本发明专利技术公开了一种降低黄酒中尿素和氨基甲酸乙酯积累的菌株及其应用，属于酿酒及食品安全领域。本发明专利技术提供了一株酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)G2，已于2021年11月02日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 20211359；该酿酒酵母可降解尿素，和同时可产氨基甲酸乙酯水解酶的发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)d6，同时添加到黄酒发酵中，在经过前酵和后酵阶段，最终检测发酵结束后的黄酒中的尿素和氨基甲酸乙酯含量均比对照组有明显的降低，降低量分别为70.06和68.73％。70.06和68.73％。70.06和68.73％。
【技术实现步骤摘要】
一种降低黄酒中尿素和氨基甲酸乙酯积累的菌株及其应用
[0001]本专利技术涉及一种降低黄酒中尿素和氨基甲酸乙酯积累的菌株及其应用，属于酿酒及食品安全领域。
技术介绍
[0002]氨基甲酸乙酯(ethyl carbamate,EC)是广泛存在于发酵食品中的一种天然物质，由于EC被认为是一种对人类具有潜在遗传毒性和致癌性的化合物，已被国际癌症研究机构(IARC)列为2A类致癌物。许多发酵食品(如面包、酱油、泡菜)和发酵酒精饮料(如白酒、葡萄酒、黄酒)中都含有EC。在各类酒精饮料中，啤酒中EC含量极低且不易检测，而葡萄酒中EC平均含量为7 22μg/L。黄酒或清酒的平均含量为200～300μg/L。前人的研究表明，酒精饮料中EC的形成主要与其前体尿素有关，尿素是由酵母中精氨酸裂解产生的。由于尿素浓度直接影响EC含量。因此降低黄酒中尿素含量是减少EC积累的主要途径。
[0003]尿素一方面来源于原料中，另一方面主要是由Saccharomyces cerevisiae代谢精氨酸所产生。S.cerevisiae是黄酒发酵中重要菌株，也是尿素产生的主要来源。因此大多数研究集中在S.cerevisiae。例如，通过抑制酿酒酵母中编码精氨酸酶的CAR1基因用于降低细胞质中尿素浓度。使用这种方法，与野生型菌株相比，EC的形成可以减少至少60％。但是这种方法浪费了培养基中的精氨酸，影响了产品的口感；过度表达DUR1,2基因(编码尿素酰胺酶，可将尿素降解为氨)或DUR3基因(编码尿素通透酶)是抑制EC含量的另一种方法。通过过度表达这些基因，尿素降解菌株产生的EC分别比原始菌株少87％和15％。然而，这种方法也可能会影响酒的味道。此外，加入现已上市的酸性尿素酶，可以有效去除黄酒中的尿素，间接抑制EC的形成。然而，脲酶对人体有害的镍离子的特殊要求限制了脲酶的利用。另一种酶是氨基甲酸酯酶，它可以直接催化葡萄酒产品中EC的分解。
[0004]虽然现在分子技术很成熟了，但经过改造的菌株可能会引起意想不到的问题。因此，急需得到一种在不破坏黄酒微生物系统的条件下，降低黄酒发酵中的尿素和EC含量的方法。
技术实现思路
[0005]本专利技术提供了一株酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)G2，已于2021年11月02日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 20211359。
[0006]所述酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)G2是从来源于黄酒发酵醪样品中分离得到的，该菌株经测序分析，其ITS2序列如SEQ ID NO.1所示，将测序得到的序列在Genbank中进行核酸序列比对，结果显示与酵母属的核酸序列相似度高达99％，根据同源性搜索结果，使用MEGA 7.0生物学软件对测试菌株和相关菌株的多个序列进行比对分析及Neighbor－Joining方法构建系统发育树，结果显示菌株属于酵母属的酿酒酵母，将其命名为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。
[0007]所述酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)G2在YPD固体培养基上的菌落呈乳白
色，圆形，边缘整齐。
[0008]本专利技术还提供了含有上述酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)G2的微生物制剂。
[0009]在本专利技术的一种实施方式中，所述微生物菌剂中，酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)G2的含量至少为：1
×
108CFU/mL。
[0010]本专利技术还提供了一种产品，所述产品中含有上述酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)G2，或上述微生物菌剂。
[0011]在本专利技术的一种实施方式中，所述产品为食品、药品或化学品。
[0012]在本专利技术的一种实施方式中，所述产品中，酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)G2的含量至少为：1
×
108CFU/mL。
[0013]本专利技术还提供了一种发酵剂，所述发酵剂中含有上述酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)G2。
[0014]在本专利技术的一种实施方式中，所述发酵剂中还含有发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)。
[0015]本专利技术还提供了一种发酵剂，所述发酵剂中，酿酒酵母与发酵乳杆菌按照活菌数为(1
×
108～1
×
10
10
CFU/mL)：(1
×
104～1
×
105CFU/mL)的比例进行配制。
[0016]在本专利技术的一种实施方式中，所述发酵乳杆菌为发酵乳杆菌CCTCC NO:M 20211358，已于2021年11月02日保藏于中国典型培养物保藏中心，命名为发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)d6。
[0017]在本专利技术的一种实施方式中，所述发酵剂中，活菌数含量至少为：1
×
104CFU/mL。
[0018]本专利技术还提供了一种降解尿素的方法，所述方法为，将上述酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)G2，或上述微生物制剂，或上述产品，或上述发酵剂添加至含有尿素的环境中进行降解。
[0019]在本专利技术的一种实施方式中，所述酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)G2添加量至少为：1
×
108CFU/mL。
[0020]本专利技术还提供了一种降解氨基甲酸乙酯的方法，所述方法为，将上述酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)G2，或上述微生物制剂，或上述产品，或上述发酵剂添加至含有氨基甲酸乙酯的环境中进行降解。
[0021]在本专利技术的一种实施方式中，所述酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)G2添加量至少为：1
×
108CFU/mL。
[0022]本专利技术还提供了一种酿造酒或蒸馏酒的制备方法，所述方法为，向原料中添加上述酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)G2，或上述微生物制剂，或上述产品，或上述发酵剂，进行发酵制备得到酿造酒或蒸馏酒。
[0023]在本专利技术的一种实施方式中，所述方法具体为：向黄酒发酵醪中添加酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)G2、发酵乳杆菌及两株菌的混合。
[0024]在本专利技术的一种实施方式中，所述酿造酒或蒸馏酒包括黄酒、白酒、葡萄酒或果酒类。
[0025]本专利技术还提供了上述酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)G2，或上述微生物制剂，或上述产品，或上述发酵剂在降低酿造酒或蒸馏酒中尿素和氨基甲酸乙酯积累中的应
用。
[0026]在本专利技术的一种实施方式中，将上述酿酒酵母(Saccharomy本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一株酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)，已于2021年11月02日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 20211359。2.含有权利要求1所述的酿酒酵母的微生物制剂。3.一种产品，其特征在于，所述产品中含有权利要求1所述的酿酒酵母，或权利要求2所述的微生物菌剂。4.一种发酵剂，其特征在于，含有权利要求1所述的酿酒酵母。5.如权利要求4所述的发酵剂，其特征在于，所述发酵剂中还含有发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)。6.如权利要求5所述的发酵剂，其特征在于，所述发酵乳杆菌为发酵乳杆菌CCTCC NO:M 20211358，已于2021年11月02日保藏于中国典型培养物保藏中心。7.一种降解尿素的方法，其特征在于，所述方法为，将权利...
【专利技术属性】
技术研发人员：余世琴，周景文，田淑芳，曾伟主，陈坚，堵国成，夏小乐，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：
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