【技术实现步骤摘要】
一种劳森氏菌免疫胶体检测试纸条的组装方法
[0001]本专利技术涉及生物工程
，具体为一种劳森氏菌免疫胶体检测试纸条的组装方法。
技术介绍
[0002]生物工程，是20世纪70年代初开始兴起的一门新兴的综合性应用学科，90年代诞生了基于系统论的生物工程，即系统生物工程的概念。
[0003]所谓生物工程，一般认为是以生物学的理论和技术为基础，结合化工、机械、电子计算机等现代工程技术，充分运用分子生物学的最新成就，自觉地操纵遗传物质，定向地改造生物或其功能，短期内创造出具有超远缘性状的新物种，再通过合适的生物反应器对这类“工程菌”或“工程细胞株”进行大规模的培养，以生产大量有用代谢产物或发挥它们独特生理功能一门新兴技术。
[0004]经过大量检索得知：中国专利技术专利：申请号【CN201811210468.8】；公开号【CN111053896A】一种降低与猪中细胞内劳森氏菌亚临床感染相关的平均日增重的负面影响的方法；本专利技术公开了一种降低与猪中细胞内劳森氏菌亚临床感染相关的平均日增重(ADWG)的负面影响...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种劳森氏菌免疫胶体检测试纸条的组装方法，其特征在于：劳森氏菌免疫胶体金检测试纸条由兔抗劳森氏菌多克隆抗体、羊抗鼠IgG、鼠抗劳森氏菌LscN单克隆抗体和NC膜制备；用鼠抗劳森氏菌LscN单克隆抗体制备金标探针，用兔抗劳森氏菌多克隆抗体作为检测线，用羊抗鼠IgG作为质控线，用PBS、1％BSA、0.2％Tween
‑
20、0.05mol/LNaCl溶液封闭NC膜，水洗并干燥；将以上组件组装成劳森氏菌免疫胶体金检测试纸条；兔抗劳森氏菌多克隆抗体的制备和纯化：S1、提取劳森氏菌的菌液，并对提取的菌液进行灭活处理；S2、选取健康的兔子样本；S3、将灭活好的菌液稀释至2
×
109CFU/mL，稀释后的菌液进行乳化，将乳化后的菌液多点皮下注射接种兔子，每隔2周用同样处理、同样浓度、同样剂量的菌液乳化后免疫；S4、第三次免疫后7天，在兔子的耳静脉采血，采用ELISA方法检测血清抗体效价，达到要求后，再兔子的心脏采血，收集血清，分装后于﹣20℃冷冻保存；羊抗鼠IgG的制备和纯化：S1、选取健康的山羊和健康的小白鼠；S2、经小白鼠的颈总动脉放血，取得鼠血清，然后用1次50％饱和硫酸铵和2次33％饱和硫酸铵沉淀盐析，得到粗提的鼠血清球蛋白，将粗提的鼠血清球蛋白经葡聚糖凝胶进行凝胶过滤，得到纯化的鼠血清IgG；S3、按照50g/L加入纯化的鼠血清IgG，10g/L加入卡介苗，在两支5ml的注射器内进行对抽，制得抗原混合物；S4、在山羊的腿部肌肉注射2ml的抗原混合物，腿部分两点注射，背部皮下四点注射1ml，进行一次免疫，每隔2周用同样处理、同样浓度、同样剂量的抗原混合物注射后免疫；S5、第四次免疫后7天，对山羊进行抽血，做琼脂糖双扩散实验，测试结果符合后，在山羊的颈动脉处抽血，收集血清抗体，分装后于﹣20℃冷冻保存。2.根据权利要求1所述的一种劳森氏菌免疫胶体检测试纸条的组装方法，其特征在于：劳森氏菌LscN蛋白的原核表达和纯化：设计lscN全长引物，以劳森氏菌基因组为模板，...
【专利技术属性】
技术研发人员：张敏，孙艳发，尹会方，范克伟，董波，戴爱玲，
申请(专利权)人：龙岩学院，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。