拟穴青蟹抗菌多肽Sp-LECin及其应用制造技术

本发明专利技术公开了拟穴青蟹抗菌多肽Sp

【技术实现步骤摘要】
拟穴青蟹抗菌多肽Sp-LECin及其应用


[0001]本专利技术属于海洋分子生物学
，具体涉及多肽及其应用。

技术介绍

[0002]由于抗生素在医疗卫生和养殖业等领域的滥用，全球性抗生素污染问题日趋严峻，亟需开发新型抗耐药性细菌感染、可替代抗生素的治疗药物。抗菌肽(Antimicrobial Peptide，AMP)是存在于各种生物体中的一种重要的先天性免疫因子，具有抗细菌、真菌、病毒和寄生虫等免疫特性，因其不同于传统抗生素，不易产生耐药性，被科学家誉为“天然抗生素”。根据携带电荷性质的不同分为阳离子抗菌肽和阴离子抗菌肽，大多数抗菌肽属于阳离子抗菌肽，通常富含赖氨酸和精氨酸等带有正电荷及疏水性的氨基酸残基。抗菌肽在生物体内不仅具有抗菌功能，还能通过不同的途径调节机体的免疫反应，是机体先天性免疫系统中重要的组成部分。
[0003]目前抗菌肽库中收录的抗菌肽多数是基于已报道的抗菌肽序列、EST片段或结构域等分析获得的，新型抗菌肽的发现仍是少数。海洋动物由于其生存在复杂甚至极端的海洋环境，且以无脊椎动物居多，主要依靠先天性免疫系统来维持健康生存，抗菌肽是其先天性免疫的重要因子。甲壳动物等无脊椎动物缺乏获得性免疫，抗菌肽等免疫效应分子在外界病原微生物入侵时能够在体内迅速合成并释放以抵御感染，在无脊椎动物的先天性免疫系统中发挥重要的作用。
[0004]拟穴青蟹(Scylla paramamosain)，简称青蟹，是我国东南沿海重要的养殖品种，具有较高的营养价值和经济价值。目前在青蟹中已经发现并成功分离了多种具有广谱抗微生物活性的抗菌肽，如ALFs、crustins、源于组蛋白H2A的Sphistin、在血细胞中高表达的SpHyastatin以及在青蟹生殖免疫中起重要作用的scygonadin和SCY2等。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于克服现有技术的不足之处，提供了拟穴青蟹抗菌多肽Sp-LECin及其应用。基于前期建立的人工感染青蟹转录组数据库，从中获得一条抗菌多肽，将其命名为Sp-LECin。该多肽Sp-LECin具有抗细菌及抗真菌活性，抗菌效果好，抗菌谱广，杀菌速率快，其来源于甲壳动物，既可以应用于水产饲料添加剂，也可以研制成为防腐剂、抗菌防霉剂和抗菌药物等，具有广泛的应用前景。
[0006]本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案之一是：
[0007]一种拟穴青蟹抗菌多肽Sp-LECin，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，具体为：Gly-Cys-Val-Phe-Leu-Leu-Pro-Ala-Lys-Pro-His-Asn-Tyr-Lys-Lys-Val-Phe-Leu-Ser-Lys-Gly-Val。
[0008]所述拟穴青蟹抗菌多肽Sp-LECin由22个氨基酸组成，分子式为C
117
H
185
N
29
O
26
S1，分子量为2445.99道尔顿，其中含有4个带正电的氨基酸残基和0个带负电的氨基酸残基，根据氨基酸残基电荷预测该抗菌肽等电点为9.87，亲水性平均系数为0.25，是一种带有正电荷
的阳离子多肽。
[0009]所述拟穴青蟹抗菌多肽Sp-LECin可以以固体(如粉末等)、液体(如水溶液等)等多种形式应用。
[0010]本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案之二是：
[0011]上述的拟穴青蟹抗菌多肽Sp-LECin在制备抗菌剂中的应用。
[0012]本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案之三是：
[0013]一种抗菌剂，所述抗菌剂包括氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的拟穴青蟹抗菌多肽Sp-LECin。
[0014]本专利技术所述的“抗菌”指的是抑制或杀灭革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌或霉菌中的至少一种。所述革兰氏阳性菌包括金黄色葡萄球菌、耐药金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、李斯特菌、屎肠球菌或粪肠球菌中的至少一种。所述革兰氏阴性菌包括铜绿假单胞菌、大肠埃希氏菌、施氏假单胞菌、弗式志贺氏菌、荧光假单胞菌、鲍曼不动杆菌或耐药鲍曼不动杆菌中的至少一种。所述霉菌包括黑曲霉或尖孢镰孢中的至少一种；用于抑制或杀灭霉菌时产生防霉作用，也可称为防霉剂。本专利技术的拟穴青蟹抗菌多肽Sp-LECin可以用于杀灭屎肠球菌、鲍曼不动杆菌、临床耐药鲍曼不动杆菌等。
[0015]本专利技术所述的“抗菌剂”可以是药物形式的抗菌剂，即作为抗菌药物，也可以是非药物形式的抗菌剂，例如作为消毒产品、或作为纺织品、塑料等产品的添加剂等。
[0016]本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案之四是：
[0017]上述的拟穴青蟹抗菌多肽Sp-LECin在制备防腐剂中的应用。
[0018]本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案之五是：
[0019]一种防腐剂，所述防腐剂包括氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的拟穴青蟹抗菌多肽Sp-LECin。
[0020]本专利技术的Sp-LECin具有抑制或杀灭多种微生物如革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、霉菌等的抗菌防霉效果，因而也可作为防腐剂，防止由微生物引起的腐败变质等，可用于食品、医疗品、化妆品等领域。
[0021]本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案之六是：
[0022]上述的拟穴青蟹抗菌多肽Sp-LECin在制备水产饲料添加剂中的应用。
[0023]本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案之七是：
[0024]一种水产饲料添加剂，所述水产饲料添加剂包括氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的拟穴青蟹抗菌多肽Sp-LECin。
[0025]本专利技术的拟穴青蟹抗菌多肽Sp-LECin来源于甲壳动物且安全性好，可作为水产饲料添加剂使用，用于水产养殖中的抗菌。
[0026]本专利技术所涉及的设备、试剂、工艺、参数等，除有特别说明外，均为常规设备、试剂、工艺、参数等，不再作实施例。
[0027]本专利技术所列举的所有范围包括该范围内的所有点值。
[0028]本专利技术所述“大约”、“约”或“左右”等指的是所述范围或数值的
±
20％范围内。
[0029]本技术方案与
技术介绍
相比，它具有如下优点：
[0030]1、本专利技术的拟穴青蟹抗菌多肽Sp-LECin对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、霉菌均有抗菌效果。此外，Sp-LECin对正常哺乳动物细胞如人正常肝细胞和人肾上皮细胞不具有
细胞毒性作用。
[0031]2、本专利技术的拟穴青蟹抗菌多肽Sp-LECin，具有较强的抗细菌活性及抗真菌活性，抗菌效果好，抗菌谱广，杀菌速率快，其来源于甲壳动物，既可以应用于水产饲料添加剂，也可以研制成为防腐剂、抗菌防霉剂和抗菌药物等，具有广泛的应用前景。
附图说明
[0032]下面结合附图和实施例对本专利技术作进一步说明。
[0033]图1为拟穴青蟹抗菌多肽Sp-LECin对屎肠球菌(A)和鲍曼不动杆菌(B)的杀菌动力学图；在图1中，横坐标为时间(mi本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种拟穴青蟹抗菌多肽Sp-LECin，其特征在于：其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。2.一种权利要求1所述的拟穴青蟹抗菌多肽Sp-LECin在制备抗菌剂中的应用。3.一种抗菌剂，其特征在于：所述抗菌剂包括氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的拟穴青蟹抗菌多肽Sp-LECin。4.根据权利要求3所述的抗菌剂，其特征在于：所述抗菌指的是抑制或杀灭革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌或霉菌中的至少一种。5.根据权利要求4所述的抗菌剂，其特征在于：所述革兰氏阳性菌包括金黄色葡萄球菌、耐药金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、李斯特菌、屎肠球菌或粪肠球菌中的至少一种；所述革兰氏阴性菌包括铜绿假单胞菌、大肠埃希氏...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈芳奕，邱婉蕾，王克坚，彭会，
申请(专利权)人：厦门大学，
类型：发明
国别省市：