【技术实现步骤摘要】
一种高密度发酵培养布拉迪酵母的方法
[0001]本专利技术涉及微生物发酵
，具体涉及一种高密度发酵培养布拉迪酵母的方法。
技术介绍
[0002]布拉迪酵母是酿酒酵母的亚种，是唯一的酵母益生菌，具有耐高温和耐胆盐的特性，布拉迪酵母菌不仅能提高肠道有益微生物的活性、促进肠道健康，还能抑制病原菌生长和提高肠黏膜免疫功能，从而达到预防腹泻的作用。布拉迪酵母临床上可用于防治抗生素相关性腹泻、艰难梭菌感染、旅行者腹泻、肠易激综合征、克罗恩病等疾病。此外，布拉迪酵母可以作为一种新型绿色饲料添加剂应用到畜禽养殖中，大量研究结果表明布拉迪酵母菌具有调节畜禽肠道菌群平衡、促进畜禽生长、提高畜禽免疫功能以及防治幼畜腹泻等功效。
[0003]众所周知，微生物的对数生长期不可能一直连续下去。只有在基质浓度足够高和细胞浓度较低的培养开始时的一段时间内，微生物的比生长速率才不变。发酵过程中，比生长速率的逐渐下降，最终导致酵母固形物的浓度极限只能达到某一固定值。关于酿酒酵母高密度发酵的研究有很多，但针对布拉迪酵母的研究还比较缺乏。
[...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种高密度发酵培养布拉迪酵母的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一，种子培养液的制备：将冷冻保存的优良布拉迪酵母菌种解冻培养，培养至不经稀释的培养液的OD
600
值达到2.2时，按照3％
‑
8％体积的接种量接种至种子培养基中28
‑
35℃培养18
‑
22h；步骤二，发酵罐分批补料发酵：将培养好的种子液按照3％
‑
8％体积的接种量接种至发酵罐中进行培养并时时检测葡萄糖浓度的变化；当葡萄糖浓度低于1.0g/L时，进行第1次补葡萄糖操作；之后进行第2
‑
6次补葡萄糖操作；补料发酵期间控制通气比为0.8
‑
1.8V/V
·
m，搅拌速度为200
‑
400r/min，pH维持在4.8
‑
5.2；步骤二中采用的发酵罐中初始的培养基包括如下浓度的组分：葡萄糖15
‑
24g/L，(NH4)2SO
4 10
‑
15g/L，KH2PO
4 2
‑
8g/L，MgSO4·
7H2O 8
‑
12g/L，FeSO4·
7H2O 10
‑
20mg/L，MnCl
2 2
‑
8mg/L、ZnSO
4 12
‑
18mg/L、CuSO
4 0.5
‑
1.5mg/L、肌醇20
‑
38mg/L、Nisin 10
‑
16mg/L、VB1 15
‑
25mg/L、VB2 15
‑
25mg/L。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤二中采用的发酵罐中初始的培养基包括如下浓度的组分：葡萄糖20g/L，(NH4)2SO
4 12g/L，KH2PO
4 6g/L，MgSO4·
7H2O 10g/L，FeSO4·
7H2O 15mg/L，MnCl
2 5mg/L，ZnSO
4 15mg/L，CuSO
4 1mg/L，肌醇30mg/L，Nisin 15mg/L，VB1 20mg/L和VB2 10mg/L。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述种子培养基包括如下浓度的成分：葡萄糖50g/L，(NH4)2SO48g/L，K2HPO45g/L，MgSO4·
7H2O 5g/L，酵母浸粉5g/L。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤一中，接种至种子培养基上之后的培养条件为28
‑
32℃、180
‑
220r/min。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤二中从开始培养到第1次补葡萄糖操作期间，控制通气比为0.8
‑
1.0V/V
·
m，搅拌速度为200
‑
250r/min、pH维持4.8
‑
5.0进行培养，pH用1.5mol/L的Na2CO3进行调节，培养温度为28℃～35℃。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤二中，自第1次补葡萄糖后的分批补料流程如下：(1)第1次补葡萄糖操作后7
‑
8h进行第2次补葡萄糖操作，期间控制通气比为1.0
‑
1.2V/V
·
m，搅拌速度为250
‑
300r/min，pH维持4.8
‑
5.0进行培养；(2)第2次补葡萄糖操作后6
‑
7h进行第3次补葡萄糖操作，期间控制通气比保持1.2
‑
1.4V/V
·
m，搅拌速度为300
‑
350r/min，pH维持5.0
‑
5.2进行培养；(3)第3次补葡萄糖操作后4
‑
5h进行第4次补葡萄糖操作，期间控制通气比保持1.4
‑
1.6V/V
·
m，搅拌速度为350
‑...
【专利技术属性】
技术研发人员：王利杰，孙中超，杨旭，高小创，夏志生，
申请(专利权)人：上海源耀农牧科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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