一种N-甲基化多肽的固相合成方法技术

本发明专利技术公开了一种N

【技术实现步骤摘要】
一种N
‑
甲基化多肽的固相合成方法


[0001]本专利技术属于多肽合成领域，特别涉及一种N
‑
甲基化多肽的固相合成方法。

技术介绍

[0002]N
‑
甲基氨基酸存在于多种天然肽中，其掺入生物活性肽中会改变化学和物理性质，它也可能导致效力增强，新的受体亚型选择性和激动剂转化为拮抗剂。含N
‑
甲基化多肽也是潜在的治疗药物，被证明可以改善重要的药理参数，广泛应用于抗生素，抗癌剂，抗病毒剂和免疫抑制活性(Biron.E and Kissler.H.Convenient Synthesis of N
‑
Methylamino Acids Compatible with Fmoc Solid
‑
Phase Peptide Synthesis.J.Org.Chem.2005，70，5183
‑
5189)。
[0003]然而，N
‑
甲基氨基酸及其衍生物由于空间位阻较大，在进行偶联时相对比较困难，因此合成N
‑
甲基化多肽具有挑战性(Ali.F E，Bennett.D B，Calva.R R，et al.Conformationally Constrained Peptides and Semipeptides Derived from RGD as Potent Inhibitors of the Platelet Fibrinogen Receptor and Platelet Aggregation.J.Med.Chem.1994，37，769
‑
780)。
[0004]1999年，Akaji小组开发的2
‑
氯
‑
1，3
‑
二甲基
‑2‑
甲基咪唑啉六氟磷酸盐(CIP)作为有效的偶联剂成功进行了含N
‑
甲基片段2和吡咯烷酮片段3的合成，最终合成了从印度洋海兔中分离出的一种具有细胞生长抑制作用的去肽dolastatin 15(Akaji.K，Hayashi.Y，Kiso.Y.Convergent Synthesis of Dolastatin 15 by Solid Phase Coupling of an N
‑
Methylamino Acid.J.Org.Chem.1999，64，405
‑
411)。
[0005]2005年，Teixido
′
小组研究发现PyAop/PyBop与HOAT是偶联N
‑
甲基氨基酸的良好缩合体系(Teixido
′
.M，Albericio.F and Giralt E.Solid
‑
phase synthesis and characterization of N
‑
methyl
‑
rich peptides.J.Peptide Res.，2005，65，153
‑
166.)。
[0006]2015年，Adamska小组报道的基于三嗪的偶联剂4
‑
(4，6
‑
二甲氧基
‑
1，3，5
‑
三嗪
‑2‑
基)
‑4‑
甲基吗啉甲苯
‑4‑
磺酸盐能够用于合成N
‑
甲基化多肽，与标准偶联剂(如TBTU或HATU)相比，收率低，副产物量少(Adamska.A，B，Kluczyk.A et al.Synthesis of linear and cyclic opioid
‑
based peptide analogs containing multiple N
‑
methylated amino acid residues.J.Pept.Sci.2015，21，807
‑
810)。
[0007]然而这些方法的共同缺点是在进行偶联反应的同时易发生消旋化或生成二酮哌嗪等副产物，最终导致收率低，后处理复杂，偶联试剂价格也比较昂贵。

技术实现思路

[0008]本专利技术公开了一种N
‑
甲基化多肽的合成方法，属于多肽合成
这种化合物是一类重要的合成中间体，本身还具有广泛的生物活性。在廉价易得的碳二亚胺型偶联试剂催化下，发生酰胺偶联反应，得到一系列高产率、高纯度N
‑
甲基化多肽。本专利技术为N
‑
甲基化多肽的制备提供了一条简捷而实用的技术路线，在多肽合成
具有广泛的应
用。
[0009]本专利技术的目的在于针对现有技术的不足，提供了一种N
‑
甲基化多肽的合成方法，在固相合成偶联上N
‑
甲基氨基酸后，在包含碳二亚胺型偶联剂的催化下偶联N
‑
甲基氨基酸的下一位氨基酸。
[0010]在本专利技术的一些实施方案中，所述碳二亚胺型偶联试剂选自DIC/HOAT、DCC/HOAT或EDC/HOAT。在本专利技术的一些具体实施方案中，所述碳二亚胺型偶联试剂为DIC/HOAT。
[0011]在本专利技术的一些实施方案中，在偶联N
‑
甲基氨基酸的下一位氨基酸时，氨基酸原料的投入量为1eq～10eq，优选为5eq；浓度为0.1M～1.5M，优选为0.5M。在另一些具体实施方案中，在偶联N
‑
甲基氨基酸的下一位氨基酸时，氨基酸原料的投入量可选自1eq、2eq、3eq、4eq、5eq、6eq、7eq、8eq、9eq或10eq；投入氨基酸原料浓度可选自0.1M、0.2M、0.3M、0.4M、0.5M、0.6M、0.7M、0.8M、0.9M、1.0M、1.1M、1.2M、1.3M、1.4M或1.5M。在本专利技术的一些具体实施方案中，在偶联N
‑
甲基氨基酸的下一位氨基酸时，氨基酸原料的投入量为5eq，浓度为0.5M。
[0012]在本专利技术的一些实施方案中，在偶联N
‑
甲基氨基酸的下一位氨基酸时，偶联反应温度为20℃～100℃，优选30℃。在另一些实施方案中，所述偶联反应温度可选自20℃、21℃、22℃、23℃、24℃、25℃、26℃、27℃、28℃、29℃、30℃、31℃、32℃、33℃、34℃、35℃、36℃、37℃、38℃、39℃、40℃、41℃、42℃、43℃、44℃、45℃、46℃、47℃、48℃、49℃、50℃、51℃、52℃、53℃、54℃、55℃、56℃、57℃、58℃、59℃、60℃、65℃、70℃、75℃、80℃、85℃、90℃、91℃、92℃、93℃、94℃、95℃、96℃、97℃、98℃、99℃或100℃。在本专利技术的一个具体实施方案中，所述偶联反应温度为30℃。
[0013]在本专利技术的一些实施方本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种N
‑
甲基化多肽的固相合成方法，其特征在于，在固相合成偶联上N
‑
甲基氨基酸后，在包含碳二亚胺型偶联剂的催化下偶联N
‑
甲基氨基酸的下一位氨基酸。2.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述碳二亚胺型偶联试剂选自DIC/HOAT、DCC/HOAT或EDC/HOAT，优选DIC/HOAT。3.根据权利要求1或2所述的合成方法，其特征在于，在偶联N
‑
甲基氨基酸的下一位氨基酸时，氨基酸原料的投入量为1eq～10eq，优选5eq；浓度为0.1M～1.5M，优选0.5M。4.根据权利要求1～3中任一项所述的合成方法，其特征在于，在偶联N
‑
甲基氨基酸的下一位氨基酸时，偶联反应温度为20℃～100℃，优选30℃。5.根据权利要求1～4中任一项所述的合成方法，其特征在于，在偶联N
‑
甲基氨基酸的下一位氨基酸时，偶联反应时间为1h～48h，优选18h。6.根据权利要求1～5中任一项所述的合成方法，其特征在于，除偶联N
‑
甲基氨基酸的下一位氨基酸以外，其他偶联步骤的偶联剂选自DIC/HOBT、DIC/HOAT、PyBOP/HOBT/DIEA、PyBOP/HOAT/DIEA、HATU/HOBT/DIEA、HATU/HOAT/DIEA、HBTU/HOBT/DIEA或TBTU/HOBT/DIEA，优选DIC/HOBT。7.根据权利要求1～6中任一项所述的合成方法，其中所述固相合成包括在树脂上按照N
‑
甲基化多肽的序列从N端到C端的顺序依次偶联得到N
‑
甲基化多肽
‑
树脂。8.根据权利要求1～7中任一项所述的合成方...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈志立，谭保锋，丁俊，张鑫，
申请(专利权)人：江苏金斯瑞生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：