柠檬苦素在制备抗癫痫产品中的应用制造技术

本发明专利技术属于医药和食品领域，涉及柠檬苦素在制备抗癫痫产品中的应用。本发明专利技术采用斑马鱼幼鱼模型，观测到柠檬苦素可以缓解由常见惊厥剂戊四唑诱导的斑马鱼癫痫发作症状。剂戊四唑诱导的斑马鱼癫痫发作症状。剂戊四唑诱导的斑马鱼癫痫发作症状。

【技术实现步骤摘要】
柠檬苦素在制备抗癫痫产品中的应用


[0001]本专利技术属于医药和食品领域，涉及柠檬苦素在制备抗癫痫产品中的应用。

技术介绍

[0002]癫痫是全球最常见的慢性神经系统疾病之一，其特征是反复发作、不可预测且典型的无故发作。尽管任何年龄组的受试者都可能患癫痫，但新增病例最快的人群是幼儿和老年人。大约三分之二的首次癫痫发作发生在2岁以下的幼儿和75岁以上的老年人，患病率为3％。据世卫组织统计，全球至少有8000万人患有癫痫。
[0003]癫痫发作影响患者的生活质量，通常包括住院治疗，有认知和运动障碍、心理困扰、进行性记忆丧失、社会耻辱和隔离的风险。尽管有大量抗惊厥药物可用于治疗癫痫，并且新药带来了更多的治疗选择，但约30％的癫痫病例仍然存在耐药性，对抗惊厥药物治疗无反应，或者患者因其严重的副作用而停止治疗。因此从药食同源药材中寻找具有癫痫预防和治疗功能的小分子药物，可以获得安全性更高的替代药物。
[0004]柠檬苦素主要来源于柑橘属水果。其食源性的特征，说明柠檬苦素具有高度的安全性。柑橘属水果资源丰富，多达200多个物种，大多是全球十分常见的水果。这也保证了柠檬苦素具有充足的食源性原材料，便于加工制造。柑橘类水果主要由三个物种进化而来：柑桔(Citrus neticta)、柚子(C.maxima)和香橼(C.medica)。根据联合国粮食及农业组织(FAO)的年度报告，2016年，全球柑橘类水果种植面积达到681.7万公顷，产量超过1.24亿吨。柑橘类水果通常有种子和厚皮，每年产生约2万吨的加工废弃物。柑橘类废弃物容易霉变发臭，含有丰富的化学成分并具有较强的酸度，不经处理容易造成环境污染，也是巨大的资源浪费，且柑橘类水果中含有的柠檬苦素是否能够用于治疗和预防癫痫发作尚未见报道。

技术实现思路

[0005]鉴于以上技术问题，本专利技术的目的是提供天然的单体化合物柠檬苦素(limonin)的新用途，具体是柠檬苦素在制备抗癫痫产品中的用途。
[0006]优选地，所述柠檬苦素用于制备保护神经的抗癫痫产品。
[0007]优选地，所述柠檬苦素用于制备抑制脑部细胞凋亡、减轻脑部组织损伤的抗癫痫产品。
[0008]优选地，所述癫痫为急性癫痫或全身阵挛型癫痫。
[0009]优选地，所述产品为药物、功能食品或保健品。
[0010]本专利技术的第二个目的是提供一种用于预防和/或治疗癫痫的药物，其包括上述柠檬苦素，以及药学上可接受的辅料或载体。
[0011]本专利技术的第三个目的是提供一种用于预防癫痫的保健食品，其包括上述柠檬苦素，以及可接受的辅料或载体。
[0012]本专利技术的第四个目的是提供一种用于预防癫痫的功能食品，其包括上述柠檬苦
素，以及可接受的辅料或载体。
[0013]本专利技术还提供一种用于预防和/或治疗癫痫的药物组合物，其包括苯妥英钠及权利要求1
‑
4任一项所述的柠檬苦素，以及药学上可接受的辅料或载体。
[0014]优选地，所述柠檬苦素与所述苯妥英钠的摩尔比为1
‑
2∶5。
[0015]对比现有技术，本专利技术的有益效果为：
[0016]本专利技术首次揭示了柠檬苦素的抗癫痫作用。专利技术人采用斑马鱼幼鱼模型，观测到柠檬苦素可以缓解由常见惊厥剂(戊四唑，PTZ)诱导的斑马鱼癫痫发作症状；本专利技术还通过斑马鱼体内毒性评估，验证了柠檬苦素的高度安全性，无明显毒副作用；由于柠檬苦素是果汁加工废弃物中的典型成分，本专利技术也为工业废弃物的再利用提供了新的用途，对增加果汁加工产业附加值、降低环境污染具有现实意义。
附图说明
[0017]图1是不同药材及果汁加工废弃物中柠檬苦素的含量；
[0018]图2是柠檬苦素晶体的纯度分析图；
[0019]图3是柠檬苦素培养斑马鱼胚胎的孵化率；
[0020]图4是柠檬苦素培养斑马鱼幼鱼的畸形数目；
[0021]图5是柠檬苦素培养斑马鱼3天后幼鱼的形态特征；
[0022]图6是斑马鱼行为移动中心点的总距离；PS，苯妥英钠；limonin，柠檬苦素；
[0023]图7是斑马鱼运动速度中心点平均值；PS，苯妥英钠；limonin，柠檬苦素；
[0024]图8是斑马鱼行为学热点图；柠檬苦素
‑
苯妥英钠联合用药组中柠檬苦素浓度为120μM、苯妥英钠浓度为180μM；
[0025]图9是斑马鱼脑部细胞凋亡荧光图；柠檬苦素
‑
苯妥英钠联合用药组中柠檬苦素浓度为120μM、苯妥英钠浓度为180μM。
具体实施方式
[0026]下面通过具体的实施例对本专利技术做进一步说明，但是并不因此将本专利技术限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。
[0027]本专利技术提供了天然单体化合物柠檬苦素在制备预防和/或治疗癫痫的药物、保健品或功能食品中的新用途。该柠檬苦素能够通过神经保护、抑制脑部细胞凋亡，并减轻脑部组织损伤来抑制癫痫。该单体化合物柠檬苦素具有式(I)所示的结构：
[0028][0029]实施例1
[0030]不同原材料中柠檬苦素含量的液质分析：
[0031]以下所用干燥后的柑橘皮(陈皮)、柑橘籽(橘核)、柚子皮、柚子核、香橼皮、香橼籽购买自安徽亳州中药材集散批发中心，橙汁加工废弃物由杨凌红桑果食品技术有限公司提供。
[0032]每种植物材料粉碎后，取5.0g粉末依次用30ml正己烷、30ml90％甲醇在40℃下超声提取30分钟。甲醇提取液离心后取上清液，加入6
‑
溴
‑4‑
羟基香豆素作为内标，过滤后进行液质分析。色谱分离采用UPLC C
18
色谱柱(shim pack XR ODS，2.0mm
×
100mm)，流动相为10～100％的梯度乙腈，时间15分钟。为优化分离效果，流动相中加入了0.1％的乙酸。质谱仪器采用ESI正离子检测，碰撞能量35V，循环时间125ms。数据分析采用MS
‑
Dial4.0开源软件，并使用内标做归一化分析。
[0033]结果如图1所示。经过对比分析发现，这些原材料中均明显含有柠檬苦素，其中柑橘果核、香橼籽和果汁加工废弃物中的柠檬苦素相对含量最高。
[0034]实施例2
[0035]橙汁加工废弃物中柠檬苦素的分离制备：
[0036]取新鲜的加工废弃物，40℃热风烘箱中热烘30分钟，风干表面水分后粉碎过筛。取100g粉末，加入1.0L二氯甲烷回流提取1小时后过滤去除药渣。提取液回收溶剂后得到油状提取物，加入100mL的甲醇
‑
丙酮(9:1)混合溶液，超声混和后静置分层，取甲醇层过微孔滤膜，静置后得到柠檬苦素结晶粗品0.942g，过滤后溶解于热甲醇重结晶，产品纯度90％以上。柠檬苦素晶体的纯度分析图如图2所示。
[0037]实施例3
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.柠檬苦素在制备抗癫痫产品中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述柠檬苦素用于制备保护神经的抗癫痫产品。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述柠檬苦素用于制备抑制脑部细胞凋亡、减轻脑部组织损伤的抗癫痫产品。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述癫痫为急性癫痫或全身阵挛型癫痫。5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品为药物、功能食品或保健品。6.一种用于预防和/或治疗癫痫的药物，其特征在于，其包括权利要求1
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4任一项所述的柠檬苦素，以及药学上可接受的辅料或载体。7.一种用于预防癫痫的...

【专利技术属性】
技术研发人员：张强，张潇月，任思培，朱召聚，邓玉蝉，
申请(专利权)人：西北农林科技大学，
类型：发明
国别省市：