本发明专利技术公开一种蜜蜂工蜂血淋巴的提取方法及装置，提取方法包括预处理，取蜜蜂工蜂进行预处理；提取血淋巴，使用血淋巴提取装置对完成预处理的蜜蜂工蜂进行血淋巴提取；提纯血淋巴，对提取的血淋巴进行提纯处理；血淋巴保存，对提纯后的血淋巴进行低温保存，提取装置包括包括抽气筒，抽气筒的进气口连通有抽气软管一端，抽气软管另一端连通有低温收集部，低温收集部还连通有集液软管一端，集液软管另一端连通有集液针头尾端，解决了现有蜜蜂血淋巴提取技术中操作步骤繁琐复杂、耗时长易污染、收集后血淋巴质量不纯含量少的问题。收集后血淋巴质量不纯含量少的问题。收集后血淋巴质量不纯含量少的问题。
【技术实现步骤摘要】
一种蜜蜂工蜂血淋巴的提取方法及装置
[0001]本专利技术属于昆虫生理生化领域，特别是涉及一种蜜蜂工蜂血淋巴的提取方法及装置。
技术介绍
[0002]昆虫血淋巴是血液和淋巴液的混合物，是代谢过程中各种物质储存和交换的场所，在调节温度和先天免疫等方面发挥重要作用。蜜蜂与其他昆虫一样，体腔内充满了流动的血液，在整个体腔内的循环是开放式的，是机体防御免疫功能的重要组成部分。蜜蜂的血液没有颜色，由白血细胞、变形细胞和带酸性的血浆组成，能够实时的反映机体的生理状态，已成为蜜蜂生物学研究中最为关键的材料之一。但是，一方面由于蜜蜂的个体较小，血淋巴含量少，离体后容易发生凝血和黑化反应，另一方面蜜蜂属于全变态昆虫，每个发育阶段的形态完全不相同，后续的实验研究往往需要采集各个发育期血淋巴的样本，同一种提取方法不能适用于所有发育期血淋巴的采集，基于以上原因给蜜蜂血淋巴的采集工作带来很大困难。
[0003]现有技术中的血淋巴的收集方法有很多种，但是这些方法各有利弊，有的操作步骤繁琐复杂、有的耗时长易污染、有的收集后血淋巴质量不纯含量少等等，为后续实验造成困难和不便。
技术实现思路
[0004]本专利技术的目的是提供一种蜜蜂工蜂血淋巴的提取方法及装置，以解决上述问题，达到最大程度的保证提取的血淋巴量和纯度的目的。
[0005]为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：一种蜜蜂工蜂血淋巴的提取方法，包括以下步骤：
[0006]预处理，取蜜蜂工蜂进行预处理；
[0007]提取血淋巴，使用血淋巴提取装置对完成预处理的所述蜜蜂工蜂进行血淋巴提取；
[0008]提纯血淋巴，对提取的血淋巴进行提纯处理；
[0009]血淋巴保存，对提纯后的血淋巴进行低温保存，用于下一步实验。
[0010]优选的，所述蜜蜂工蜂包括5日龄蜜蜂工蜂幼虫、5日龄蜜蜂工蜂蛹、蜜蜂工蜂成年蜂；
[0011]所述5日龄蜜蜂工蜂幼虫、5日龄蜜蜂工蜂蛹的预处理方式为无菌处理，使用无菌生理盐水对所述5日龄蜜蜂工蜂幼虫、5日龄蜜蜂工蜂蛹进行清洗，清洗完成后使用消毒的滤纸吸干所述5日龄蜜蜂工蜂幼虫、5日龄蜜蜂工蜂蛹体表的水分；
[0012]所述蜜蜂工蜂成年蜂的预处理方式为冷冻麻醉处理，取羽化出房后的成年工蜂，放置在冰箱冷冻层内冷冻麻醉3
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5min，待所述成年工蜂停止运动后，剪去翅膀和足并固定。
[0013]优选的，提取所述5日龄蜜蜂工蜂幼虫的血淋巴：使所述5日龄蜜蜂工蜂幼虫腹面
朝上，并固定住头尾两端，绷紧表皮，将所述血淋巴提取装置刺入所述5日龄蜜蜂工蜂幼虫头部位置下方，吸取血淋巴；
[0014]提取所述5日龄蜜蜂工蜂蛹的血淋巴：使所述5日龄蜜蜂工蜂蛹背面朝上，并固定住头尾两端，将所述血淋巴提取装置刺入所述5日龄蜜蜂工蜂蛹3
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4节腹节间膜，吸取血淋巴；
[0015]提取所述成年工蜂的血淋巴：将所述成年工蜂的一只触角从根部拽下，用手指按摩所述成年工蜂胸腹部促进血淋巴从触角根部涌出，使用所述血淋巴提取装置吸取血淋巴。
[0016]优选的，所述提纯血淋巴过程如下：将提取的血淋巴液转移至1.5ml超滤离心管内洗涤1次，2500r/min离心9
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10min，离心处理完成后留取底层的淡黄色澄清液体。
[0017]优选的，所述血淋巴保存：将提取提纯后的血淋巴放入冰箱进行冷冻保存。
[0018]一种用于蜜蜂工蜂血淋巴提取用针头的制作方法，取一支玻璃毛细管，手捏所述玻璃毛细管一端，镊子夹住所述玻璃毛细管另一端，选取所述玻璃毛细管中间靠近镊子一端的部位置于酒精灯上加热，同时手捏一端向外拉扯，待所述玻璃毛细管融化并拉断后，保留手捏一端的所述玻璃毛细管，将所述玻璃毛细管的拉断处的尖端切割平整，使其有吸入口，得到所述针头。
[0019]一种蜜蜂工蜂血淋巴提取方法的提取装置，包括抽气筒，所述抽气筒的进气口连通有抽气软管一端，所述抽气软管另一端连通有低温收集部，所述低温收集部还连通有集液软管一端，所述集液软管另一端连通有集液针头尾端，所述集液针头为所述针头。
[0020]优选的，所述集液针头包括与所述集液软管连通的收集段，所述收集段另一端连通有过渡段一端，所述过渡段另一端连通有集液尖端。
[0021]优选的，所述低温收集部包括集液管，所述集液管的外侧套设有冰浴管，所述集液管、所述冰浴管的顶端为开口结构，所述冰浴管侧壁为中空结构，所述集液管、所述冰浴管的顶端设有密封连接部。
[0022]优选的，所述密封连接部包括密封盖，底部与所述集液管、所述冰浴管的顶端螺纹连接，所述密封盖上开设有第一通孔和第二通孔，所述第一通孔与所述抽气软管连通，所述第二通孔与所述集液软管连通，所述密封盖顶端一侧铰接有密封胶条，所述密封胶条上设置有两个密封胶头，两个所述密封胶头分别与所述第一通孔和所述第二通孔相对应。
[0023]本专利技术具有如下技术效果：
[0024]1、本专利技术提供了一套涉及蜜蜂工蜂各个发育时期血淋巴的提取方法：蜜蜂属于全变态昆虫，每个发育阶段的形态完全不相同，后续的实验研究往往需要采集各个发育期血淋巴的样本。因此，本专利技术提供了一种蜜蜂幼虫期、蛹期和成蜂期血淋巴采集的可靠方法，为满足后续实验研究提供保障和便利。
[0025]2、本专利技术能最大程度的保证提取的血量和纯度：蜜蜂属于小型昆虫，体内血量较少，而且血液循环系统属于开放式，取血极其困难，极易损伤内部器官结构，造成收集的血淋巴不纯或被污染。本专利技术提供的提取方法可以快速获得大量纯净无污染未黑化的蜜蜂工蜂血淋巴液。
附图说明
[0026]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0027]图1为本专利技术提取装置的剖视图；
[0028]图2为图1中A的局部放大图；
[0029]图3为图1中B的局部放大图。
[0030]其中，1、抽气筒；2、抽气软管；3、集液软管；4、集液针头；5、冰浴管；6、集液管；7、密封盖；8、密封胶条；9、密封胶头；10、第一螺纹槽；11、第一螺纹；12、第二螺纹槽；13、第二螺纹；41、收集段；42、过渡段；43、集液尖端。
具体实施方式
[0031]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0032]为使本专利技术的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合附图和具体实施方式对本专利技术作进一步详细的说明。
[0033]参照附图1
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3，本专利技术提供本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种蜜蜂工蜂血淋巴的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：预处理，取蜜蜂工蜂进行预处理；提取血淋巴，使用血淋巴提取装置对完成预处理的所述蜜蜂工蜂进行血淋巴提取；提纯血淋巴，对提取的血淋巴进行提纯处理；血淋巴保存，对提纯后的血淋巴进行低温保存，用于下一步实验。2.根据权利要求1所述的一种蜜蜂工蜂血淋巴的提取方法，其特征在于，所述蜜蜂工蜂包括5日龄蜜蜂工蜂幼虫、5日龄蜜蜂工蜂蛹、蜜蜂工蜂成年蜂；所述5日龄蜜蜂工蜂幼虫、5日龄蜜蜂工蜂蛹的预处理方式为无菌处理，使用无菌生理盐水对所述5日龄蜜蜂工蜂幼虫、5日龄蜜蜂工蜂蛹进行清洗，清洗完成后使用消毒的滤纸吸干所述5日龄蜜蜂工蜂幼虫、5日龄蜜蜂工蜂蛹体表的水分；所述蜜蜂工蜂成年蜂的预处理方式为冷冻麻醉处理，取羽化出房后的成年工蜂，放置在冰箱冷冻层内冷冻麻醉3
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5min，待所述成年工蜂停止运动后，剪去翅膀和足并固定。3.根据权利要求2所述的一种蜜蜂工蜂血淋巴的提取方法，其特征在于，提取所述5日龄蜜蜂工蜂幼虫的血淋巴：使所述5日龄蜜蜂工蜂幼虫腹面朝上，并固定住头尾两端，绷紧表皮，将所述血淋巴提取装置刺入所述5日龄蜜蜂工蜂幼虫头部位置下方，吸取血淋巴；提取所述5日龄蜜蜂工蜂蛹的血淋巴：使所述5日龄蜜蜂工蜂蛹背面朝上，并固定住头尾两端，将所述血淋巴提取装置刺入所述5日龄蜜蜂工蜂蛹3
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4节腹节间膜，吸取血淋巴；提取所述成年工蜂的血淋巴：将所述成年工蜂的一只触角从根部拽下，用手指按摩所述成年工蜂胸腹部促进血淋巴从触角根部涌出，使用所述血淋巴提取装置吸取血淋巴。4.根据权利要求1所述的一种蜜蜂工蜂血淋巴的提取方法，其特征在于，所述提纯血淋巴过程如下：将提取的血淋巴液转移至1.5ml超滤离心管内洗涤1次，2500r/min离心9
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10min，离心处理完成后留取底层的淡黄色澄清液体。5.根据权利要求1所述的一种蜜蜂工蜂血淋巴的提取方法，其特征在于，所述血淋巴保存：将提取提...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘楠楠，高洪学，李志勇，庄明亮，徐凯，李剑飞，王海全，郝京玉，王海生，张振良，王鑫淼，
申请(专利权)人：吉林省养蜂科学研究所吉林省蜂产品质量管理监督站，吉林省蜜蜂遗传资源基因保护中心，
类型：发明
国别省市：
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