一种果蝇唾腺染色体永久装片的制作方法技术

本发明专利技术提供了一种果蝇唾腺染色体永久装片的制作方法。包括获得唾腺、染色、以倾斜于载玻片30～60

【技术实现步骤摘要】
一种果蝇唾腺染色体永久装片的制作方法


[0001]本专利技术涉及生物材料装片的制作方法，具体地涉及一种果蝇唾腺染色体永久装片的制作方法。

技术介绍

[0002]果蝇等双翅目昆虫幼虫期的唾腺细胞很大，唾腺染色体经过多次复制而并不分开，导致每条染色体常常有数千根染色体丝的拷贝，所以唾腺染色体比普通染色体大得多。唾腺染色体经过染色后，会出现深浅不同、密疏各别的横纹，这些横纹的排列意味着基因的排列，代表着果蝇等昆虫种的特征；如染色体有缺失、重复、倒位、易位等，很容易在唾腺染色体上识别出来。由于唾腺染色体的特殊性，所以常常被用来作为高校实验教学材料或科研上的材料。目前市面上可以购买到果蝇唾腺染色体永久装片，以满足实际需求，制作果蝇唾腺染色体永久装片的方法也有很多。
[0003]黄世全等(黄世全，王棚涛，郭思义，高安礼.唾腺染色体制片方法的简化与改进[J].安徽农业科学，J.AnhuiAgric.Sci.2018，46(21)：234
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236.)提供了一种唾腺染色体制片方法，步骤包括解剖果蝇三龄幼虫得到唾腺、染色、盖玻片一角垫上双面刀片进行敲片、去掉刀片进行压片；赵锦慧等(赵锦慧，刘中华.果蝇唾腺染色体制片方法的改进[J].生物学通报，2011，46(6)：52
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53.)也提供了一种果蝇唾腺染色体制片方法，包括唾腺的剥离、染色完成后脂肪的剥离、酸解、漂洗、染色、压片等步骤；罗玉娥等(罗玉娥，黎杰强，何风华，高峰.果蝇幼虫唾腺染色体标本的制备与比较[J].生物学通报，2017，52(12)：42
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45.)也提供了一种果蝇唾腺染色体的制备方法，包括腺体剖取、解离、染色、压片等步骤。总的来说，现有技术采用的都是通过敲片和\或压片来获得的果蝇唾腺染色体永久装片，但是由于敲片和压片存在容易造成唾腺受力不均、唾腺常常伸展不良等等缺陷，所以现有技术不仅效果有待提高，而且操作起来也不是特别稳定。因此市场上需要一种更加科学有效的果蝇唾腺染色体永久装片的制作方法。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是克服现有技术的上述缺陷，提供一种效果好，易于掌握，操作稳定性高的果蝇唾腺染色体永久装片的制作方法。
[0005]为实现上述技术目的，本专利技术提供了一种果蝇唾腺染色体永久装片的制作方法，其特征在于包括如下步骤：
[0006]①
获得唾腺；
[0007]②
染色；
[0008]③
压片：盖上盖玻片，将镊子的两脚置于盖玻片上并位于唾腺两侧，镊子的两脚与载玻片之间的夹角a为30～60
°
，然后顺着镊子脚的方向斜向下用力，使得盖玻片在与载玻片贴紧的同时，还有相对于载玻片水平方向的滑动，当盖玻片贴紧载玻片，并且盖玻片下面多余的液体被挤出时，停止用力，盖玻片贴紧载玻片后，不得再有相对于载玻片的滑动；
[0009]④
永久装片的获得：将步骤4)得到的制片用常规方法制成永久装片。
[0010]优选地，在步骤
②
中，染色完成后，还需用卡诺氏固定液处理唾腺(1)0.5～3分钟。
[0011]本专利技术方法具有如下有益效果：效果好，获得的果蝇唾腺染色体标本分散、染色结果好；方法简单，易于掌握；无需敲片或压片，避免了唾腺受力不均导致常常伸展不良甚至被破坏等情况；操作过程中无需紧紧固定住盖玻片，从而克服了由于盖玻片稍微固定不好而导致的装片制作结果不理想的弊端，操作稳定性高；用卡诺氏固定液短暂处理唾腺，更易于唾腺的分散。
附图说明
[0012]图1为本专利技术方法操作示意图；
[0013]图2为本专利技术制作的果蝇唾腺染色体永久装片图；
[0014]图3为市售装片唾腺染色体图(10
×
100)；
[0015]图4为实施例3唾腺染色体图之一(10
×
100)；
[0016]图5为实施例3唾腺染色体图之二(10
×
100)；
[0017]图6为市售装片唾腺染色体图(10
×
40)；
[0018]图7为实施例3装片唾腺染色体图(10
×
40)。
具体实施方式
[0019]现结合附图和实施例详细说明本专利技术的技术方案。应理解，以下实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。在不背离本专利技术精神和实质的情况下，对本专利技术步骤或条件所作的修改或替换，均属于本专利技术的范围。
[0020]若未特别指明，实施例中所用技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。
[0021]在下列实施例中，果蝇唾腺染色体永久装片的制作方法均参见图1所示。
[0022]实施例1
[0023]①
获得唾腺：解剖果蝇三龄幼虫，获得唾腺1并去除脂肪体；再把载玻片2上唾腺1周围的杂物清理干净；
[0024]②
染色：对唾腺1进行常规染色；
[0025]③
压片：盖上盖玻片3，将镊子4的两脚置于盖玻片3上位于唾腺1两侧，镊子4的两脚与载玻片2之间的夹角a为30
°
，然后顺着镊子脚的方向斜向下用力，用力方向如图1箭头所示，使得盖玻片3在与载玻片2贴紧的同时，还有相对于载玻片2水平方向的滑动，当盖玻片3贴紧载玻片2，并且盖玻片3下面多余的染液被挤出时，停止用力，注意盖玻片3贴紧载玻片2后，不得相对于载玻片2再有滑动；
[0026]④
永久装片的获得：将步骤
③
得到的制片用常规方法制成永久装片。
[0027]实施例2
[0028]①
获得唾腺：解剖果蝇三龄幼虫，获得唾腺1并去除脂肪体；再把载玻片2上唾腺1周围的杂物清理干净；
[0029]②
染色：对唾腺1进行常规染色；染色完成后，清除多余染液，在唾腺1上滴加1滴卡诺氏固定液，固定0.5分钟；
[0030]③
压片：盖上盖玻片3，将镊子4的两脚置于盖玻片3上位于唾腺1两侧，镊子4的两
脚与载玻片2之间的夹角a为60
°
，然后顺着镊子脚的方向斜向下用力，用力方向如图1箭头所示，使得盖玻片3在与载玻片2贴紧的同时，还有相对于载玻片2水平方向的滑动，当盖玻片3贴紧载玻片2，并且盖玻片3下面多余的固定液被挤出时，停止用力，注意盖玻片3贴紧载玻片2后，不得相对于载玻片2再有滑动；
[0031]④
永久装片的获得：将步骤
③
得到的制片用常规方法制成永久装片。
[0032]实施例3
[0033]①
获得唾腺：解剖果蝇三龄幼虫，获得唾腺1并去除脂肪体；再把载玻片2上唾腺1周围的杂物清理干净；
[0034]②
染色：对唾腺1进行常规染色；染色完成后，清除多余染液，在唾腺1上滴加2滴卡诺氏固定液，固定2分钟；
[0035]③
压片：盖上盖玻片3，将镊子4的两脚置于盖玻片3上位于唾腺1两侧，镊子4本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种果蝇唾腺染色体永久装片的制作方法，其特征在于包括如下步骤：
①
获得唾腺(1)；
②
染色；
③
压片：盖上盖玻片(3)，将镊子(4)的两脚置于盖玻片(3)上并位于唾腺(1)两侧，镊子(4)的两脚与载玻片(2)之间的夹角a为30～60
°
，然后顺着镊子脚的方向斜向下用力，使得盖玻片(3)在与载玻片(2)贴紧的同时，还有相对于载玻片(2)水平方向...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐玲花，
申请(专利权)人：湖北理工学院，
类型：发明
国别省市：