【技术实现步骤摘要】
一种检测人血清中痕量免疫球蛋白G浓度的方法
[0001]本专利技术涉及免疫球蛋白G检测
,尤其涉及一种检测人血清中痕量免疫球蛋白G浓度的方法。
技术介绍
[0002]免疫球蛋白G是血清的主要的抗体成分,占血清免疫球蛋白的75%,在机体的免疫中起保护的作用,还有抗菌,抗病毒等功能,有效预防相应的感染性疾病,如麻疹,水痘等。同时对某些疾病有诊断意义,如甲肝抗体,戊肝抗体等。免疫球蛋白G主要由脾和淋巴结中的浆细胞合成和分泌。免疫球蛋白G是唯一可以通过胎盘的免疫球蛋白,来自母体的免疫球蛋白质,能保护婴儿,防御白喉,麻疹,脊髓灰质炎等疾病。
[0003]IgG的经典检测方法有免疫浊度法和非均相酶免疫分析法,但这些方法需要繁琐的加样、温育和洗涤等步骤,手工操作耗时且精密度差。高效液相色谱法和金属螯合色谱法分离提取免疫球蛋白,虽然提高了检测灵敏度,但前处理步骤繁琐。而常用的紫外吸收法需对样品进行复杂的纯化操作,可能破坏生物活性和结构。
技术实现思路
[0004]本专利技术的目的是为了解决上述的问题,而提出的一 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种检测人血清中痕量免疫球蛋白G浓度的方法,其特征在于,包括:S1、试剂准备IgG标准溶液配制:用5mmol/L磷酸盐缓冲溶液(pH7.0)稀释IgG标准品,配制成4.6
×
10-4g/L的IgG标准溶液;荧光素异硫氰酸酯(FITC)溶液配制:准确称取FITC标准品,用丙酮溶解,配制成5
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10-4mol/L的FITC溶液,置于冰箱中4℃保存;人血清:用0.45μm滤膜过滤后再用生理盐水稀释10000倍;S2、柱前衍生取2μL待测IgG标准样品或人血清于500μL离心管中,加入80μL5
×
10-4mol/L的FITC丙酮溶液,再加入10mmol/L硼砂缓冲溶液(pH9.5)至100μL,于暗处室温下反应14~16h,分析前用缓冲溶液稀释至所需浓度后进样测定;S3、毛细管电泳新毛细管依次用1mol/L的HCl溶液、亚沸蒸馏水和1mol/L的NaOH溶液各冲洗30min,每两次测定之间分别用亚沸蒸馏水、0.1mol/L的NaOH和电泳缓冲溶液各冲洗2min,电泳缓冲溶液为20mmol/L硼砂溶液(p...
【专利技术属性】
技术研发人员:胡治勇,葛云,兰萍,
申请(专利权)人:武汉戴安生物技术有限公司,
类型:发明
国别省市:
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