水苏碱和左旋水苏碱作为米团花蜂蜜特征性标志物的应用制造技术

本发明专利技术涉及食品检测技术领域，具体涉及水苏碱和左旋水苏碱作为米团花蜂蜜特征性标志物的应用。本发明专利技术首次在米团花蜂蜜中鉴定出水苏碱和左旋水苏碱，这两种生物碱类化合物可作为米团花蜂蜜的特征标志化合物，用于鉴别米团花蜂蜜。该鉴别方法具有较高的特异性和灵敏度。本发明专利技术的米团花蜂蜜的鉴别方法具有操作简单、高效等特点，便于推广应用，对于米团花蜂蜜的鉴别和真实性评价具有重要意义。的鉴别和真实性评价具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
水苏碱和左旋水苏碱作为米团花蜂蜜特征性标志物的应用


[0001]本专利技术涉及食品检测
，具体涉及水苏碱和左旋水苏碱作为米团花蜂蜜特征性标志物的应用。

技术介绍

[0002]唇形科（Lamiaceae）米团花属（Leucosceptrum）植物为灌木或小乔木，主要分布于中国的云南、四川以及不丹、尼泊尔、印度、老挝和越南。米团花（L. canum Smith）是一种蜜源植物，其根和叶具有药用价值。米团花蜂蜜是中蜂采集米团花花蜜并与自身分泌物混合后经充分酿造而成的天然甜味物质，营养丰富，深受消费者欢迎。米团花蜂蜜颜色极其特别，呈黑色，因此米团花蜂蜜又被称为“黑蜜”。米团花每年2
‑
4月开花，且受气候条件的影响，米团花蜂蜜产量并不稳定，然而市场对米团花蜂蜜的高需求使其掺假现象出现。因此，亟需开发鉴别米团花蜂蜜的有效方法。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的是提供水苏碱和左旋水苏碱作为米团花蜂蜜特征性标志物的应用。
[0004]本专利技术在对不同年份、不同来源的大量的米团花蜂蜜以及其它蜂蜜品种进行成分检测时，发现米团花蜂蜜所特有的两个高含量的特征化合物，其m/z分别为144.1018和160.0973。进一步将米团花蜂蜜中的上述两个特征化合物通过分离纯化制备获得纯品，通过核磁质谱确定其准确结构，最终确定这两种特征性化合物分别为水苏碱和左旋水苏碱。经大量验证发现，水苏碱和左旋水苏碱在米团花蜂蜜中的含量明显高于其它蜂蜜品种，且该特征十分稳定，因此，水苏碱和左旋水苏碱可作为米团花蜂蜜的特征性标志物，用于米团花蜂蜜的鉴别。
[0005]具体地，本专利技术提供以下技术方案：第一方面，本专利技术提供水苏碱和左旋水苏碱作为米团花蜂蜜特征性标志物的应用。
[0006]水苏碱的化学结构如式（I）所示，
式（I）；左旋水苏碱的化学结构如式（II）所示，式（II）。
[0007]第二方面，本专利技术提供水苏碱和左旋水苏碱在鉴别米团花蜂蜜中的应用。
[0008]第三方面，本专利技术提供水苏碱和左旋水苏碱在检测米团花蜂蜜的真实性中的应用。
[0009]以上所述的真实性检测具体为区分真实的米团花蜂蜜与掺假的米团花蜂蜜。其中，掺假的米团花蜂蜜是指在米团花蜂蜜中掺入除米团花蜂蜜、水苏碱和左旋水苏碱以外的物质。
[0010]掺假的米团花蜂蜜中水苏碱和左旋水苏碱的含量明显降低，因此，可通过检测水苏碱和左旋水苏碱的含量判断米团花蜂蜜是否掺假，即进行米团花蜂蜜的真实性检测。
[0011]第四方面，本专利技术提供一种米团花蜂蜜的鉴别方法，该方法为：以水苏碱和左旋水苏碱作为特征性标志物检测蜂蜜样品，若蜂蜜样品中水苏碱的含量为0.10
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1.50 g/kg，且左旋水苏碱的含量为0.10
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1.50 g/kg，则判断所述蜂蜜样品为米团花蜂蜜；若蜂蜜样品中水苏碱的含量＜0.10 g/kg，或左旋水苏碱的含量＜0.10 g/kg，则判断所述蜂蜜样品为除米团花蜂蜜以外的其它蜂蜜或为掺假米团花蜂蜜。
[0012]以上方法中，蜂蜜样品中的水苏碱和左旋水苏碱可采用本领域常规的检测方法检
测。
[0013]作为本专利技术的优选方案，采用超高效液相
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三重四极杆质谱（UHPLC
‑
QQQ）检测蜂蜜样品。
[0014]对于UHPLC
‑
QQQ检测蜂蜜样品中的水苏碱和左旋水苏碱，优选的UHPLC
‑
QQQ检测的液相条件如下：使用正相色谱柱，流动相A为水或0.1
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0.3%的甲酸水溶液，流动相B为选自甲醇、乙腈、添加0.1
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0.3%甲酸的甲醇溶液、添加0.1
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0.3%甲酸的乙腈溶液中的一种；采用梯度洗脱程序分离：0 min, 90%流动相B；1 min，90%流动相B；5.5 min，50%流动相B；8.5 min，50%流动相B；9 min，90 %流动相B，后运行3 min。柱温为30℃。流速为0.2
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0.8 mL/min，进样量为2
ꢀµ
L。
[0015]优选的UHPLC
‑
QQQ检测的质谱条件如下：雾化器温度为200
‑
250℃，雾化气流速为12
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16 L/min，雾化气压力为30
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50 psi，鞘气温度为300
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350℃，鞘气流速为8
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13 L/min，电离电压为3000 V，碎片电压为 60
‑
175 V, 扫描方式为正离子模式，多反应监测模式。
[0016]采用上述检测方法，当碰撞电压（CE）为30V时，水苏碱的保留时间为2.3min，母离子m/z为144.1，子离子m/z为58.3；左旋水苏碱的保留时间为3.4min，母离子m/z为160.1，子离子m/z为58.1。
[0017]当碰撞电压（CE）为20V时，水苏碱的保留时间为2.3min，母离子m/z为144.1，子离子m/z为84.2；左旋水苏碱的保留时间为3.4min，母离子m/z为160.1，子离子m/z为88.1。
[0018]在UHPLC
‑
QQQ检测前，将待测蜂蜜样品与水混合，用滤膜过滤，即可进行进样检测。蜂蜜样品与水混合的质量比可为1:5。
[0019]本专利技术考察了上述检测方法的准确度和精密度，结果表明，该方法的准确度在83
‑
112%之间，变异系数均小于15%，检测限可达到3 μg/kg，符合分析检测的要求。
[0020]本专利技术的有益效果在于：本专利技术首次在米团花蜂蜜中鉴定出水苏碱和左旋水苏碱，这两种生物碱类化合物可作为米团花蜂蜜的特征标志化合物，用于鉴别米团花蜂蜜。该鉴别方法具有较高的特异性和灵敏度，对于目标化合物的检出限可达到3 μg/kg。本专利技术的米团花蜂蜜的鉴别方法具有操作简单、高效等特点，便于推广应用，对于米团花蜂蜜的鉴别和真实性评价具有重要意义。
附图说明
[0021]图1为本专利技术实施例1中水苏碱的二级质谱图。
[0022]图2为本专利技术实施例1中左旋水苏碱的二级质谱图。
[0023]图3为本专利技术实施例1中水苏碱纯品的定量离子色谱图（m/z 58.3）。
[0024]图4为本专利技术实施例1中水苏碱纯品的定性离子色谱图（m/z 84.2）。
[0025]图5为本专利技术实施例1中米团花蜂蜜样品中水苏碱定量离子（m/z 58.3）色谱图。
[0026]图6为本专利技术实施例1中米团花蜂蜜样品中水苏碱定性离子（m/z 84.2）色谱图。
[0027]图7为本专利技术实施例1中左旋水苏碱纯品的定量离子（m/z 58.1）色谱图。
[0028]图8为本专利技术实施例1中左旋水苏碱纯品的定性离子（m/z 88.1）色谱图。
[0029]图9为本专利技术实施例1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.水苏碱和左旋水苏碱作为米团花蜂蜜特征性标志物的应用。2.水苏碱和左旋水苏碱在鉴别米团花蜂蜜中的应用。3.水苏碱和左旋水苏碱在检测米团花蜂蜜的真实性中的应用。4.一种米团花蜂蜜的鉴别方法，其特征在于，以水苏碱和左旋水苏碱作为特征性标志物检测蜂蜜样品，若蜂蜜样品中水苏碱的含量为0.10
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1.50 g/kg，且左旋水苏碱的含量为0.10
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1.50 g/kg，则判断所述蜂蜜样品为米团花蜂蜜；若蜂蜜样品中水苏碱的含量＜0.10g/kg，或左旋水苏碱的含量＜0.10 g/kg，则判断所述蜂蜜样品为除米团花蜂蜜以外的其它蜂蜜或为掺假米团花蜂蜜。5.根据权利要求4所述的米团花蜂蜜的鉴别方法，其特征在于，采用超高效液相
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三重四极杆质谱检测所述蜂蜜样品。6.根据权利要求5所述的米团花蜂蜜的鉴别方法，其特征在于，所述超高效液相
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三重四极杆质谱检测的液相条件如下：使用正相色谱柱，流动相A为水或0.1
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0.3%的甲酸水溶液，流动相B为选自甲醇、乙腈、添加0.1
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0.3%甲酸的甲醇溶液、添加0.1
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0.3%甲酸的乙腈溶液中的一种；采用梯度洗脱程序分离：0 min, 90%流动相B；1 min，90%流动相B；5.5 min，50%流动相B；8.5 min，50%流动相B；9 min，90 %流动...

【专利技术属性】
技术研发人员：延莎，王宣，田文礼，王凯，吴黎明，薛晓锋，
申请(专利权)人：中国农业科学院蜜蜂研究所，
类型：发明
国别省市：