一种对胰蛋白酶抗性提高的玉米赤霉烯酮水解酶制造技术

本发明专利技术公开了一种对胰蛋白酶抗性提高的玉米赤霉烯酮水解酶，它是由氨基酸序列为SEQ ID NO.1的来源于粉红螺旋聚孢霉(Clonostachys rosea)的玉米赤霉烯酮水解酶中制造单个氨基酸取代而产生的、对胰蛋白酶抗性更强的酶，所述的氨基酸取代是第262位的取代。本发明专利技术通过蛋白质工程技术对野生型玉米赤霉烯酮水解酶分子内的关键氨基酸残基进行了改造，提供了一种对胰蛋白酶抗性提高的玉米赤霉烯酮水解酶突变体，该酶对胰蛋白酶的抗性半衰期比野生型玉米赤霉烯酮水解酶延长了20.8％，其他酶学性质与野生型玉米赤霉烯酮水解酶基本一致。解酶基本一致。解酶基本一致。

【技术实现步骤摘要】
一种对胰蛋白酶抗性提高的玉米赤霉烯酮水解酶


[0001]本专利技术涉及玉米赤霉烯酮水解酶，特别涉及到对胰蛋白酶抗性提高的玉米赤霉烯酮水解酶。

技术介绍

[0002]玉米赤霉烯酮水解酶(简称ZHD101)，又称为玉米赤霉烯酮降解酶。玉米赤霉烯酮降解酶ZHD101基因是粉红螺旋聚孢霉中的一个编码泛解酸内酯水解酶的基因，该基因编码的蛋白ZHD101能够特异性结合并降解玉米赤霉烯酮。其反应降解机制是ZHD101将ZEN的酯键断开，变成带有开放侧链的二羟基苯基衍生物，随后丢失CO2得到一种无毒的烷基间苯二酚产物，该产物无毒。因此，它常被用作食品添加剂，或者用作饲料添加剂以提高饲料利用率。
[0003]ZHD101分为水解酶折叠中心结构域和帽子结构。两个结构的连接处形成一个较大的凹槽，此凹槽经底物复合体结构证实为底物结合位点。底物ZEN间苯环部分主要被氢键固定，内酯环部分主要通过疏水作用力结合到活性中心。由结构分析的结果，ZHD101的催化三联体是S102，H242和E126，收集底物复合体的结构S102突变为A102。S102作为亲核试剂攻击底物本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种对胰蛋白酶抗性提高的玉米赤霉烯酮水解酶，其特征在于：它是由氨基酸序列为SEQ ID NO.1的来源于粉红螺旋聚孢霉(Clonostachys rosea)的玉米赤霉烯酮水解酶中制造单个氨基酸取代而产生的、对胰蛋白酶抗性更强的酶，所述的氨基酸取代是第262位的氨基酸取代。2.根据权利要求1所述的对胰蛋白酶抗性提高的玉米赤霉烯酮水解酶，其特征在于：所述在第262位的氨基酸取代是用异亮氨酸取代赖氨酸；所述的定点突变改造的玉米赤霉烯酮水解酶的氨基酸序列为SEQ ID NO.2。3.一种DNA分子，其特征在于：其编码权利要求2所述的对胰蛋白酶抗性提高的玉米赤霉烯酮水解...

【专利技术属性】
技术研发人员：姚冬生，牛芳园，钱丹，刘大岭，谢春芳，刘桂祯，黄炯威，莫世艺，
申请(专利权)人：广东方善能动物保健有限公司，
类型：发明
国别省市：