用于制备抗IL12/IL23抗体组合物的制造方法技术

用于在CHO中制备抗IL

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于制备抗IL12/IL23抗体组合物的制造方法
[0001]以电子方式提交的参考序列表
[0002]本申请含有序列表，该序列表以电子方式经由EFS
‑
Web以ASCII格式化序列表提交，文件名为
″
JBI6056WOPCT1SEQLIST.txt
″
，创建日期为2020年3月5日，并且大小为14,000字节。经由EFS
‑
Web提交的该序列表是本说明书的一部分并且全文以引用方式并入本文。


[0003]本专利技术涉及用于制备抗IL
‑
12/IL
‑
23p40抗体(例如，抗IL
‑
12/IL
‑
23p40抗体优特克单抗)的制造方法以及所述抗体的特定药物组合物。

技术介绍

[0004]白介素(IL)
‑
12是分泌的异二聚体细胞因子，其由2个二硫键连接的糖基化蛋白质亚基组成，根据它们的近似分子量被命名为p35和p40。IL
‑
12主要由抗原呈递细胞产生，并且通过与在T细胞或自然杀伤(NK)细胞的表面上表达的双链受体复合物结合来驱动细胞介导的免疫。IL
‑
12受体β
‑
1(IL
‑
12Rβ1)链结合到IL
‑
12的p40亚基，从而提供IL
‑
12与其受体之间的主要相互作用。然而，是第二受体链IL
‑
12Rβ2的IL
‑
12p35连接赋予了细胞内信号传导(例如STAT4磷酸化)和对受体承载细胞的激活(Presky等人，1996)。与抗原呈递同时发生的IL
‑
12信号传导被认为引起T细胞向T辅助细胞1(Th1)表型分化，其特征在于产生干扰素γ(IFN
‑
γ)(Trinchieri，2003)。据信，Th1细胞促进对一些细胞内病原体的免疫、产生补体固定抗体同种型，并且有助于肿瘤免疫监视。因此，IL
‑
12被认为是宿主防御免疫机制的重要组成部分。
[0005]据发现，IL
‑
12的p40蛋白质亚基也可以与被命名为p19的单独的蛋白质亚基缔合，以形成新的细胞因子IL
‑
23(Oppman等人，2000)。IL
‑
23还通过双链受体复合物发出信号。由于p40亚基在IL
‑
12与IL
‑
23之间共享，因此IL
‑
12Rβ1链也在IL
‑
12与IL
‑
23之间共享。然而，是IL
‑
23受体复合物的第二组分IL
‑
23R的IL
‑
23p19连接赋予了IL
‑
23特异性细胞内信号传导(例如，STAT3磷酸化)以及后续的由T细胞产生IL
‑
17(Parham等人，2002；Aggarwal等人，2003)。最近的研究已证实，IL
‑
23的生物学功能不同于IL
‑
12的生物学功能，尽管这两种细胞因子之间具有结构相似性(Langrish等人，2005)。
[0006]IL
‑
12细胞群和Th1细胞群的异常调节一直与许多免疫介导的疾病相关联，因为用抗体中和IL
‑
12能够有效地治疗银屑病、多发性硬化症(MS)、类风湿性关节炎、炎性肠病、胰岛素依赖型(1型)糖尿病和葡萄膜炎的动物模型(Leonard等人，1995；Hong等人，1999；Malfait等人，1998；Davidson等人，1998)。在两个独立的系统性红斑狼疮小鼠模型中，IL
‑
12也被证明在SLE的发病机制中起关键作用(Kikawada等人，2003；Dai等人，2007)。
[0007]系统性红斑狼疮(SLE)是一种复杂的慢性异质自身免疫疾病，其病因未知，可以影响几乎任何器官系统，并且其遵循盛衰疾病过程。系统性红斑狼疮在女性中比在男性中更常发生，在一些研究中其频率高达9倍，并且经常在15至45岁的育龄期出现。这种疾病在非洲裔加勒比人、亚洲人和西班牙人群体中更为普遍。在SLE中，免疫系统攻击身体的细胞和
组织，导致炎症和组织损伤，这可损害心脏、关节、皮肤、肺、血管、肝脏、肾脏和神经系统。大约一半被诊断为SLE的受试者患有危及器官的疾病，但诊断未患有器官受累的受试者可能需要数年时间。新诊断的狼疮患者的一些主要症状是关节痛(62％)和皮肤症状(新的光敏性；20％)，其次是持续发烧和不舒服。估计的狼疮的年发病率为每100,000人1.8至7.6例，而全球患病率为每100,000人14至172例。轻症患者大部分为皮疹和关节痛，并且需要不那么激进的疗法；方案包括非甾体抗炎药(NSAID)、抗疟疾药(例如羟氯喹、氯喹或奎纳克林)和/或低剂量皮质类固醇。对于更严重的疾病，取决于所涉及的器官系统，患者可能经历多种严重的病症，包括具有潜在肾衰竭的狼疮肾炎、心内膜炎或心肌炎、肺炎、妊娠并发症、中风、神经并发症、血管炎和具有出血或感染的相关风险的血细胞减少症。更严重的疾病的常见治疗包括免疫调节剂，诸如甲氨蝶呤(MTX)、硫唑嘌呤、环磷酰胺、环孢菌素、高剂量皮质类固醇、生物B细胞细胞毒性剂或B细胞调节剂以及其他免疫调节剂。严重SLE患者的预期寿命会缩短10至30年，这主要是由于该疾病、标准护理疗法和/或加速的动脉粥样硬化的并发症。另外，SLE对生活质量、工作效率和医疗保健支出具有显著影响。现有的SLE疗法通常具有细胞毒性或免疫调节性，并且可能有明显的安全风险。较新的SLE治疗仅提供了优于标准护理疗法的适度益处。因此，对于可以在该疾病中提供显著益处而不招致高安全风险的新替代治疗存在尚未满足的很大需求。

技术实现思路

[0008]本专利技术的实施方案分别由本文所附的独立权利要求和从属权利要求限定，为了简洁起见，这些权利要求以引用方式并入本文。根据下面结合附图的详细描述，本专利技术的各个方面的其他实施方案、特征和优点是显而易见的。
[0009]在某些实施方案中，本专利技术提供了在中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)中表达的抗IL
‑
12/IL
‑
23p40抗体。由本专利技术定义的
″
抗IL
‑
12/IL
‑
23p40抗体
″
包括在中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)中表达的具有选自由以下项组成的组的氨基酸序列的抗体：(i)包含SEQ ID NO：10的氨基酸序列的重链(HC)和包含SEQ ID NO：11的氨基酸序列的轻链(LC)；(ii)SEQ ID NO：7的重链可变结构域氨基酸序列和SEQ ID NO：8的轻链可变结构域氨基酸序列；以及(iii)SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3的重链CD本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种分离的抗IL
‑
12/IL
‑
23p40抗体，所述分离的抗IL
‑
12/IL
‑
23p40抗体包含选自由以下项组成的组的氨基酸序列：(i)包含SEQ ID NO：10的氨基酸序列的重链(HC)和包含SEQ ID NO：11的氨基酸序列的轻链(LC)；(ii)SEQ ID NO：7的重链可变结构域氨基酸序列和SEQ ID NO：8的轻链可变结构域氨基酸序列；以及(iii)SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3的重链CDR氨基酸序列以及SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6的轻链CDR氨基酸序列，其中所述抗IL
‑
12/IL
‑
23p40抗体在中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)中表达。2.根据权利要求1所述的抗IL
‑
12/IL
‑
23p40抗体，其中所述抗IL
‑
12/IL
‑
23p40抗体的低聚糖谱包含＞99.0％的总中性低聚糖种类和<1.0％的总带电低聚糖种类。3.根据权利要求2所述的抗IL
‑
12/IL
‑
23p40抗体，其中所述抗IL
‑
12/IL
‑
23p40抗体的低聚糖谱还包含＞70.0％的单个中性低聚糖种类G0F、＜20.0％的G1F和＜5.0％的G2F。4.根据权利要求2所述的抗IL
‑
12/IL
‑
23p40抗体，其中所述抗IL
‑
12/IL
‑
23p40抗体的毛细管等电聚焦(cIEF)电泳图的峰3面积％＞70.0％。5.根据权利要求2所述的抗IL
‑
12/IL
‑
23p40抗体，其中所述抗IL
‑
12/IL
‑
23p40抗体不具有二唾液酸化聚糖种类，如通过高效液相色谱(HPLC)或减少质量分析(RMA)所确定。6.根据权利要求1
‑
5中任一项所述的抗IL
‑
12/IL
‑
23p40抗体，其中与在Sp2/0细胞中表达的具有相同氨基酸重链和轻链序列的抗IL
‑
12/IL
‑
23p40抗体相比，所述抗IL
‑
12/IL
‑
23p40抗体具有更长的半衰期。7.根据权利要求1
‑
5中任一项所述的抗IL
‑
12/IL
‑
23p40抗体，其中所述抗IL
‑
12/IL
‑
23p40抗体包括后续生物制剂。8.一种用于制备抗IL
‑
12/IL
‑
23p40抗体的制造方法，所述抗IL
‑
12/IL
‑
23p40抗体包含选自由以下项组成的组的氨基酸序列：(i)包含SEQ ID NO：10的氨基酸序列的重链(HC)和包含SEQ ID NO：11的氨基酸序列的轻链(LC)；(ii)SEQ ID NO：7的重链可变结构域氨基酸序列和SEQ ID NO：8的轻链可变结构域氨基酸序列；以及(iii)SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3的重链CDR氨基酸序列以及SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6的轻链CDR氨基酸序列，所述制造方法包括以下步骤：a.培养具有编码抗IL
‑
12/IL
‑
23p40抗体的核苷酸的中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)；b.在所述CHO细胞中表达所述抗IL
‑
12/IL
‑
23p40抗体；以及，c.纯化所述抗IL
...

【专利技术属性】
技术研发人员：K，
申请(专利权)人：詹森生物科技公司，
类型：发明
国别省市：