甘露聚糖酶混合物的制备方法及其在魔芋饮品中的应用技术

本发明专利技术提供了一种甘露聚糖酶混合物的制备方法及其在魔芋饮品中的应用，本发明专利技术利用基因工程的手段获得了两种不同水解特性的甘露聚糖酶基因，并将两种基因串联在毕赤酵母表达载体上，通过高密度发酵，获得水解能力强，水解后甘露寡糖2

【技术实现步骤摘要】
甘露聚糖酶混合物的制备方法及其在魔芋饮品中的应用


[0001]本专利技术涉及基因工程及功能性食品制备领域，具体涉及一种甘露聚糖酶混合物的制备方法及其在魔芋饮品中的应用。

技术介绍

[0002]葡甘聚糖是一种可溶性半纤维素，是人体第七营养素纤维素中的优品。葡甘聚糖具有水溶、持水增稠、稳定、悬浮、胶凝、粘接、成膜等多种独特的理化性质而使它具有广泛的应用价值和开发价值。
[0003]葡甘聚糖是在普通的魔芋精粉的基础上进行加工提取而得的一种新产品，作为膳食纤维，不被吸收，不含有热量，有饱腹感，能减少和延缓葡萄糖的吸收，是糖尿病的良好辅助药物，可以预防肥胖和缓慢减肥，具有很好的食品保健功能，目前市面上已经有利用葡甘聚糖制备的功能食品和美妆产品。
[0004]甘露低聚糖是由2
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10个单糖分子通过糖苷键连接而成的低度聚合糖，是一种非消化性寡糖。大量研究发现其具有众多的生理活性作用：调节宿主肠道微生态环境，抑制有害菌并促进肠道微生物菌群的平衡，其促益生菌的效果高达低聚木糖的50～100倍；改善脂质、血糖代谢，降低血脂和胆固醇本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种甘露聚糖酶混合物，其特征在于：该甘露聚糖酶混合物中包括核苷酸序列 SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2。2.权利要求1所述甘露聚糖酶混合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将来源于Aspergillus niger CBS 513.88的甘露聚糖酶去掉前段的20个氨基酸的信号肽后的序列SEQ ID NO.1和来源于Humicola insolens Y1的甘露聚糖酶序列SEQ ID NO.2，利用DNAWORKS工具进行优化，优化后的基因全部由毕赤酵母偏爱密码组成；通过基因工程的手段，将具有不同水解功能，但是酶学性质兼容的两个基因装在同一个表达载体上，并将上述两个基因整合到毕赤酵母基因组中，获得稳定表达甘露聚糖酶的工程菌种，通过甲醇诱导获得两种不同水解功能的甘露聚糖酶混合物。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述的表达载体为毕赤酵母表达载体pHBM905BDM，将SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2分别融合在毕赤酵母表达载体上，得到质粒pHBM905BDM
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Man1和pHBM905BDM
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Man2。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：利用限制性内切酶BamHⅠ、XbaⅠ双酶切pHBM905BDM
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Man1，获得含有基因序列SEQ ID NO.1的表达框；用SPeⅠ、BamHⅠ双酶切pHBM905BDM
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Man2，获得含有基因序列SEQ...

【专利技术属性】
技术研发人员：王亚平，余墨燚，余文杰，
申请(专利权)人：湖北大学，
类型：发明
国别省市：