用于预防和/或治疗猪腹泻病的蛋黄抗体、制剂及其制备方法技术

本发明专利技术提供了一种用于预防和/或治疗猪腹泻病的蛋黄抗体、制剂及其制备方法，所述方法包括：将猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒和猪丁型冠状病毒分别超滤浓缩后经BEI灭活，获得猪传染性胃肠炎病毒抗原、猪流行性腹泻病毒抗原和猪丁型冠状病毒抗原，并按体积比为(0.8～1.2)：(0.8～1.2)：(0.8～1.2)混匀，后与佐剂混匀，获得油包水型疫苗，免疫商品蛋鸡，收集所产鸡蛋；清洗并分离收集蛋黄液，后在所述蛋黄液中提取获得蛋黄抗体。所述蛋黄抗体对猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪丁型冠状病毒的中和抗体效价均不低于1:1000；一剂多防多治、可防可治，应用范围广。应用范围广。应用范围广。

【技术实现步骤摘要】
用于预防和/或治疗猪腹泻病的蛋黄抗体、制剂及其制备方法


[0001]本专利技术属于兽用生物制品
，涉及一种用于预防和/或治疗猪腹泻病的蛋黄抗体、制剂及其制备方法。

技术介绍

[0002]猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻是猪的常见的急性、接触性肠道传染病，各年龄段猪群均可感染，以呕吐和腹泻为主要症状，日龄越小的仔猪发病后死亡率越高，最高可达100％，其病原分别为猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒。猪丁型冠状病毒感染可引起仔猪呕吐、严重腹泻、食欲下降等症状，严重影响猪群的生长发育。此三种疾病可造成猪场严重的经济损失，除加强饲养管理外，常用的预防方法为疫苗免疫，可选的市售疫苗种类很多，免疫母猪保护仔猪或免疫仔猪等防疫方案也不尽相同。仔猪腹泻治疗方案多为加强护理、对症用药。猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻、猪丁型冠状病毒感染是仔猪阶段常见的腹泻性疾病，可引起仔猪死亡或生产性能下降。生猪生产中会用到多种疫苗进行防疫，一旦发病，主要以对症治疗为主，无特效药品。
[0003]兽用生物制品中常用的治疗性抗体多为蛋黄抗体。蛋黄抗体是将抗原制成疫苗免疫产蛋鸡，采集针对该病具有中和能力的蛋黄，经过适当处理，接种易感动物，用于预防或治疗该病。然而现有技术中尚没有效价高的用于预防和/或治疗猪所述3种常见的腹泻性疾病的蛋黄抗体。
[0004]因此，急需开发一种效价高的用于预防和/或治疗猪所述常见腹泻性疾病的蛋黄抗体、制剂及其制备方法。

技术实现思路

[0005]为了解决所述技术问题，本专利技术提供了一种用于预防和/或治疗猪腹泻病的蛋黄抗体、制剂及其制备方法，制备的蛋黄抗体对猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪丁型冠状病毒的中和抗体效价，结果分别为1:1218、1:1218、1:1024；一剂多防、一剂多治、可防可治，应用范围广。
[0006]在本专利技术的第一方面，提供了一种用于预防和/或治疗猪腹泻病的蛋黄抗体的制备方法，所述方法包括：
[0007]将猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒和猪丁型冠状病毒分别超滤浓缩后经BEI灭活，获得猪传染性胃肠炎病毒抗原、猪流行性腹泻病毒抗原和猪丁型冠状病毒抗原；
[0008]将所述猪传染性胃肠炎病毒抗原、所述猪流行性腹泻病毒抗原和所述猪丁型冠状病毒抗原按体积比为(0.8～1.2)：(0.8～1.2)：(0.8～1.2)混匀获得复合抗原液；后将所述复合抗原液与佐剂混匀，获得油包水型疫苗；
[0009]将所述油包水型疫苗免疫商品蛋鸡，收集所产鸡蛋；
[0010]清洗所述鸡蛋并分离收集蛋黄液，后在所述蛋黄液中提取获得蛋黄抗体。
[0011]进一步地，所述BEI的终浓度为4～6mM。
[0012]进一步地，所述将所述复合抗原液与佐剂混匀，获得油包水型疫苗，包括：
[0013]将以重量份数计的95～97份所述复合抗原液与3～5份灭菌吐温
‑
80溶解混匀，获得水相；
[0014]将以重量份数计的93～95份注射用白油与5～7份司本
‑
80混匀，加热条件下边加边搅拌至透明为止，并高压灭菌，获得油相；
[0015]将所述水相与所述油相以体积比为1：(1.5～2.5)混匀并乳化，获得油包水型疫苗。
[0016]进一步地，所述油包水型疫苗免疫商品蛋鸡的次数为4～5次。
[0017]进一步地，所述猪传染性胃肠炎病毒抗原、所述猪流行性腹泻病毒抗原和所述猪丁型冠状病毒抗原的体积比为1：1：1。
[0018]进一步地，每2周抽样检测所述收集的所产鸡蛋的蛋黄对猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪丁型冠状病毒的中和抗体效价，中和抗体效价均≥1：512时收集蛋黄液。
[0019]进一步地，所述蛋黄液中提取获得蛋黄抗体，包括：
[0020]将所述蛋黄液稀释和灭活，获得灭活蛋黄液；
[0021]将所述灭活蛋黄液加入5～7倍体积pH为4.5～5.5的酸化水进行酸化，后进行第一固液分离，获得第一液体；
[0022]将所述第一液体灭活后，进行第二固液分离，获得第二液体；
[0023]将所述第二液体依次进行浓缩、过滤除菌和灭活，获得蛋黄抗体。
[0024]在本专利技术的第二方面，本专利技术提供了采用所述方法制备获得的用于预防和/或治疗猪腹泻病的蛋黄抗体。
[0025]在本专利技术的第三方面，提供了一种用于预防和/或治疗猪腹泻病的蛋黄抗体制剂，包括所述的蛋黄抗体。
[0026]本专利技术实施例中的一个或多个技术方案，至少具有如下技术效果或优点：
[0027]本专利技术提供的一种用于预防和/或治疗猪腹泻病的蛋黄抗体、制剂及其制备方法，本专利技术实施例中制备的蛋黄抗体对猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪丁型冠状病毒的中和抗体效价，结果分别为1:1218、1:1218、1:1024；一剂多防、一剂多治、可防可治，应用范围广。根据具体情况注射或口服给药方式，使用方法灵活。特别是1
‑
3日龄口服给药，预防仔猪发病，使易感期、死亡高风险期的仔猪获得有效保护。
附图说明
[0028]为了更清楚地说明本专利技术实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作一简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。
[0029]图1为本专利技术提供的一种用于预防和/或治疗猪腹泻病的蛋黄抗体的制备方法的流程图。
具体实施方式
[0030]下文将结合具体实施方式和实施例，具体阐述本专利技术，本专利技术的优点和各种效果将由此更加清楚地呈现。本领域技术人员应理解，这些具体实施方式和实施例是用于说明本专利技术，而非限制本专利技术。
[0031]在整个说明书中，除非另有特别说明，本文使用的术语应理解为如本领域中通常所使用的含义。因此，除非另有定义，本文使用的所有技术和科学术语具有与本专利技术所属领域技术人员的一般理解相同的含义。若存在矛盾，本说明书优先。
[0032]除非另有特别说明，本专利技术中用到的各种原材料、试剂、仪器和设备等，均可通过市场购买得到或者可通过现有方法制备得到。
[0033]本专利技术提供的一种用于预防和/或治疗猪腹泻病的蛋黄抗体、制剂及其制备方法，总体思路如下：
[0034]现有技术中，禽用蛋黄抗体的制备工艺中使用的疫苗抗原均以甲醛作为灭活剂，抗体效价会达到最高。
[0035]然而本申请的将猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒和猪丁型冠状病毒分别超滤浓缩后经甲醛灭活，获得猪传染性胃肠炎病毒抗原、猪流行性腹泻病毒抗原和猪丁型冠状病毒抗原的效价不高。
[0036]本申请专利技术人对此分析：甲醛作为灭活剂在禽用灭活疫苗中普遍使用，是基于其具有的以下优势。首先，其灭活效果确实；其次，甲醛可灭活鸡胚生产抗原中引入的少量细菌，提高疫苗安全性；再者，禽类对甲醛有一定的耐受性，产生的副反应在可接受的范围内。甲醛作为灭活剂本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于预防和/或治疗猪腹泻病的蛋黄抗体的制备方法，其特征在于，所述方法包括：将猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒和猪丁型冠状病毒分别超滤浓缩后经BEI灭活，获得猪传染性胃肠炎病毒抗原、猪流行性腹泻病毒抗原和猪丁型冠状病毒抗原；将所述猪传染性胃肠炎病毒抗原、所述猪流行性腹泻病毒抗原和所述猪丁型冠状病毒抗原按体积比为(0.8～1.2)：(0.8～1.2)：(0.8～1.2)混匀获得复合抗原液；后将所述复合抗原液与佐剂混匀，获得油包水型疫苗；将所述油包水型疫苗免疫商品蛋鸡，收集所产鸡蛋；清洗所述鸡蛋并分离收集蛋黄液，后在所述蛋黄液中提取获得蛋黄抗体。2.根据权利要求1所述的一种用于预防和/或治疗猪腹泻病的蛋黄抗体的制备方法，其特征在于，所述BEI的终浓度为4～6mM。3.根据权利要求1所述的一种用于预防和/或治疗猪腹泻病的蛋黄抗体的制备方法，其特征在于，所述将所述复合抗原液与佐剂混匀，获得油包水型疫苗，包括：将以重量份数计的95～97份所述复合抗原液与3～5份灭菌吐温
‑
80溶解混匀，获得水相；将以重量份数计的93～95份注射用白油与5～7份司本
‑
80混匀，加热条件下边加边搅拌至透明为止，并高压灭菌，获得油相；将所述水相与所述油相以体积比为1：(1.5～2.5)混匀并乳化，获得油包水型疫...

【专利技术属性】
技术研发人员：李晶梅，谢红玲，朱薇，石宝兰，漆世华，王焕君，于义娟，柏娇，张飞雁，薛霜，王碧群，秦红刚，韩兴，秦涛，闵娟娟，程敏华，张治中，周平，
申请(专利权)人：国药集团动物保健股份有限公司，
类型：发明
国别省市：