一种从灰树花中提取高活性多糖的醇析方法技术

一种从灰树花中提取高活性多糖的醇析方法，解决保持多糖的结构、多糖得率和纯度的问题，方法是：灰树花去杂质粉碎

【技术实现步骤摘要】
一种从灰树花中提取高活性多糖的醇析方法


[0001]本专利技术涉及一种化学萃取方法，特别是一种从灰树花中提取高活性多糖的醇析方法。

技术介绍

[0002]可食用真菌一般都具有大果体，味道鲜美，具有药高于灵芝等其他菌类，是一种珍稀的药食两用真菌；其气味清香四溢、沁人心脾，肉质脆嫩爽口、风味独特、回味无穷。灰树花干品中碳水化合物 21.4%，蛋白质 25.用和食用的双重经济价值，尤其是可以从食用真菌里提取大量的蛋白质、高活性多糖、矿物质以及维生素等活性物质。灰树花又称为栗蘑，其食用价值及药用价值2% （18种人体所 需氨 基 酸 有 18.86%）， 脂 肪 3.2% ， 膳 食 纤 维33.7%，灰分 5.1%。同时灰树花富含多种矿物质和维生素，其中维生素E 含量比一般的食用菌高 10~20 倍，维生素C 含量是其同类的 3~5 倍，胡萝卜素、VB 含量也很丰富[1]。灰树花富含人体所需的氨基酸，如精氨酸、赖氨酸、冬氨酸和谷氨酸，因此灰树花能促进儿童身体健康成长和智力发育，有助于食品保持鲜味，有利于平衡营养。
[0003]灰树花除食用价值外，最近许多研究者发现从灰树花中提取高活性多糖具有极高的生物活性，如抗肿瘤[2]，抗氧化[3, 4]，抗菌等活性[5]，高纯度高活性多糖可以开发成安全无副作用的药物[6]。灰树花高活性多糖可以作为一种天然的、潜在的免疫调节剂，并作为一种减轻化疗引起的免疫抑制的治疗药物。
[0004]近些年，现有技术中，对灰树花中具有活性组分的高活性多糖提取和分离，是采用冷或热水萃取或者碱萃取的方法，提取灰树花中的高活性多糖，冷水萃取虽不破坏高活性多糖的结构但是得率很低，萃取时间漫长，没有工业化的可能。见参考文献 zhang[7]，Li[5]以及Chen[8]均是以热水萃取，然后醇析的方法得到粗高活性多糖，但是此方法虽较冷水提取的得率变高，但是容易破坏灰树花中高活性多糖的结构，而且高活性多糖得率仅只有2.45%，热水萃取高活性多糖纯度仅仅在80-90%左右。碱萃取高活性多糖纯度最高能达到90%方法。有文献报道灰树花高活性多糖之所以具有生物活性主要是因为高活性多糖的连接方式以及高活性多糖具有三维螺旋结构，但是在热水或碱提取过程中，糖肽键可能断裂，分子量或结构改变，三维螺旋结构被破坏因而用此方法提取高活性多糖生物活性相对较低。热碱抽提虽高活性多糖得率提高，但是可能破坏了高活性多糖肽链及空间结构，高活性多糖的生物活性较差。如何专利技术一种既不破坏灰树花高活性多糖的结构、又能够提高高活性多糖得率和纯度的提取方法，是高活性多糖实现药用目的亟待需要解决的技术问题。

技术实现思路

[0005]为实现既不破坏灰树花高活性多糖的结构、又能够提高高活性多糖得率和纯度的专利技术目的，本专利技术公开一种从灰树花中提取高活性多糖的醇析方法。
[0006]本专利技术实现专利技术目的采用的方法是：一种从灰树花中提取高活性多糖的醇析方法，该方法由以下步骤实现：
步骤1.将灰树花去除杂质洗净后晾干后粉碎200目以下。
[0007]步骤2.将步骤1获取的灰树花粉末与浓度5-40%乙醇溶液混合，放入密封的萃取反应釜中，将二氧化碳气体加压达到超临界状态，二氧化碳超临界液体，缓慢输入到萃取釜中。
[0008]步骤3.萃取釜中，在二氧化碳超临界液体与乙醇溶液共同对灰树花粉末高活性多糖进行萃取4-10小时。
[0009]步骤4.将步骤3萃取釜中的二氧化碳液体和乙醇液体溢流到与萃取釜连通的第一密封容器中，第一密封容器进释放部分二氧化碳溶液转化的二氧化碳气体，剩余的二氧化碳液体和乙醇液体溢流到与第一密封容器连通的第二密封容器。
[0010]步骤5.释放第二密封容器中二氧化碳溶液全部转化的二氧化碳气体，得含有高活性多糖乙醇的液体。
[0011]步骤6.对步骤5获得的含有高活性多糖乙醇的液体增加乙醇浓度至高活性多糖结晶，得乙醇液体和高活性多糖结晶体。
[0012]步骤7.将步骤6获得的高活性多糖结晶体加入纯净水溶液，使可溶解在水中的高活性多糖完全溶解在纯净水溶液中，去除不溶解在水中的高活性多糖不溶解杂质，得含有溶解在水中的高活性多糖纯净水溶液。
[0013]步骤8.将步骤7获得的含有溶解在水中的高活性多糖纯净水溶液，通过旋转蒸发将纯净水溶液浓缩，浓缩后进行冷冻干燥，即得粗高活性多糖。
[0014]步骤9.将步骤8获得的粗高活性多糖，经凝胶色谱纯化，得纯度高活性多糖。
[0015]本专利技术的有益效果是：工艺路线简单、成本低、效率高，不破坏灰树花高活性多糖的结构、高活性多糖得率达到7.12%和高活性多糖纯度可达到99.37%。
[0016]下面结合实施例对本专利技术进行详细描述。
具体实施方式
[0017]一种从灰树花中提取高活性多糖的醇析方法，该方法由以下步骤实现：步骤1.将灰树花去除杂质洗净后晾干后粉碎200目以下。
[0018]步骤2.将步骤1获取的灰树花粉末与浓度5-40%乙醇溶液混合，放入密封的萃取反应釜中，将二氧化碳气体加压达到超临界状态，二氧化碳超临界液体，缓慢输入到萃取釜中。
[0019]二氧化碳液体的作用是，加速促进乙醇萃取灰树花粉末中的多糖。而且二氧化碳液体易于转化排出。
[0020]步骤3.萃取釜中，在二氧化碳超临界液体与乙醇溶液共同对灰树花粉末中高活性多糖进行萃取4-10小时。
[0021]步骤4.将步骤3萃取釜中的二氧化碳液体和乙醇液体溢流到与萃取釜连通的第一密封容器中，第一密封容器进释放部分二氧化碳溶液转化的二氧化碳气体，剩余的二氧化碳液体和乙醇液体溢流到与第一密封容器连通的第二密封容器。
[0022]缓慢并二次排放二氧化碳气体的目的是减少二氧化碳气体携带含有多糖的乙醇液体被二氧化碳气体带出，影响多糖收集率。
[0023]步骤5.释放第二密封容器中，二氧化碳溶液全部转化的二氧化碳气体，得含有高
活性多糖乙醇的液体。
[0024]步骤6.对步骤5获得的含有高活性多糖乙醇的液体增加乙醇浓度至高活性多糖结晶，得乙醇液体和高活性多糖结晶体。
[0025]步骤7.将步骤6获得的高活性多糖结晶体加入纯净水溶液，使可溶解在水中的高活性多糖完全溶解在纯净水溶液中，去除不溶解在水中的高活性多糖不溶解杂质，得含有溶解在水中的高活性多糖纯净水溶液。
[0026]步骤8.将步骤7获得的含有溶解在水中的高活性多糖纯净水溶液，通过旋转蒸发将纯净水溶液浓缩，浓缩后进行冷冻干燥，即得粗高活性多糖。
[0027]步骤9.将步骤8获得的粗高活性多糖，经凝胶色谱纯化（琼脂柱程析精纯），得高纯度高活性多糖。
[0028]本专利技术实施例中，该方法步骤4中，第一密封容器进释放部分二氧化碳溶液转化的二氧化碳气体的释放方法是对第一密封容器减压或升温。
[0029]本专利技术现有对比文件如下：[1] H. Horio, M. OHTSURU, Maitake (Grifola frondosa) Impr本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从灰树花中提取高活性多糖的醇析方法，其特征在于：该方法由以下步骤实现：步骤1.将灰树花去除杂质洗净后晾干后粉碎200目以下；步骤2.将步骤1获取的灰树花粉末与浓度5-40%乙醇溶液混合，放入密封的萃取反应釜中，将二氧化碳气体加压达到超临界状态，二氧化碳超临界液体，缓慢输入到萃取釜中；步骤3.萃取釜中，在二氧化碳超临界液体与乙醇溶液共同对灰树花粉末高活性多糖进行萃取4-10小时；步骤4.将步骤3萃取釜中的二氧化碳液体和乙醇液体溢流到与萃取釜连通的第一密封容器中，第一密封容器进释放部分二氧化碳溶液转化的二氧化碳气体，剩余的二氧化碳液体和乙醇液体溢流到与第一密封容器连通的第二密封容器；步骤5.释放第二密封容器中，二氧化碳溶液全部转化的二氧化碳气体，得含有高活性多糖乙醇的液体...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏贤勇，宗志敏，教富伟，赵厚宽，赵炜，刘光辉，麻志浩，魏丰华，
申请(专利权)人：辽宁国重重质碳资源产业工程技术研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：