以CD28和4-1BB为共刺激结构域的靶向CD276的嵌合抗原受体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种以CD28和4

【技术实现步骤摘要】
以CD28和4
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1BB为共刺激结构域的靶向CD276的嵌合抗原受体及其应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及以CD28和4
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1BB为共刺激结构域的靶向CD276的嵌合抗原受体、嵌合抗原受体T细胞及制备方法和应用。

技术介绍

[0002]肝细胞癌是严重威胁人类健康的恶性肿瘤，目前针对肝细胞癌的治疗方法比如化疗、放疗、肝切除术、消融疗法、靶向疗法如索拉菲尼、抗体疗法如免疫检查点抑制剂、血管内皮生长因子受体抑制剂，这些治疗方法都不能取得良好的治疗效果。
[0003]嵌合抗原受体T细胞疗法是新型的免疫细胞治疗方法，具有特异性且高效的杀伤表达相应抗原的肿瘤细胞的功能。CD276又称为B7
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H3，是属于B7家族的一类跨膜蛋白。CD276在多种癌症中高表达包括肺腺癌、脑胶质瘤、神经母细胞瘤、胰腺癌、卵巢癌，在正常组织中几乎不表达。靶向CD276的单克隆抗体在多种肿瘤模型中介导肿瘤的有效清除。CD276在肝细胞癌高表达并且与肝癌的进展和肿瘤病人的不良预后相关。这提示，CD2本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种以CD28和4
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1BB为共刺激结构域的靶向CD276的嵌合抗原受体，其特征在于，该靶向CD276的嵌合抗原受体的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。2.根据权利要求1所述的以CD28和4
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1BB为共刺激结构域的靶向CD276的嵌合抗原受体，其特征在于，编码所述靶向CD276的嵌合抗原受体的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。3.根据权利要求1所述的以CD28和4
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1BB为共刺激结构域的靶向CD276的嵌合抗原受体，其特征在于，该靶向CD276的嵌合抗原受体包括从氨基端到羧基端依次连接的靶向CD276的单链抗体、胞外铰链区、跨膜区、共刺激结构域、信号转导区、P2A和荧光蛋白EGFP的氨基酸序列。4.根据权利要求3所述的以CD28和4
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1BB为共刺激结构域的靶向CD276的嵌合抗原受体，其特征在于，所述靶向CD276的单链抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示，编码该靶向CD276的单链抗体的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。5.根据权利要求3所述的以CD28和4
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1BB为共刺激结构域的靶向CD276的嵌合抗原受体，其特征在于，所述胞外铰链区为CD8α铰链区，其氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示，编码该CD8α铰链区的核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示。6.根据权利要求3所述的以CD28和4
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1BB为共刺激结构域的靶向CD276的嵌合抗原受体，其特征在于，所述跨膜区为CD8α跨膜区，其氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示，编码该CD8α跨膜区的核苷酸序列如SEQ ID NO:8所示。7.根据权利要求3所述的以CD28和4
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1BB为共刺激结构域的靶向CD276的嵌合抗原受体，其特征在于，所述共刺激结构域由CD28胞内区、4
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1BB胞内区依次串联构成；其中：所述CD28胞内区的的氨基酸序列如SEQ ID NO:9所示，编码该CD28胞内区的核苷酸序列如SEQ ID NO:10所示；所述4
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1BB胞内区的氨基酸序列如SEQ ID NO:11所示，编码该4
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1BB胞内区的核苷酸序列如SEQ ID NO:12所示。8.根据权利要求3所述的以CD28和4
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1BB为共刺激结构域的靶向CD276的嵌合抗原受体，其特征在于，所述信号转导区为CD3ζ胞内区，该CD3ζ胞内区的氨基酸序列如SEQ ID NO:13所示；编码该CD3ζ胞内区的核苷酸序列如SEQ ID NO:14所示。9.根据权利要求3所述的以CD28和4
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1BB为共刺激结构域的靶向CD276的嵌合抗原受体，其特征在于，所述P2A氨基酸序列如SEQ ID NO:15所示；编码P2A的核苷酸序列如SEQ ID NO:16所示；所述荧光蛋白EGFP的氨基酸序列如SEQ ID NO:17所示；编码荧光蛋白EGFP的核苷酸序列如SEQ ID NO:18所示。10.一种靶向CD276的嵌合抗原受体T细胞，其特征在于，包括权利要求1～9中任意一项所述的以CD28和4
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1BB为共刺激结构域的靶向CD276的嵌合抗原受体。11.一...

【专利技术属性】
技术研发人员：万晓春，曹国政，
申请(专利权)人：中国科学院深圳理工大学筹，
类型：发明
国别省市：