一种从灰树花中提取高活性多糖的方法技术

一种从灰树花中提取高活性多糖的方法，解决高活性多糖得率和纯度的技术问题，方法是：萃取灰树花中脂类及小分子物质

【技术实现步骤摘要】
一种从灰树花中提取高活性多糖的方法


[0001]本专利技术涉及一种化学萃取方法，特别是一种从灰树花中提取高活性多糖的方法。

技术介绍

[0002]可食用真菌一般都具有大果体，味道鲜美，具有药高于灵芝等其他菌类，是一种珍稀的药食两用真菌；其气味清香四溢、沁人心脾，肉质脆嫩爽口、风味独特、回味无穷。灰树花干品中碳水化合物 21.4%，蛋白质 25.用和食用的双重经济价值，尤其是可以从食用真菌里提取大量的蛋白质、高活性多糖、矿物质以及维生素等活性物质。灰树花又称为栗蘑，其食用价值及药用价值2% （18种人体所 需氨 基 酸 有 18.86%）， 脂 肪 3.2% ， 膳 食 纤 维33.7%，灰分 5.1%。同时灰树花富含多种矿物质和维生素，其中维生素E 含量比一般的食用菌高 10~20 倍，维生素C 含量是其同类的 3~5 倍，胡萝卜素、VB 含量也很丰富[1]。灰树花富含人体所需的氨基酸，如精氨酸、赖氨酸、冬氨酸和谷氨酸，因此灰树花能促进儿童身体健康成长和智力发育，有助于食品保持鲜味，有利于平衡营养。
[0003]灰树花除食用价值外，最近许多研究者发现从灰树花中提取高活性多糖具有极高的生物活性，如抗肿瘤[2]，抗氧化[3, 4]，抗菌等活性[5]，高纯度高活性多糖可以开发成安全无副作用的药物[6]。灰树花高活性多糖可以作为一种天然的、潜在的免疫调节剂，并作为一种减轻化疗引起的免疫抑制的治疗药物。
[0004]近些年，现有技术中，对灰树花中具有活性组分的高活性多糖提取和分离，是采用冷或热水萃取或者碱萃取的方法，提取灰树花中的高活性多糖，冷水萃取虽不破坏高活性多糖的结构但是得率很低，萃取时间漫长，没有工业化的可能。见参考文献 zhang[7]，Li[5]以及Chen[8]均是以热水萃取，然后醇析的方法得到粗高活性多糖，但是此方法虽较冷水提取的得率变高，但是容易破坏灰树花中高活性多糖的结构，而且高活性多糖得率仅只有2.45%，热水萃取高活性多糖纯度仅仅在80-90%左右。碱萃取高活性多糖纯度最高能达到90%方法。有文献报道灰树花高活性多糖之所以具有生物活性主要是因为高活性多糖的连接方式以及高活性多糖具有三维螺旋结构，但是在热水或碱提取过程中，糖肽键可能断裂，分子量或结构改变，三维螺旋结构被破坏因而用此方法提取高活性多糖生物活性相对较低。热碱抽提虽高活性多糖得率提高，但是可能破坏了高活性多糖肽链及空间结构，高活性多糖的生物活性较差。如何专利技术一种既不破坏灰树花高活性多糖的结构、又能够提高高活性多糖得率和纯度的提取方法，是高活性多糖实现药用目的亟待需要解决的技术问题。

技术实现思路

[0005]为实现既不破坏灰树花高活性多糖的结构、又能够提高高活性多糖得率和纯度的专利技术目的，本专利技术公开一种从灰树花中提取高活性多糖的方法。
[0006]本专利技术实现专利技术目的采用的方法是：步骤1. 将灰树花去除杂质洗净后晾干后粉碎200目以下；步骤2.粉碎后的灰树花按克重量使用脂类及小分子物质萃取液按毫升体积，1:5-15的
混配比例条件下多次反复萃取，直至将灰树花中脂类及小分子物质全部萃取出，萃取处理后去除萃取液，得去除脂类及小分子物质的灰树花粉末，萃余物记为沉淀物1；步骤3. 将步骤2获得的沉淀物1按克重量与强非极性物资萃取液按毫升体积，1:5-15的比例进行多次反复萃取，直至将沉淀物1中强非极性物质全部萃取出，去除萃取液，得去除强非极性物资的沉淀物1，萃余物记为沉淀物2；步骤4.将步骤3获得的沉淀物2按克重量使用极性物资萃取液按毫升体积，1:5-15的比例进行多次反复萃取，直至将沉淀物2中极性物质全部萃取出，去除萃取液，得去除极性物质的沉淀物2，萃余物记为沉淀物3；步骤5. 将步骤4获得的沉淀物3，按克重量使用弱非极性物资萃取液按毫升体积，1:5-15的比例进行萃取，连续萃时间取大于100小时将沉淀物3中弱的非极性物质萃取出，去除萃取液，得去除弱非极性物资的沉淀物3，萃余物记为沉淀物4；步骤6.将步骤5获得的沉淀物4，按克重量同时使用非极性物资萃取液和极性物资萃取液按毫升体积，1：1：1的比例连续萃取，时间取大于100小时，将沉淀物4中既非极性物质又非非极性物质萃取出，去除萃取液，得去除既非极性物质又非非极性物质的沉淀物4，得萃余物记为沉淀物5；步骤7. 将步骤6获得的沉淀物5，按克重量使用DMSO按毫升体积，1:20的比例，提取温度为20-50℃，提取时间为4-8小时的工艺条件下，进行高活性多糖的萃取，然后将含高活性多糖的DMSO缓慢滴入10V的丙酮中，静置12小时后，得粗高活性多糖的絮状晶体和DMSO与丙酮的混合液体；步骤8.使用离心机将高活性多糖的絮状结晶体与DMSO和丙酮液体分离，将絮状高活性多糖结晶加入纯净水，使可溶解在水中的高活性多糖完全溶解在纯净水中，去除不溶解在水中的高活性多糖杂质，得含有溶解在水中的高活性多糖纯净水；步骤9.将步骤步骤8获得的含有溶解在水中的高活性多糖纯净水通过旋转蒸发将去离子水浓缩，浓缩后进行冷冻干燥，即得粗高活性多糖；步骤10.将步骤9获得的粗高活性多糖，经凝胶色谱纯化，得纯度高活性多糖。
[0007]本专利技术的有益效果是：工艺路线简单、成本低、效率高，不破坏灰树花高活性多糖的结构、高活性多糖得率达到7.12%和高活性多糖纯度可达到99.37%。
[0008]下面结合流程图对本专利技术进行详细描述。
附图说明
[0009]附图1为本专利技术工艺流程图。
[0010]附图2为专利技术实施例与现有技术有益效果对比表。
具体实施方式
[0011]参考流程图，一种从灰树花中提取高活性多糖的方法，该方法由以下步骤实现：步骤1. 将灰树花去除杂质洗净后晾干后粉碎200目以下；步骤2.粉碎后的灰树花按克重量使用脂类及小分子物质萃取液按毫升体积，1:5-15的混配比例条件下多次反复萃取，直至将灰树花中脂类及小分子物质全部萃取出，萃取处理后去除萃取液，得去除脂类及小分子物质的灰树花粉末，萃余物记为沉淀物1；
步骤3. 将步骤2获得的沉淀物1按克重量与强非极性物资萃取液按毫升体积，1:5-15的比例进行多次反复萃取，直至将沉淀物1中强非极性物质全部萃取出，去除萃取液，得去除强非极性物资的沉淀物1，萃余物记为沉淀物2；步骤4.将步骤3获得的沉淀物2按克重量使用极性物资萃取液按毫升体积，1:5-15的比例进行多次反复萃取，直至将沉淀物2中极性物质全部萃取出，去除萃取液，得去除极性物质的沉淀物2，萃余物记为沉淀物3；步骤5. 将步骤4获得的沉淀物3，按克重量使用弱非极性物资萃取液按毫升体积，1:5-15的比例进行萃取，连续萃时间取大于100小时将沉淀物3中弱非极性物质萃取出，去除萃取液，得去除弱非极性物资的沉淀物3，萃余物记为沉淀物4；步骤6.将步骤5获得的沉淀物4，按克重量同时使用非极性物资萃取液和极性物资萃取液按毫升体积，1：1：1的比例连续萃取，时间取大于100小时，将沉淀物4中既非极性物质又非非极性物质萃取出，去除萃取液，得去除既非极性物质又非非极性物质的沉淀物4，得萃本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从灰树花中提取高活性多糖的方法，其特征在于：该方法由以下步骤实现：步骤1. 将灰树花去除杂质洗净后晾干后粉碎200目以下；步骤2.粉碎后的灰树花按克重量使用脂类及小分子物质萃取液按毫升体积，1:5-15的混配比例条件下多次反复萃取，直至将灰树花中脂类及小分子物质全部萃取出，萃取处理后去除萃取液，得去除脂类及小分子物质的灰树花粉末，萃余物记为沉淀物1；步骤3. 将步骤2获得的沉淀物1按克重量与强非极性物资萃取液按毫升体积，1:5-15的比例进行多次反复萃取，直至将沉淀物1中强非极性物质全部萃取出，去除萃取液，得去除强非极性物资的沉淀物1，萃余物记为沉淀物2；步骤4.将步骤3获得的沉淀物2按克重量使用极性物资萃取液按毫升体积，1:5-15的比例进行多次反复萃取，直至将沉淀物2中极性物质全部萃取出，去除萃取液，得去除极性物质的沉淀物2，萃余物记为沉淀物3；步骤5. 将步骤4获得的沉淀物3，按克重量使用弱非极性物资萃取液按毫升体积，1:5-15的比例进行萃取，连续萃时间取大于100小时将沉淀物3中弱非极性物质萃取出，去除萃取液，得去除弱非极性物资的沉淀物3，萃余物记为沉淀物4；步骤6.将步骤5获得的沉淀物4，按克重量同时使用非极性物资萃取液和极性物资萃取液按毫升体积，1：1：1的比例连续萃取，时间取大于100小时，将沉淀物4中既非极性物质又非非极性物质萃取出，去除萃取液，得去除既非极性物质又非非极性物质的沉淀物4，得萃余物记为沉淀物5；步骤7. 将步骤6获得的沉淀物5，按克重量使用DMSO按毫升体积，1:20的比例，提取温度为20-50℃，提取时间为4-8小时的工艺条...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏贤勇，宗志敏，教富伟，赵厚宽，赵炜，刘光辉，麻志浩，魏丰华，
申请(专利权)人：辽宁国重重质碳资源产业工程技术研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：