【技术实现步骤摘要】
一种基于DNAzyme调控基因编辑的方法
[0001]本专利技术属于生物材料
,具体涉及一种基于DNAzyme调控基因编辑的方法。
技术介绍
[0002]现有技术中如何对CRISPR/Cas9系统中基因编辑调控主要有两种方法:(1)利用miRNA诱导启动CRISPR基因编辑平台:通过设计具有miRNA结合位点的没有活性的sgRNA前体,使得只有在特定miRNA表达的细胞中,才会通过miRNA介导的切割反应产生成熟的sgRNA,继而引导CRISPR基因编辑体系启动工作;该方法需要针对特定的细胞寻找特定的miRNA,再根据miRNA的序列设计gRNA前体,不具有普适性。(2)基于上转换纳米粒子(UCNPs)的CRISPR/Cas9递送系统:在该递送系统中,CRISPR/Cas9通过光敏分子ONA共价锚定在UCNP上(表示为UCNPs
‑
Cas9),然后用聚乙烯亚胺(PEI)包被(表示为UCNPs
‑
Cas9@PEI),以形成纳米颗粒。然后,将这些纳米颗粒暴露在近红外光NIR下,上转换纳米 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种基于DNAzyme调控基因编辑的方法,其特征在于,所述方法具体包括:将CRISPR/Cas9系统中的gRNA的5
’
末端进行延长,获得含有5
’
末端延长片段的gRNA前体;根据所述gRNA前体的碱基序列设计8
‑
17DNAzyme底物结合臂的序列,获得与gRNA前体形成碱基互补配对的8
‑
17DNAzyme;将所述gRNA前体和8
‑
17DNAzyme作为调控CRISPR/Cas9基因编辑系统原料,通过是否加入金属离子对基因编辑进行调控。2.根据权利要求1所述的基于DNAzyme调控基因编辑的方法,其特征在于,所述gRNA的5
’
末端进行...
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