表达SARS-CoV-2纤突蛋白或其变异体S制造技术

本发明专利技术提供一种表达SARS

【技术实现步骤摘要】
表达SARS
‑
CoV
‑
2纤突蛋白或其变异体S
Δ
21
的假型化VSV病毒构建和应用


[0001]本专利技术涉及新型冠状病毒研究
，涉及一种表达SARS
‑
CoV
‑
2纤突蛋白(S) 或其变异体的假型化VSV病毒及其构建和应用；尤其涉及一种表达SARS
‑
CoV
‑
2的纤 突蛋白(S)或其羧基末端发生缺失的重组水泡性口炎病毒(VSV)及其构建和应用。

技术介绍

[0002]根据血清型和基因组特点，冠状病毒科被分为α、β、γ和δ四个属。CoV
‑
2属于β冠 状病毒属，该属冠状病毒还包括中东呼吸综合征相关冠状病毒(MERS
‑
CoV)和严重呼 吸综合征相关冠状病毒(SARS
‑
CoV),对CoV
‑
2全长基因组进行的系统进化分析表明， 该新型冠状病毒与SARS病毒的相似度高于MERS病毒。
[0003]CoV<br/>‑
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于高效表达和用于基于重组水泡性口炎病毒的新型新冠疫苗的构建的SARS
‑
CoV
‑
2病毒S基因，其特征在于，所述SARS
‑
CoV
‑
2病毒S基因系全基因人工合成，合成的基因的密码子按人细胞密码子优化，序列如SEQ ID NO.1所示。2.一种表达人新型冠状病毒SARS
‑
CoV
‑
2纤突蛋白S的重组水泡性口炎病毒VSV的构建方法，其特征在于，所述方法包括：敲除VSV负责识别宿主细胞受体的G蛋白基因，通过SARS
‑
CoV
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2的S蛋白或其变异体SΔ21蛋白构建假型化VSV病毒；SΔ21为胞内区缺失21个氨基酸的S蛋白变异体。3.根据权利要求2所述的表达人新型冠状病毒SARS
‑
CoV
‑
2纤突蛋白S的重组水泡性口炎病毒VSV的构建方法，其特征在于，采用野生型VSV病毒或M三位点突变的VSV病毒为载体，构建表达SARS
‑
CoV
‑
2的S蛋白或其变异体SΔ21的假型化VSV病毒。4.根据权利要求2所述的表达人新型冠状病毒SARS
‑
CoV
‑
2纤突蛋白S的重组水泡性口炎病毒VSV的构建方法，其特征在于，编码所述SARS
‑
CoV
‑
2的S蛋白的序列如SEQ ID NO.1所示。5.根据权利要求2所述的表达人新型冠状病毒SARS
‑
CoV
‑
2纤突蛋白S的重组水泡性口炎病毒VSV的构建方法，其特征在于，具体步骤如下：A1、重组质粒构建：a11、对SARS
‑
CoV
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2病毒S基因进行碱基敲除并获得优化的长度，获得S蛋白突变体SΔ21；a12、构建克隆VSV Indiana株全长基因组序列的质粒pVSV
IND
或pVSV
MT
；a13、将S或S
Δ21
基因进行高保真PCR扩增，其5
’
和3
’
末端分别含有MluI和XhoI酶切位点，经双酶切后分别克隆到pVSV
IND
、pVSV
MT
质粒中，使S或S
Δ21
基因替换掉VSV中的G基因，分别获得重组质粒pVSV
ΔG
‑
S、pVSV
ΔG
‑
SΔ21、pVSV
MTΔG<...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙涛，张宝红，柯勇，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：