位赖氨酸为Nε-(叔丁氧羰基)-赖氨酸。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的复性液包括Tris、Na2CO3、甘氨酸、NaCl、EDTA和胱氨酸。5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的Tris的浓度为20-80mmol/L，较佳地30-70mmol/L，更佳地...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐亚连，吴松，张振山，杨接运，
申请(专利权)人：苏州鲲鹏生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：