本申请涉及一种或多种融合蛋白,其包含SARS
【技术实现步骤摘要】
融合蛋白及其应用
[0001]本申请涉及生物医药领域,具体的涉及包含SARS
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CoV
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2刺突蛋白(S蛋白)的受体结合结构域(RBD)或其功能活性片段和/或SARS
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CoV
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2刺突蛋白(S蛋白)N端结构域(NTD)或其功能活性片段的融合蛋白、组合物及其应用。
技术介绍
[0002]目前,控制新冠疫情的方式是实施检疫、隔离和保持物理距离。因此迫切需要针对COVID
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19的有效疫苗,以减轻与SARS
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CoV
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2感染相关的死亡率和发病率的巨大负担。
[0003]SARS
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CoV
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2刺突蛋白(S蛋白)的受体结合结构域(RBD)被认为是诱导机体产生中和抗体的最主要的抗原靶区域。RBD作为疫苗能够将机体刺激产生的中和抗体更加聚焦在针对病毒的受体结合,可以提高疫苗的免疫原性和免疫效率。
[0004]SARS
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CoV
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2刺突蛋白(S蛋白)N端结构域(NTD)为病毒S蛋白N端的一段序列,其可与宿主细胞的蛋白或糖蛋白结合,介导病毒入侵宿主细胞,故该段区域可能包含诱导中和抗体产生的表位。
技术实现思路
[0005]本申请提供了一种包含SARS
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CoV
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2刺突蛋白(S蛋白)的受体结合结构域(RBD)或其功能活性片段和/或SARS
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CoV
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2刺突蛋白(S蛋白)N端结构域(NTD)或其功能活性片段的融合蛋白、组合物及其应用,其具有下列性质的一种或多种:1)融合蛋白具有免疫原性;2)包含融合蛋白的COVID
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19亚单位疫苗免疫原性更强,能诱导产生更多的中和抗体。
[0006]一方面,本申请提供了一种融合蛋白,其包含:1)SARS
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CoV
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2刺突蛋白(S蛋白)的受体结合结构域(RBD)或其功能活性片段;以及2)一种或多种选自下组的多肽:P2或其功能活性片段,foldon结构域或其功能活性片段,铁蛋白或其功能活性片段,以及乙肝表面抗原(HBsAg)或其功能活性片段。
[0007]在某些实施方式中,所述RBD源自SARS
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CoV
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2野生型或其突变体。
[0008]在某些实施方式中,所述SARS
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CoV
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2突变体选自下组中的任一种:Gamma突变体、Beta突变体、Delta突变体和Alpha突变体。
[0009]在某些实施方式中,所述RBD与野生型SAR
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CoV
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2的RBD相比,在选自下组的一个或多个氨基酸位点有突变:K417、L452、T478、E484和N501。
[0010]在某些实施方式中,所述RBD包含氨基酸突变K417T/N、L452R、T478K、E484K和N501Y的一种或多种。
[0011]在某些实施方式中,所述RBD包含K417T、E484K和N501Y氨基酸突变。
[0012]在某些实施方式中,所述RBD包含K417N、E484K和N501Y氨基酸突变。
[0013]在某些实施方式中,所述RBD包含SEQ ID NO:18、19、76、83、97
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108中任一项所示的氨基酸序列。
[0014]在某些实施方式中,所述P2或其功能活性片段包含破伤风毒素的表位肽。
[0015]在某些实施方式中,所述破伤风毒素的表位肽包含SEQ ID NO:64
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66中任一项所示的氨基酸序列。
[0016]在某些实施方式中,所述P2或其功能活性片段与所述RBD或其功能活性片段的N端或C端直接或间接地相连。
[0017]在某些实施方式中,所述RBD或其功能活性片段与所述P2或其功能活性片段在框内融合。
[0018]在某些实施方式中,所述foldon结构域或其功能活性片段包含噬菌体T4纤维蛋白C末端的氨基酸残基。
[0019]在某些实施方式中,所述foldon结构域或其功能活性片段包含SEQ ID NO:67
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69和78中任一项所示的氨基酸序列。
[0020]在某些实施方式中,所述foldon结构域或其功能活性片段与所述RBD或其功能活性片段的N端或C端直接或间接地相连。
[0021]在某些实施方式中,所述RBD或其功能活性片段与所述foldon结构域或其功能活性片段在框内融合。
[0022]在某些实施方式中,所述铁蛋白或其功能活性片段包含粉纹夜蛾铁蛋白或其功能活性片段。
[0023]在某些实施方式中,所述粉纹夜蛾铁蛋白或其功能活性片段包括粉纹夜蛾铁蛋白的重链或轻链。
[0024]在某些实施方式中,所述粉纹夜蛾铁蛋白的重链包含SEQ ID NO:70所示的氨基酸序列。
[0025]在某些实施方式中,所述粉纹夜蛾铁蛋白的轻链包含SEQ ID NO:71所示的氨基酸序列。
[0026]在某些实施方式中,所述铁蛋白或其功能活性片段包含幽门螺杆菌铁蛋白或其功能活性片段。
[0027]在某些实施方式中,所述铁蛋白或其功能活性片段包含SEQ ID NO:70
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72中任一项所示的氨基酸序列。
[0028]在某些实施方式中,所述铁蛋白或其功能活性片段与所述RBD或其功能活性片段的N端或C端直接或间接地相连。
[0029]在某些实施方式中,所述RBD或其功能活性片段与所述铁蛋白或其功能活性片段在框内融合。
[0030]在某些实施方式中,所述乙肝表面抗原或其功能活性片段包含SEQ ID NO:73所示的氨基酸序列。
[0031]在某些实施方式中,所述乙肝表面抗原或其功能活性片段与所述RBD或其功能活性片段的N端或C端直接或间接地相连。
[0032]在某些实施方式中,所述RBD或其功能活性片段与所述乙肝表面抗原或其功能活性片段在框内融合。
[0033]在某些实施方式中,所述的融合蛋白包含SEQ ID NO:1
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17、80和86中任一项所示的氨基酸序列。
[0034]另一方面,本申请提供了一种融合蛋白,其包含:1)SARS
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CoV
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2刺突蛋白(S蛋白)N
端结构域(NTD)或其功能活性片段;以及2)一种或多种选自下组的多肽:P2或其功能活性片段,foldon结构域或其功能活性片段,铁蛋白或其功能活性片段,以及乙肝表面抗原(HBsAg)或其功能活性片段。
[0035]在某些实施方式中,所述NTD源自SARS
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CoV
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2野生型或其突变体。
[0036]在某些实施方式中,所述SARS
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【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.融合蛋白,其包含:1)SARS
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CoV
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2刺突蛋白(S蛋白)N端结构域(NTD)或其功能活性片段;以及2)一种或多种选自下组的多肽:P2或其功能活性片段,foldon结构域或其功能活性片段,铁蛋白或其功能活性片段,以及乙肝表面抗原(HBsAg)或其功能活性片段。2.根据权利要求1所述的融合蛋白,其中所述NTD源自SARS
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CoV
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2野生型或其突变体S蛋白的NTD。3.根据权利要求2所述的融合蛋白,其中所述SAR
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CoV
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2突变体选自下组中的任一种:Gamma突变体、Beta突变体、Delta突变体和Alpha突变体。4.根据权利要求1
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3中任一项所述的融合蛋白,其中所述NTD包含在选自下组的一个或多个氨基酸位点的突变:L18、T19、T20、P26、D80、D138、R190、D215、L242
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244和R246。5.根据权利要求1
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【专利技术属性】
技术研发人员:朱凤才,于佳平,姚文荣,袁楚晓,吴双,张岩岩,胡颖嵩,郭喜玲,张岭,夏丽,张黎,李靖欣,潘红星,陈健平,刘勇,
申请(专利权)人:江苏瑞科生物技术股份有限公司北京安百胜生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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