重组蛋白的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种重组蛋白的制备方法，其具备以下工序：第1工序，其将在诱导型启动子的控制下表达重组蛋白的重组细胞在包含半乳糖，以及选自由甘露醇、棉子糖和蜜二糖构成的组中的至少2种在内的培养基中进行培养；第2工序，其在第1工序之后，在诱导诱导型启动子的表达的条件下进一步培养重组细胞。条件下进一步培养重组细胞。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】重组蛋白的制备方法


[0001]本专利技术涉及一种重组蛋白的制备方法。

技术介绍

[0002]在利用微生物进行有用物质的工业生产中，提高生产率是重要课题。因此，研究了各种培养方法。在重组蛋白的生产中，常用的方法是将处于诱导型启动子的控制下的重组蛋白的表达盒导入宿主细胞中，并将该重组细胞导入培养用培养基中，培养后通过营养素的供给使该重组细胞增殖至所希望的浓度，根据启动子加入阿拉伯糖、乳糖或异丙基
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硫代半乳糖苷(IPTG)等诱导剂，诱导重组蛋白的表达的方法。
[0003]例如，在将T7启动子用于重组蛋白的表达的情况下，已知有一种与T7RNA聚合酶相组合的IPTG诱导pET系统(专利文献1和非专利文献1)。
[0004]虽然T7启动子表达系统很强，但是重组蛋白的表达会对宿主造成强烈的应激，有时会影响细胞增殖、无法提高表达效率。通过改良启动子序列、或改善作用于该启动子的所谓转录因子的结构等，并通过控制基因的转录水平/响应来尝试改善(非专利文献2和3)。虽然以这种方式尝试了改良，但是仍需确立具有本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种所述重组蛋白的制备方法，其具备以下工序：第1工序，其将在诱导型启动子的控制下表达重组蛋白的重组细胞在包含半乳糖，以及选自由甘露醇、棉子糖和蜜二糖构成的组中的至少2种在内的培养基中进行培养；第2工序，其在所述第1工序之后，在所述诱导诱导型启动子的表达的条件下进一步培养所述重组细胞。2.根据权利要求1所述的制备方法，其中，所述诱导型启动子是异丙基
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硫代半乳糖苷(IPTG)诱导型启动子。3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其中，所述诱导型启动子是T7启动子。4.根据权利要求2或3所述的制备方法，其中，所述第2工序是将IPTG添加到所述培养基中，进一步培养...

【专利技术属性】
技术研发人员：小林雅人，仓知建始，森英词，野田昂文，
申请(专利权)人：丝芭博株式会社，
类型：发明
国别省市：