枸杞不同溶剂提取有效部位促上火成分药效筛选方法技术

本发明专利技术涉及一种枸杞不同溶剂提取有效部位促上火成分药效筛选方法，该方法包括以下步骤：

【技术实现步骤摘要】
枸杞不同溶剂提取有效部位促上火成分药效筛选方法


[0001]本专利技术涉及植物有效成分提取
，尤其涉及枸杞不同溶剂提取有效部位促上火成分药效筛选方法。

技术介绍

[0002]枸杞属植物种质资源全世界约有80种，有药用记载的16种，其中以果实入药的有8种，以枝叶入药的有11种，以根入药的有9种。枸杞又名杞，枸檵，枸忌，羊乳等，为历代本草所记载。枸杞属植物在我国有7个品种和3个变种，其中宁夏枸杞 ( Lycium barbarum L. ) 、枸杞 ( Lycium chinense Mill. ) 、北方枸杞 ( Lycium chinense Mill. var. potaninii( Pojark. ) A. M. Lu) 都有药用功能。近来年，我国枸杞种植业得到快速发展，种植规模突破230万亩，产值从2010年的57.6亿元增长至2016年的90亿元左右，枸杞子作为食品和营养保健品在亚洲及欧美等多国零售市场中销售，受国际市场追捧。但是枸杞子引起“上火”的情况也值得关注，何莉莎等研究发现，在617例调查对象中有161例(26. 09%) 服用枸杞子后出现“上火”现象，且“上火”常表现为口干咽干74例(11. 99%) 、鼻出血70例(11. 35%)、咽喉肿痛46例(7. 46%)（何莉莎，赵林华，叶茹，等.枸杞子与“上火”的关系问卷调查.中医杂志，2017，58（2）：111
‑
114）。因此，为更好地认识枸杞子促“上火”的实质，应用不同溶剂提取枸杞有效部位发现其促“上火”实质性成分尤其重要。
[0003]马捷等通过对秦汉至民国共计1098 部中医古代医籍进行检索查阅，发现仅在清代黄述宁著的《黄澹翁医案》“中秋前一日，右关又有弦数之象，鼻塞，上火，皮外热汗，当微解之。荆芥、防风、前胡、陈皮、甘草、桔梗、杏仁、半夏”中有过“上火”的记载。现代文献部分检索到文献3285篇。进一步筛选，共有相关文献 1573 篇：治疗类 721 篇，理论探讨类 757 篇，综述类8篇，实验类107篇，其中“上火”相关文献 220 篇。研究人员针对纳入的“上火”相关文献进行了分析（马捷，宋月晗，梁嵘等.“上火”科学内涵的文献研究.中医学报，2016,3（31）：372
‑
375）。
[0004]李思敏等研究表明，当机体处于过氧化和抗氧化的相互斗争中时，会出现口腔溃疡、牙龈肿痛等一系列“上火”症状（李思敏，包洁，汪琴静，等．氧化应激与实热“上火”的相关性研究．世界中医药，2017，12( 12) : 2872）。目前对服用枸杞“上火”的解释主要有炎症、自由基过多、中分子物质过多和营养成分过剩或不足等几种假设，但这些都没有得到过药理学面的证实（李亚英，李燕，付新梅，等.系统药理学法研究“上火”与氧化应激之间的关系.分子科学学报，2015,31（2）:108
‑
114）。

技术实现思路

[0005]本专利技术所要解决的技术问题是提供一种枸杞不同溶剂提取有效部位促上火成分药效筛选方法。
[0006]为解决上述问题，本专利技术所述的枸杞不同溶剂提取有效部位促上火成分药效筛选方法，包括以下步骤：
⑴
将宁夏枸杞Lycium barbarum L.的干燥成熟果实先用其质量8~12倍的水进行煎煮，每次30分钟，煎煮3次，得到煎煮液；
⑵
所述煎煮液经四层纱布过滤，得到滤液，该滤液按每500 g原料计采用0.0262~385g不同溶剂进行提取，得到提取液；所述提取液经浓缩、干燥得到提取物；
⑶
所述提取物经吐温
‑
80进行悬浮溶解，然后分为6组，并配制浓度为0.04~3.6%；
⑷
将所述步骤
⑶
中各组溶液通过灌胃方法给药，30天后，测定血清中活性氧、一氧化氮、丙二醛、超氧岐化酶、谷胱甘肽及肝脏组织切片变化即可。
[0007]所述步骤
⑵
中溶剂是指石油醚、氯仿、乙酸乙酯、去离子水中的一种。
[0008]本专利技术与现有技术相比具有以下优点：本专利技术通过不同溶剂提取枸杞效用部位，应用血清药理学方法和客观指标，检测枸杞不同提取部位是否具有促动物机体上火作用，同时应用肝脏组织病例切片，反映提取物对动物肝脏的炎性反映，最终确定枸杞促上火主要大类化学成分，为进一步将枸杞上火成分发酵减少做理论根据。
附图说明
[0009]下面结合附图对本专利技术的具体实施方式作进一步详细的说明。
[0010]图1为本专利技术小鼠肝脏组织切片。其中：a为A 对照组（HE，
×
200）；b为B组（HE，
×
200）；c为C 组（HE，
×
200）；d为D组（HE，
×
200）；e为E 组（HE，
×
200）；f为F组（HE，
×
200）。
具体实施方式
[0011]枸杞不同溶剂提取有效部位促上火成分药效筛选方法，包括以下步骤：
⑴
将宁夏枸杞Lycium barbarum L.的干燥成熟果实先用其质量8~12倍的水进行煎煮，每次30分钟，煎煮3次，得到煎煮液。
[0012]⑵
煎煮液经四层纱布过滤，得到滤液，该滤液按每500 g原料计采用0.0262~385g不同溶剂进行提取，得到提取液；提取液经浓缩、干燥得到提取物。溶剂是指石油醚、氯仿、乙酸乙酯、去离子水中的一种。
[0013]⑶
提取物经吐温
‑
80进行悬浮溶解，然后分为6组，分别为空白组（蒸馏水组）A、吐温
‑
80组B、吐温80
‑
石油醚混悬组C、吐温80
‑
氯仿组D、吐温80
‑
乙酸乙酯组E、吐温80
‑
水相组F，并配制浓度为0.04~3.6%.
⑷
将步骤
⑶
中各组溶液通过灌胃方法给小鼠给药，30天后，测定小鼠血液和血清中活性氧（ROS）、一氧化氮（ON）、丙二醛（MDA）、超氧岐化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）及肝脏组织切片变化即可。
[0014]实施例
[0015]【主要仪器及试剂】一次性使用无菌针灸针（0.25 mm
×
25 mm，苏州医疗用品厂有限公司），离心机（美国Thermo公司），BX53生物显微镜（日本奥林巴斯公司）；试剂盒ROS（活性氧）（201902）、ON（一氧化氮）（201905）、MDA（丙二醛）（201906）、SOD（超氧岐化酶）（201908）、GSH（谷胱甘肽）
（201903），均购置于甘肃华诺科贸有限公司；石油醚、氯仿、乙酸乙酯均购置于甘肃华诺科贸有限公司。
[0016]【实验材料】药材枸杞购于兰州市白宝药业有限公司，批号为20200618，经兰州大学药学院李建银老师鉴定为茄科植物宁夏枸杞Lycium barbarum L.的干燥成本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.枸杞不同溶剂提取有效部位促上火成分药效筛选方法，包括以下步骤：
⑴
将宁夏枸杞Lycium barbarum L.的干燥成熟果实先用其质量8~12倍的水进行煎煮，每次30分钟，煎煮3次，得到煎煮液；
⑵
所述煎煮液经四层纱布过滤，得到滤液，该滤液按每500 g原料计采用0.0262~385g不同溶剂进行提取，得到提取液；所述提取液经浓缩、干燥得到提取物；
⑶
所述提取物经吐温

【专利技术属性】
技术研发人员：李素岳，张鸣明，李建银，胡先望，何海宁，广忠勇，江爱莲，
申请(专利权)人：甘肃省商业科技研究所有限公司，
类型：发明
国别省市：